一、纳洛酮对血管性痴呆大鼠空间学习记忆减退的防治作用（论文文献综述）
程越[1]（2021）在《补脾醒神益智法对脾虚认知功能障碍大鼠TREM2/NF-κb信号通路作用机制的研究》文中认为目的:以“脾脑相关”理论为指导,系统论述认知功能障碍与脾脏的相关性,并采取病证结合方式,建立脾虚认知功能障碍大鼠模型,探究补脾醒神益智方对脾虚认知功能障碍的疗效及作用机制,为临床防治认知功能障碍提供理论及实验依据。材料与方法:第一部分:理论研究通过对古籍文献的整理以及相关理论的分析,梳理认知功能障碍的病名及病因病机,从脾与脑、脾与认知功能、脾与衰老等多方面论述脾与认知功能障碍的密切关系,探究补脾醒神益智法作为防治认知功能障碍治法的优势及补脾醒神益智方广阔的应用前景。第二部分:实验研究将60只SPF级SD大鼠,雌雄各半,随机分为正常组、认知功能障碍组、脾虚认知功能障碍组、安理申组、补脾醒神益智方组,共5组,每组12只,适应性喂养1周。采用复合因素、病证结合以及海马注射Aβ1-42的方法建立脾虚认知功能障碍模型,即第2、3周进行脾虚模型的建立,第4周进行海马CA1区Aβ1-42注射后进入灌胃治疗阶段,正常组、认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组治疗期间予0.9%生理盐水灌胃,剩余两组予对应药物灌胃,治疗周期为4周。于灌胃第四周依序开始进行水迷宫适应性训练、定位航行以及空间探索实验,评价不同组别之间大鼠的学习记忆能力。最后一次灌胃结束后,禁食24h后麻醉取材,采用HE染色法观察和分析各组大鼠脑组织神经元形态的变化,ELISA法检测各组别大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,运用RT-PCR及Western blot法检测脑组织中Aβ、NF-κB、TREM2、DAP12、IκB、ERK1/2的mRNA及蛋白的表达情况,从炎症反应的角度观察和探讨补脾醒神益智方改善脾虚认知功能障碍大鼠学习记忆障碍的可能机制。结果:第一部分:理论研究1 通过对古籍中认知功能障碍相关内容的梳理,其相关病名的描述多以“忘”及“呆”为主,并呈现出一定病情严重程度上的递进关系。2 脾虚是老年人群也是认知功能障碍患者的常见证候,脾脏与脑经络相连,气血相通,脾虚则脑髓失养,脾失健运则痰浊内生,因虚致瘀,痰瘀阻窍,从而导致认知功能障碍的发生,故认知功能障碍的防治可从“脾脑相关”理论立论。3 补脾醒神益智法可通过补脾而益气生血,从根本上阻断痰瘀内生,达到益智醒神开窍的作用,是防治认知功能障碍的有效治法。第二部分:实验研究1 大鼠的一般状态结果:在治疗阶段结束后,与正常组相比,认知功能障碍组以及脾虚认知功能障碍组呈现不同程度精神萎靡,毛发粗糙,缺乏光泽,大便溏稀,并伴随出现眯眼及嗜睡等症状,与两模型组相比,各治疗组一般状态均有所好转,补脾醒神益智方组大鼠好转程度优于安理申组。2 行为学实验结果2.1 定位航行实验:与正常组相比,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组的逃避潜伏期明显增加（P<0.01）,与两模型组相比,各治疗组逃避潜伏期均明显改善（P<0.01）,两治疗组逃避潜伏期比较无明显差异（P>0.05）。2.2 空间探索实验:与正常组相比,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组首次穿越目标区域所需时间明显延长,穿越该区域的次数明显减少,目标象限停留时间缩短（P<0.01）,脾虚认知功能障碍组首次穿越目标区域所需时间较认知功能障碍组延长（P<0.05）。中药组及西药组均可以在一定程度上改善痴呆大鼠的记忆能力,与模型组相比,各治疗组首次穿越目标区域所需时间,穿越次数及目标象限的停留时间均优于模型组。在空间探索实验中,正常组行进轨迹较为简单,并存在多次反复折返探索的行为,痴呆组及脾虚痴呆组整体行进轨迹较杂乱无章,在各象限停留时间较为均衡。3形态学结果:与正常组比较,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组,海马区及海马区周围皮质神经元数目明显减少,排列稀疏,细胞体积增大,核仁固缩,细胞核染色加深,锥体细胞数目减少,排列紊乱,出现空泡样变性。安理申组及补脾醒神益智方组海马区及海马周围皮质神经元数目与模型组相比明显增多,但仍低于正常组,细胞形态较为规则,锥体细胞的树突数量与各模型组相比明显上升,空泡变性及细胞的固缩坏死数量减少。4 ELISA结果:与正常组比较,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组IL-1β、IL-6以及TNF-α表达含量明显上升（P<0.01）,且脾虚认知功能障碍组的增高幅度明显高于认知功能障碍组,具有统计学意义,与两模型组相比,安理申组及补脾醒神益智方组与模型组相比IL-1β、IL-6以及TNF-α表达明显下降（P<0-01）,且补脾醒神益智方组对其下调作用更显着。5 RT-PCR结果:与正常组比较,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组NF-κBmRNA的相对表达量明显上调（P<0.01）,IκBmRNA的相对表达量明显下调（P<0.01）,与认知功能障碍组比较,安理申组及补脾醒神益智方组NF-κBmRNA相对表达量明显下调,IκBmRNA的相对表达量上调,组间相对表达量无明显差异。与正常组比较,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组TREM2mRNA、DAP12mRNA的相对表达量明显下调（P<0.01）,与两模型组比较,安理申组及补脾醒神益智方组均可上调TREM2mRNA的相对表达量（P<0.01）,且补脾醒神益智方对二者的上调作用优于安理申组。与正常组比较,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组ERK1、ERK2mRNA的相对表达量明显上调（P<0.01）,与模型组比较,两治疗组ERK1、ERK2mRNA的相对表达量明显下调,但两治疗组组间比较无统计学意义。6 Western Blot结果:与正常组相比较,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组海马组织中Aβ、NF-κB、ERK1/2的蛋白表达量明显上升（P<0.01）,IκB、TREM2以及DAP12的蛋白表达含量明显下降（P<0.01）,两治疗组与脾虚认知功能障碍组相比,Aβ、NF-κB、ERK1/2的蛋白表达明显下降（P<0.01）,IκB、TREM2以及DAP12的mRNA表达含量明显上升（P<0.01）。且补脾醒神益智方组对TREM2的上调以及Aβ的下调幅度高于安理申组,两者具有统计学意义（P<0.05）。结论:1 脾虚是认知功能障碍发病的关键病机,且与认知功能障碍的主要病理产物痰浊、血瘀关系密切。补脾醒神益智法及其方药从“脾脑相关”理论出发,通过补脾益气,促进气血运行,进而充养脑髓,气血调和,醒神开窍,对于认知功能障碍的防治具有充分的理论依据及广泛应用前景。2 脾虚复合因素造模方法结合Aβ1-42海马注射可成功构建脾虚认知功能障碍模型,出现学习记忆能力减退以及炎症损伤,较为贴切复制了临床中认知功能障碍患者的症状特点。3 补脾醒神益智方可明显改善脾虚认知功能障碍大鼠的便溏、毛发粗糙、精神萎靡等脾虚证候表现,同时提高模型大鼠定位巡航以及空间探索能力,恢复其学习记忆能力。4 补脾醒神益智方可改善认知功能的作用机制与TREM2/NF-κB信号通路有关,通过上调TREM2及其配体DAP12的mRNA及蛋白的表达,同时抑制NF-κB炎性通路的激活,降低脑组织中Aβ及炎性因子的含量,从而发挥对认知功能障碍的防治作用。
孙成成[2]（2021）在《基于线粒体相关蛋白通路探讨参麻益智方对血管性认知障碍大鼠的作用机制》文中提出血管性认知障碍（Vascular cognitive impairment,VCI）是包括一系列因血管因素引起或导致的认知能力下降的综合征,涵盖了与血管疾病相关的所有类型的认知障碍,范围从轻度认知障碍到血管性痴呆（Vascular dementia,VaD）。目前,由于临床表现的异质性和当前诊断标准的局限性,VCI的流行病学较难开展,随着我国人口老龄化加剧及脑血管疾病的发病率上升,VCI的发病率和患病率也不断上升。VCI病因及病理机制复杂,与机体炎症反应、自由基损伤、胆碱能受损、细胞凋亡及遗传等因素密切相关,但VCI仍被认为是可以防治的。目前,VCI的主要治疗方法是通过治疗脑血管疾病和其他VCI危险因素（例如高血压和糖尿病）来预防,目前尚无可改善疾病的有效药物治疗方法。本课题组拟定了防治VCI的中药复方—参麻益智方,已批准为医疗机构应用传统工艺配制中药制剂备案（备案号:Z20200005000）。该方由人参、天麻、鬼箭羽、川芎组成,具有益气增智、活血化瘀的功效。前期动物实验和临床研究表明参麻益智方可以改善VCI大鼠及患者认知和神经功能。由此,本研究以参麻益智方作为干预药物,观察其对VCI模型大鼠的学习记忆和认知能力的影响及其对脑组织线粒体的超微结构和AMPK/PPARα/PGC-1α/UCP2信号通路的影响,探讨其对脑组织能量代谢的作用机制,为其防治VCI提供科学依据。目的确定参麻益智方的提取工艺及主要有效成分;观察参麻益智方对双侧颈总动脉结扎造成慢性脑缺血致血管性认知障碍模型大鼠的学习记忆能力和炎症因子及氧化应激相关指标的影响;探讨慢性脑低灌注大鼠脑能量代谢和线粒体障碍相关蛋白AMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2的病理机制及参麻益智方的干预效应机制及可能的作用靶点。方法采用液相色谱-质谱联用仪系统（liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS）分析参麻益智方的主要化学成分。SPF级SD大鼠70只,雌雄各半,采用双侧颈总动脉结扎法制备慢性脑缺血模型,手术成功后筛选认知障碍的大鼠按随机数字表分成4组:模型对照组（Model）、盐酸多奈哌齐组（Donepezil）（0.45 mg/kg体质量）、参麻益智方高剂量组（SMYZ-H）（11.88 g生药/kg体质量）和参麻益智方低剂量组（SMYZ-L）（2.97g生药/kg体质量）。另设假手术组（Sham）,每组各10只大鼠。灌胃给药,模型对照组和假手术组给予等体积纯净水灌胃,连续灌胃8周后进行相关指标检测。Morris水迷宫（Morris water maze,MWM）检测大鼠学习记忆能力;HE染色法观察大鼠海马CA1区病理形态学改变;比色法检测血清中乙酰胆碱（acetylcholine,Ach）、乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase,AchE）含量;酶联免疫法测定大鼠血清炎症因子白细胞介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-α,TNF-α）含量;比色法检测谷胱甘肽（glutathione,GSH）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）含量;非酶促免疫法检测谷胱甘肽过氧化物还原酶（glutathioneperoxidase,GSH-PX）含量。透射电子显微镜观察线粒体的超微结构和形态改变;脑组织中提取线粒体进行逆转录-聚合酶链反应（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR）检测AMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2、ATP5AmRNA表达的水平;蛋白质免疫印迹法（Western Blot,WB）检测 AMPK、pAMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2、ATP5A 蛋白的表达。结果1参麻益智方成分稳定明确课题组采用液相色谱-质谱联用仪系统分析了参麻益智方的主要化学成分,并结合文献报道,确定了参麻益智方中人参皂苷、天麻素、阿魏酸、原儿茶酸、β-谷甾醇等多种主要化学成分。2参麻益智方对VCI大鼠学习记忆能力的影响2.1参麻益智方对VCI大鼠空间学习记忆能力的影响定位航行实验:与第1天相比,所有大鼠在训练第2天的逃避潜伏期（escape latency,EL）均明显缩短（P<0.05,P<0.01）,提示所有大鼠均表现出一定的学习记忆能力。经重复测量方差分析,与对照组比较,模型组大鼠第三天开始EL明显延长,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）,提示模型组大鼠的空间学习能力明显下降;与模型组比较,参麻益智方高剂量组和盐酸多奈哌齐组EL均明显缩短,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）,提示参麻益智方和盐酸多奈哌齐均可提高VCI大鼠的空间学习能力。空间探索实验:与假手术组比较,模型组穿越原平台次数、目标象限停留时间、目标象限活动路程均显着减少,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和参麻益智方高剂量组穿越原平台次数均显着增加,参麻益智方高剂量组目标象限停留时间、目标象限活动路程均显着增加,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）。2.2参麻益智方对VCI大鼠海马CA1区病理形态的影响光学显微镜下海马组织显示,假手术组大鼠海马CA1区神经元排列整齐,连接紧密,胞内结构完整,胞膜清晰,胞质丰富,核膜、核仁较明显,未见神经元变性或坏死。模型组大鼠的海马CA1区神经元排列散乱、稀疏,细胞数量明显减少,层次减少,部分出现核固缩现象,可见细胞空泡变性,甚至坏死现象。盐酸多奈哌齐组、参麻益智方低、高剂量组海马CA1区神经元排列较模型组有一定的改善,细胞数量较模型组有明显增加,细胞结构较完整,细胞膜较为清晰,偶见细胞空泡变性,少有细胞坏死现象。2.3参麻益智方对VCI大鼠血清Ach、AchE含量的影响与假手术组比较,模型组Ach含量显着减少,AchE含量显着增多,统计学比较有显着差异（P<0.01）;与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和参麻益智方高剂量组Ach含量均显着增加,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）;盐酸多奈哌齐组和参麻益智方高剂量组AchE含量显着减少,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）。各给药组之间比较无显着差异（P>0.05）。2.4参麻益智方对VCI大鼠血清炎症因子IL-1β、TNF-α含量的影响与假手术组比较,模型组IL-1β、TNF-α含量均显着增加,统计学比较有显着差异（P<0.01）;与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和参麻益智方低、高剂量组IL-1β含量均显着减少,统计学比较有显着差异（P<0.01）;盐酸多奈哌齐组和参麻益智方低、高剂量组TNF-α含量均显着减少,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）。2.5参麻益智方对VCI大鼠血清GSH、MDA、SOD、GSH-PX含量的影响与假手术组比较,模型组GSH、GSH-PX含量均显着减少,MDA含量均显着增加,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和参麻益智方高剂量组GSH、GSH-PX含量均显着增加,MDA含量均显着减少,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）;参麻益智方高剂量组SOD含量均显着增加,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）。各给药组之间比较无显着差异（P>0.05）。3参麻益智方对VCI大鼠脑组织线粒体的影响3.1参麻益智方对VCI大鼠脑组织线粒体数量的影响参麻益智方干预后荧光显示线粒体数量有一定程度的增加,说明参麻益智方能增加双侧颈总动脉结扎所致的VCI大鼠的线粒体数量。3.2参麻益智方对VCI大鼠脑组织线粒体超微结构的影响假手术组大鼠脑组织线粒体结构基本正常,排列整齐,膜形态基本完整,线粒体嵴致密,无明显肿胀和空泡形成。模型组大鼠脑组织线粒体结构明显改变,线粒体膜模糊,部分膜出现破裂,线粒体嵴断裂,疏松溶解,并伴有基质颗粒减少或消失。盐酸多奈哌齐组和参麻益智方高剂量、低剂量组线粒体结构明显改善,线粒体膜总体清晰,线粒体嵴基本完整,说明参麻益智方可以改善VCI大鼠脑组织线粒体结构。3.3参麻益智方对VCI大鼠脑组织线粒体关键蛋白AMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2、ATP5A mRNA表达水平的影响与假手术组比较,模型组AMPK、PPARα、PGC-1α和ATP5A mRNA表达水平明显低于对照组（P<0.05,P<0.01）。参麻益智方干预后,AMPK、PPARα、PGC-1α和ATP5A mRNA的表达均较模型组显着升高（P<0.05,P<0.01）。模型组UCP2mRNA表达高于假手术组,差异有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较,盐酸多奈哌齐组、参麻益智方高剂量组（SMYZ-H）和参麻益智方低剂量组（SMYZ-L）UCP2mRNA表达均降低,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。3.4参麻益智方对VCI大鼠脑组织线粒体关键蛋白AMPK、pAMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2、ATP5A蛋白表达的影响与假手术比较,模型组pAMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2、ATP5A蛋白表达水平降低,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,参麻益智方高剂量组（SMYZ-H）pAMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2、ATP5A蛋白表达水平均显着升高,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。而AMPK蛋白表达水平无明显差异,提示AMPK可能通过磷酸化参与此途径。结论1确定了参麻益智方的最佳提取工艺及主要化学成分,为探讨其防治VCI的药理作用和机制研究提供了化学物质基础。2脑组织线粒体结构改变和能量代谢障碍可能是VCI的重要病理基础。3参麻益智方具有提高慢性脑低灌注致VCI大鼠学习记忆能力的作用,并改善海马组织的病理形态,保护神经元,增强胆碱能系统功能,抑制炎症反应,提高机体抗氧化能力。其作用机制和提高线粒体关键蛋白AMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2的表达,改善脑组织能量代谢相关。
杨超[3]（2020）在《基于炎症反应、氧化应激、miRNA-124/BACE1/Aβ通路探讨涤痰汤治疗血管性痴呆模型大鼠的作用机制》文中指出研究目的:血管性痴呆（vascular dementia,VD）是指由缺血性卒中、出血性卒中和造成记忆、认知和行为等脑区低灌注的脑血管疾病所致的严重认知功能障碍综合征。VD的发病机制与炎症反应、氧化应激、Aβ异常沉积等多个病理机制有关,涤痰汤是临床治疗痴呆的经典方剂,可有效改善VD患者的认知功能障碍。涤痰汤属于中药复方,治疗疾病具有多途径、多基因、多靶点的优势。本试验拟通过改良双侧颈总动脉永久阻断法（2-VO）制备VD大鼠模型,对VD大鼠行为及记忆能力、海马组织HE染色、氧化应激、炎症反应及mi RNA-124/BACE1/Aβ信号通路等多方面进行研究,多角度多层次探讨涤痰汤治疗VD的作用机制。研究方法:一理论探讨:从中医基础理论探讨VD的病因、病机、治则、治法和方药,提出痰浊阻窍是VD发生认知障碍的病机中心环节,从临床研究以及中药成分研究分析涤痰汤治疗VD的可行性。二动物实验:1.SPF级Wistar大鼠50只适应性饲养1周后开始实验,随机分为5组,即假手术组、模型组、涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组、盐酸多奈哌齐组,每组10只。通过改良双侧颈总动脉永久阻断法（2-VO）制备VD大鼠模型,每组大鼠给与相应干预措施,2.采用Morris水迷宫实验观察VD大鼠认知功能的改变,通过HE染色用光学显微镜观察大鼠海马组织形态学变化,探讨涤痰汤对VD大鼠认知功能障碍以及海马组织病理损伤的治疗作用。3.通过免疫组化法检测NOX2蛋白表达,Western blot法检测海马组织HO-1蛋白表达,生化方法检测海马组织ROS、GSH含量检测,来探讨涤痰汤对VD大鼠氧化应激损伤的影响。4.通过免疫组化法检测NF-кB的表达,Western blot法检测海马组织TNF-α蛋白表达,ELISA检测海马组织IL-1β、IL-10含量,探讨涤痰汤对VD大鼠炎症反应的影响。5.通过PCR检测海马组织中mi R-124的表达,western blot法检测海马组织中BACE1的表达,免疫组化法检测海马组织中Aβ的表达,探讨涤痰汤基于mi RNA-124/BACE1/Aβ通路对VD模型大鼠的治疗作用。研究结果:1.定位航行实验结果:与假手术组比较,VD模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长（P<0.01）。与模型组比较,涤痰汤高剂量组的逃避潜伏期明显缩短（P<0.01）,西药组及涤痰汤低剂量组的逃避潜伏期缩短（P<0.05）。与西药组比较,涤痰汤高剂量组的逃避潜伏期缩短（P<0.05）,涤痰汤低剂量组的逃避潜伏期无明显差异（P>0.05）。2.空间探索实验结果:与假手术组比较,模型组大鼠穿越原平台次数及停留时间明显缩短（P<0.01）。与模型组比较,涤痰汤高剂量组（P<0.01）和涤痰汤低剂量组（P<0.05）大鼠穿越原平台次数及停留时间明显增加,西药组穿越原平台次数及停留时间也明显增加（P<0.05）。与西药组比较,涤痰汤高剂量组穿越原平台次数及停留时间均明显增加（P<0.05）,而涤痰汤低剂量组的穿越原平台次数及停留时间无明显差异（P>0.05）。3.HE染色:光镜下各组大鼠海马形态学观察与比较结果如下:假手术组大鼠海马CA1区锥体细胞形态规则而饱满、细胞数量多、边界清晰、层次分明、排列整齐而紧密、染色均匀,细胞核较大,呈类圆形,着色均匀,核仁清楚,细胞质丰富。模型组大鼠海马CA1区锥体细胞形态不规则、细胞边界模糊、排列紊乱而疏松,正常细胞数量减少,可见坏死的神经元,细胞膜、核膜不清晰,细胞核形态不规则,着色变浅,核仁固缩、深染,胞浆浑浊。涤痰汤高剂量组,涤痰汤低剂量组以及西药组的大鼠海马CA1区锥体细胞,与模型组比较,细胞形态规则、边界清晰、层次分明、排列整齐,正常细胞数量明显增多,坏死的神经元少,细胞核形态规则,核膜及核仁清楚,细胞质丰富。其中涤痰汤高剂量组在海马病理学改变上优于涤痰汤低剂量组和西药组。4.海马组织中NOX2的表达情况:与假手术组比较,VD模型组NOX2蛋白相对表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组NOX2蛋白相对表达量降低（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组NOX2蛋白相对表达量明显降低（P<0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组NOX2蛋白相对表达量的差异不具有统计学意义（P>0.05）。5.海马组织中HO-1蛋白表达情况:与假手术组比较,VD模型组HO-1蛋白相对表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组HO-1蛋白相对表达量均有增高（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组HO-1蛋白相对表达量增高（P<0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组HO-1蛋白相对表达量的差异不具有统计学意义（P>0.05）。6.海马组织ROS含量:与假手术组比较,VD模型组ROS表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组ROS表达量降低（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组ROS表达量明显降低（P<0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组ROS表达量的差异不具有统计学意义（P>0.05）。7.海马组织GSH含量:与假手术组比较,VD模型组GSH表达量明显降低（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组GSH表达量升高（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组GSH表达量明显升高（P<0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组GSH表达量的差异不具有统计学意义（P>0.05）。8.海马组织中NF-кB的表达结果:与假手术组相比,VD模型组NF-кB表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组及西药组NF-кB表达量均下降（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组比较,涤痰汤高剂量组NF-кB表达量下降（P<0.05）。涤痰汤低剂量与西药组之间差异无统计学意义（P>0.05）9.海马组织TNF-α表达水平:与假手术组相比,VD模型组TNF-α表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组及西药组TNF-α表达量均下降（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组比较,涤痰汤高剂量组TNF-α表达量下降（P<0.05）。涤痰汤低剂量与西药组之间差异无统计学意义。（P>0.05）10.海马组织IL-1β含量检测结果比较:与假手术组相比,VD模型组IL-1β表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组及西药组IL-1β表达量均下降（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组比较,涤痰汤高剂量组IL-1β表达量下降（P<0.05）。涤痰汤低剂量与西药组之间差异无统计学意义。（P>0.05）11.海马组织IL-10含量检测结果比较:与假手术组相比,VD模型组IL-10表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组及西药组IL-10表达量均增高（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组比较,涤痰汤高剂量组IL-1β表达量增高（P<0.05）。涤痰汤低剂量与西药组之间差异无统计学意义（P>0.05）12.海马组织中mi R-124的表达情况:与假手术组比较,VD模型组mi R-124表达量明显降低（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组mi R-124表达量升高（P<0.01）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组mi R-124表达量的差异不具有统计学意义（P>0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组mi R-124表达量的差异具有统计学意义（P<0.05）。13.海马组织中BACE1的表达情况:与假手术组比较,VD模型组BACE1表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组BACE1表达量降低（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组BACE1表达量明显降低（P<0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组BACE1表达量的差异不具有统计学意义。（P>0.05）14.海马组织中Aβ的表达情况:与假手术组比较,VD模型组Aβ表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组Aβ表达量降低（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组Aβ表达量明显降低（P<0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组Aβ表达量的差异不具有统计学意义（P>0.05）。研究结论:1.涤痰汤能显着改善VD模型大鼠的学习记忆能力和空间探索能力以及海马组织的病理损伤,以涤痰汤高剂量组治疗效果最为显着。2.涤痰汤可以通过抑制NOX2蛋白表达,促进海马组织HO-1蛋白表达,减少海马组织ROS的含量,增加GSH含量来缓解VD大鼠氧化应激损伤。其中以涤痰汤高剂量组治疗效果最为显着。3.涤痰汤可以抑制NF-кB,TNF-α,IL-1β的表达,促进IL-10的表达缓解VD大鼠的炎症反应。其中以涤痰汤高剂量组治疗效果最为显着。4.涤痰汤可以通过促进mi RNA-124的产生,从而抑制BACE1/Aβ发挥对VD大鼠的治疗作用。其中以涤痰汤高剂量组治疗效果最为显着。
陈业文[4]（2020）在《益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠PI3K/Akt信号通路的影响》文中进行了进一步梳理目的:研究益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠行为学改变,海马神经元凋亡及PI3K/AKT信号通路关键蛋白表达的影响,探讨益肺宣肺降浊方防治VD的分子作用机制。方法:将66只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组及益肺宣肺降浊方高、中、低剂量组,每组11只,采用永久性双侧颈总动脉结扎（2-VO）大鼠作为VD大鼠模型。假手术组和模型组给同等体积的生理盐水灌胃,益肺宣肺降浊方高、中、低剂量组给药剂量分别为5g、2.5g、1.5g·kg-1,尼莫地平组给药剂量8mg·kg-1,各组大鼠每日灌胃一次,持续给药4w后进行指标检测。给药结束后第天进行Morris水迷宫空间航行定位测试大鼠的逃避潜伏期,第6天撤掉逃生平台测试空间探索实验。Morris水迷宫结束后,断头取各组大鼠海马组织,进行HE染色观察大鼠海马CA1区神经元形态改变,TUNEL检测观察大鼠海马CA1区神经元凋亡情况,Western Blot检测p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达水平。结果:（1）Morris水迷宫空间航行定位及空间探索实验结果,与假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期明显增加（P<0.01）,跨越逃生平台的次数减少（P<0.01）。与模型组相比,尼莫地平组、益肺宣肺降浊方高剂量组和中剂量组逃避潜伏期明显降低（P<0.05）,跨越逃生平台的次数增加（P<0.05）,益肺宣肺降浊方高剂量组与尼莫地平组差异无统计学意义（P>0.05）。（2）TUNEL检测结果,与假手术组大鼠相比,模型组大鼠海马神经元凋亡率明显增加（P<0.01）。HE染色结果显示,模型组大鼠海马CA1区细胞排列极其紊乱,正常神经元减少,细胞形态不规则,胞质稀少,胞核深染、固缩,核浆界限模糊;凋亡神经元数量明显增多,呈三角形或不规则形,核仁不明显。与模型组相比,尼莫地平组、益肺宣肺降浊方高剂量组和中剂量组海马神经元凋亡率降低（P<0.05）,并且海马神经元病理改变减轻,尼莫地平组和益肺宣肺降浊方高剂量组差异无统计学意义（P>0.05）。（3）Western Blot检测结果显示,与假手术组相比,模型组大鼠p-PI3K和p-Akt蛋白表达水平显着降低（P<0.01）;与模型组相比,尼莫地平组、益肺宣肺降浊方高剂量组和中剂量组p-PI3K和p-Akt表达升高（P<0.05）,尼莫地平组和益肺宣肺降浊方高剂量组p-PI3K和p-Akt表达差异无统计学意义（P>0.05）。各组大鼠Akt表达水平无统计学差异（P>0.05）。结论:实验通过2-VO方法成功地建立了慢性脑供血不足致VD大鼠模型,经益肺宣肺降浊方干预后VD大鼠学习及记忆能力得到改善能力,其作用机制可能是益肺宣肺降浊方激活PI3K/Akt信号通路抑制了海马神经元的凋亡,从而提高了VD大鼠的学习及记忆能力。
张宇豪[5]（2020）在《基于海马突触传递效能和可塑性探讨电针改善血管性痴呆学习记忆功能的作用机制》文中指出目的:探讨“通督调神”电针“百会”、“神庭”是否通过调节血管性痴呆（Vascular dementia,VD）模型大鼠海马突触传递效能和可塑性以及相关蛋白的表达及其磷酸化水平,从而改善VD模型大鼠学习记忆功能。方法:取2月龄雄性SD大鼠（280-300g）60只,随机选取12只作为假手术组,仅暴露双侧颈总动脉,另外48只SD大鼠采用双侧颈总动脉闭塞（2-Vessels Occlusion,2-VO）手术制备VD模型,通过小动物核磁共振的3D-TOF血管成像和新物体识别行为学检测进行模型检验;将造模成功的36只VD模型大鼠,采用随机数字表法随机分为3组,模型组、电针组和非穴组,每组12只,通过新物体识别指数比较其行为学基线是否一致;电针组采取电针“百会”、“神庭”穴进行干预,疏密波2/20Hz,30min/次,1次/天,5天/周,共4周;非穴组采用电针双侧胁下非经非穴,参数和时间与电针组一致,模型组和假手术组进行同等条件下抓取固定,不予电针干预;采用Morris水迷宫检测各组大鼠以空间为参考的学习记忆功能;分离和制备海马活体脑片,采用膜片钳电生理记录技术检测各组大鼠海马CA3-CA1区场电位特征,包括Input-output（I/O曲线）、配对脉冲异化比率（Paired-pulse facilitation ratios,PPR）以及100Hz高频刺激（High frequency stimulation,HFS）诱发的场电位兴奋性突触后电位（field excitatory postsynaptic potential,fEPSP）;免疫蛋白印记（Westen blotting,WB）检测各组大鼠海马突触可塑性相关蛋白N-甲基-D-天门冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR）的亚基Nr2B、α-氨基-3羟基-5甲基-4受体（α-amino-3hydroxy-5methyl-4isoxazole receptor）的亚基GluR1以及钙-钙调蛋白依赖性激酶II(Ca2+-calmodulin-dependent protein kinase II,CaMKⅡ)蛋白表达及其磷酸化水平。结果:（1）VD大鼠模型检验:大鼠造模后进行小动物磁共振3D-TOF血管成像检测,结果显示双侧颈总动脉消失,周围新生代偿细小毛细血管,表明2-VO手术成功;新物体识别行为学实验,结果显示,与假手术组相比,造模组大鼠1h物体偏爱系数明显降低（P<0.01）,24h检测的物体偏爱系数亦降低（P<0.01）;（2）电针“百会”、“神庭”对VD模型大鼠学习记忆功能的影响:电针干预后,Morris水迷宫实验结果显示,在大鼠为期4天的定位航行实验中,与假手术组相比,模型组、电针组和非穴组三组大鼠在第2、3、4天的逃避潜伏期时间均增加（P<0.05）;而电针组相比模型组和非穴组,在第3、4天的逃避潜伏期相对缩短（P<0.05）。在记忆测试空间探索实验中,与假手术组相比,模型组、电针组和非穴组三组大鼠穿越平台次数明显减少（P<0.01）;而与模型组相比,电针组大鼠的穿越平台次数显着增加（P<0.05）;提示电针“百会”、“神庭”可以改善VD模型大鼠学习和记忆提取能力。（3）电针“百会”、“神庭”对VD模型大鼠海马CA3-CA1区I/O曲线和PPR的影响:与假手术组相比,模型组大鼠I/O曲线在10μA、20μA、30μA、40μA、50μA、60μA、70μA、80μA、90μA刺激时电压均值显着降低（P<0.01）;而电针组与模型组相比,I/O曲线从20μA刺激电流开始电压均值便显着增高（P<0.01）;假手术组、模型组、电针组和非穴组四组大鼠海马CA3-CA1区基础场电位刺激6个时间间隔（10ms、20ms、50ms、100ms、200ms和500ms）的PPR组间比较均无统计学差异（P>0.05）;提示电针“百会”、“神庭”可以提高VD模型大鼠海马CA3-CA1区的基础传递效能,但对突触前神经递质的释放无影响。（4）电针“百会”、“神庭”对VD模型大鼠海马CA3-CA1区LTP的影响:通过100Hz的HFS诱发,假手术组大鼠海马CA3-CA1区fEPSP振幅相比基线增幅达70%以上,说明海马CA3-CA1区长时程增强（Long-tern potentiation,LTP）诱导成功;与假手术组相比,模型组海马CA3-CA1区fEPSP显着降低（P<0.01）,差异具有显着统计学意义;而电针组较模型组海马CA3-CA1区fEPSP升高（P<0.05）;电针组与非穴组相比,差异不明显（P>0.05）,无统计学意义;提示电针“百会”、“神庭”可以增强VD模型大鼠海马CA3-CA1区LTP进而促进其突触可塑性。（5）电针“百会”、“神庭”对VD模型大鼠海马Nr2B、GluR1以及CaMKⅡ蛋白表达及其磷酸化水平的影响,结果显示:与假手术组相比,模型组海马Nr2B、AMPAR和CaMKⅡ蛋白及其磷酸化表达均显着降低（P<0.05）,总蛋白磷酸化水平亦降低（P<0.05）差异具有统计学意义;而电针组较模型组各蛋白磷酸化水平显着升高（P<0.05）,总蛋白浓度亦有不同程度增加;非穴组与模型组相比,差异无统计学意义（P>0.05）;提示电针“百会”、“神庭”可以通过调节Nr2B、GluR1以及CaMKⅡ蛋白表达及其磷酸化水平从而改善VD大鼠海马突触可塑性。结论:电针“百会”、“神庭”可以提高VD模型大鼠海马CA3-CA1区基础突触传递效能和突触可塑性进而改善其学习记忆能力,其分子机制可能与上调突触后受体及其钙信号传导相关蛋白的表达及其磷酸化水平有关。
曾贵荣[6]（2020）在《生脉散改善高糖高脂复合模型致学习记忆减退作用及机制研究》文中研究指明糖尿病脑病（DE）又称糖尿病认知障碍,是糖尿病严重的并发症之一,发病率高达40%,是由糖尿病引起的认知障碍或大脑神经生理及结构的改变,主要表现为记忆力减退、反应迟钝、注意力下降。长期持续的高血脂、高血糖状态可导致学习记忆减退的发生,严重影响糖尿患者生活质量和经济负担,并进一步加剧后期神经退行性疾病发生风险。研究糖尿病认知功能减退的发生发展过程和机制,寻找有效的防治糖尿病脑病致学习记忆减退药物,对于减轻糖尿病患者痛苦,提高糖尿病患者的生活质量具有重要的意义。因此本论文在建立高糖高脂复合大鼠模型致学习记忆功能减退的基础上,研究传统中药生脉散改善高糖高脂复合大鼠模型致学习记忆减退的作用及相关作用机制,为研发治疗糖尿病脑病致学习记忆功能减退提供有效的候选药物。同时对单因素高血糖、高血脂引起的学习记忆减退作用及机制进行系统研究,为研究糖尿病脑病致学习记忆减退作用机制提供理论依据和研究基础,主要研究内容结果如下:1.生脉散改善高糖高脂致学习记忆功能减退的作用及机制研究1.1高糖高脂诱导学习记忆减退动物模型的建立采用高脂饲料结合腹腔注射STZ（45mg/kg）,动物造模成功率高,死亡率低,造模后3周大鼠血糖值（13.2±0.63moL/L）、胰岛素分泌减少（7.28±2.25moL/L）和血脂水平（TG:3.11±0.32 mmol/L;CHO:2.32±1.2 mmol/L）均出现异常,同时动物摄食、摄水量均明显升高,表现出典型的“三多一少的现象”。模型建立6周后,大鼠血糖（14.4±0.97moL/L）、血脂（LDL:13.04± 0.34 mmol/L;HDL:1.18±0.47 mmol/L;TG:1.08±0.7 mmol/L;CHO:32.36±6.8 mmol/L）随着时间依赖性升高、胰岛素水平随时间依赖性减少（4.98±0.49moL/L）,研究结果表明高脂饲料结合腹腔注射STZ（45mg/kg）可建立与临床相近的、稳定的高糖高脂复合动物模型。1.2生脉散对高糖高脂复合模型大鼠Morris水迷宫学习记忆改善作用采用前期建立的大鼠腹腔注射STZ结合高脂饲料喂养建立高糖高脂复合模型,模型大鼠在6周时学习记忆损伤主要表现在空间参考记忆、工作记忆损伤。造模后3周,根据各组动物血糖、体重指标随机分组,分别灌胃给予生脉散低、中、高剂量（0.5、1.5、4.5g/kg）,连续给药3周后,生脉散对高糖高脂复合引起的空间参考记忆和工作记忆损伤均有改善作用,对空间参考记忆损伤改善主要表现在:生脉散低剂量能明显减少定位航行D1-4天寻台潜伏期,中、高剂量组大鼠能明显减少定位航行D1-3天台潜伏期明显减少;生脉散低、中、高剂量能明显增加空间探索大鼠穿越平台次数,增加目标象限停留时间,对工作记忆的影响主要表现在:能够明显减少工作记忆阶段模型大鼠的寻台潜伏期。同时生脉散低剂量能明显增加大鼠在空场的活动时间和平均速度,生脉散低、中剂量（0.5g、1.5g/kg）能明显增加大鼠在空场的活动时间和平均速度。1.3 生脉散对高糖高脂复合模型大鼠物体认知改善作用高糖高脂复合大鼠模型在6周出现物体识别非空间记忆损伤,新物体位置识别实验发现生脉散低、中、高剂量能显着升高模型大鼠的相对辨别指数。提示对物体识别非空间记忆损伤有显着的改善作用。1.4 生脉散改善高糖高脂复合模型致学习记忆减退作用机制生脉散改善高糖高脂复合模型致学习记忆减退作用机制与脑内炎症、调控神经可塑性PI3K-pAKT/AKT-pCREB/CREB-BDNF通路蛋白有关。高糖高脂模型大鼠海马组织病理表现为神经炎症浸润、间质水肿,海马组织锥体细胞坏死和排列松散,生脉散能明显改善海马组织组织锥体细胞坏死和排列紊乱等病理改变。高糖高脂模型大鼠海马TNF-α和IL-1β含量明显升高,而生脉散能够明显降低海马组织TNF-α和IL-1β含量。提示生脉散具有改善脑内炎症作用。Western blot结果表明:高糖高脂模型大鼠海马组织SYN、BDNF、PI3K、pAKT/AKT、pCREB/CREB蛋白表达明显降低,生脉散能明显升高海马组织SYN、BDNF、PI3K、pAKT/AKT、pCREB/CREB蛋白表达。此外,本研究发现生脉散不同剂量对高糖高脂模型大鼠血糖和胰岛素未见明显作用,然而能够明显降低血脂TG和LDL水平,提示生脉散改善高糖高脂模型大鼠学习记忆损伤可能与调节机体脂代谢有关。2.高血糖、高血脂对学习记忆功能减退和机制研究2.1 高血糖对学习记忆功能减退的影响采用腹腔注射STZ（45mg/kg）建立高血糖模型,单因素高血糖模型大鼠3周、6 周、9 周血糖值分别为 7.99±0.62、11.51±0.69、13.69±1.43mmol/L,胰岛素水平分别为 8.04±0.31 mmol/L、Insulin:7.43±0.3 mmol/L、Insulin:5.21±0.67 mmol/L。高血糖模型大鼠在3周时首先出现工作记忆损伤,在6-9周出现工作记忆损伤、参考记忆和非空间记忆损伤。主要表现在随着时间延长,记忆损伤加重。高糖高脂模型大鼠6周出现工作记忆损伤、参考记忆和非空间记忆损伤。其中血糖值为（14.4±0.97moL/L,Insulin:4.98±0.49 moL/L）,高糖高脂 6 周大鼠血糖和胰岛素水平降低率（58.41%）明显高于单因素高血糖大鼠6周（24.7%）,提示血糖水平和胰岛素水平加重了胰岛素抵抗。高糖高脂复合可能加重了单因素高血糖大鼠的工作记忆损伤的强度和出现的时间,主要表现在:与单因素高血糖比较,高糖高脂大鼠6周工作记忆寻找平台潜伏期为（39.4±3.4 s）,明显高于单因素高血糖大鼠6周工作记忆寻找平台潜伏期（19.2±2.3 s）,但与高血糖大9周大鼠工作记忆寻找平台潜伏期无显着性差异。高糖高脂6周并无加重水迷宫参考记忆和新物体识别的非空间记忆损伤程度和出现时间,主要表现在高糖高脂模型大鼠6周与高血糖大鼠6周和9周参考记忆和物体识别非空间记忆损伤程度辨别指数比较无明显差异。与高血糖6周大鼠水迷宫参考记忆比较,高糖高脂复合模型对6周、9周高血糖大鼠参考记忆穿越平台次数和目标象限时间无明显的差异。2.2高血脂对学习记忆功能减退的影响采用长期饲喂高脂饲料建立大鼠高血脂模型,模型大鼠2周、4周、8周、12周血清 TG 值分别为 1.92±0.34、3.35±0.91、3.00±0.24、3.87±0.33mmol/L;LDL值分别为 0.58±0.13、0.70±0.13、1.46±0.51、1.73±0.31mmol/L。高糖高脂模型3 周大鼠表现血脂（TG:3.11±0.32 mmol/L;CHO:2.32±1.2 mmol/L）。模型建立 6周后,高糖高脂大鼠血脂（LDL:13.04±0.34 mmol/L;HDL:1.18±0.47 mmol/L;TG:1.08±0.7 mmol/L;CHO:32.36±6.8 mmol/L）,与高血脂模型比较,高糖高脂模型3周大鼠血脂TG水平与4周大鼠无明显差异。高血脂模型大鼠在4周时首先出现参考记忆损伤,在8-12周出现工作记忆损伤、12周出现非空间记忆损伤。主要表现在高血脂大鼠在4周定位航行潜伏期明显延长,空间探索穿越平台次数明显减少,持续到12周,表明持续高血脂对学习记忆有损伤,尤其是参考记忆容易受到损伤。工作记忆结果表明:高血脂大鼠在8周潜伏期明显延长出现记忆损伤,持续到12周;在新物体识别检测中高血脂大鼠在12周后新物体识别能力明显降低。高脂高糖复合模型6周参考记忆损伤可能与高脂持续状态相关,主要表现在高脂大鼠4周出现参考记忆损伤,高血糖大鼠6周出现参考记忆损伤,且高脂大鼠出现参考记忆损伤时间较早于高血糖大鼠出现损伤时间。与高脂12周大鼠新物体识别记忆出现损伤,高糖高脂大鼠模型6周出现损伤,提示高糖高脂复合加重了高脂大鼠非空记忆损伤的程度和出现时间。2.3高血糖、高血脂对学习记忆功能减退机制高血糖大鼠模型3周出现工作记忆损伤与炎性因子高度相关,主要表现在海马组织炎性因子水平TNF-α、IL-1β明显升高,且随着持续时间海马组织炎性因子水平明显增加,但记忆相关蛋白AKT、CREB及其磷酸化水平无明显变化。参考记忆和新物非空间记忆损伤可能与炎性因子、脑组织神经递质以及AKT、CREB及其磷酸化水平有关,主要表现在:高血糖大鼠6-9周,海马炎性水平TNF-α、IL-1β明显升高,脑脊液DA含量明显降低、AKT、CREB及其磷酸化水平蛋白表达明显降低,提示。而高糖高脂大鼠6周出现记忆损伤与可能与脑内炎性因子、PI3K-AKT-CREB及其磷酸化有关,从记忆损伤机制无明显差异。高血脂致大鼠的学习记忆功能减退亦与海马组织炎症、BDNF-AKT-CREB通路有关。主要表现在高血脂大鼠在4-12周海马组织炎性因子IL-1β含量明显升高,BDNF含量明显下降,在8-12周海马组织TNF-α明显升高,海马组织CREB表达降低。提示高血糖、高血脂致学习记忆减退作用机制与海马组织炎症有关,CREB-BDNF通路有关。综上所述,生脉散能明显改善高糖高脂复合模型致学习记忆减退作用,能明显改善高糖高脂复合引起的空间参考记忆和非空间记忆损伤及空间工作记忆损伤,同时生脉散具有降脂作用,对血糖和胰岛素水平无明显作用,其作用机制与调节脑内炎症、调控神经可塑性PI3K-pAKT/AKT-pCREB/CREB-BDNF通路蛋白有关。血糖水平、胰岛素水平和持续时间与学习记忆损伤类型和强度具有高度相关性,高血糖水平持续时间和程度加重了高血糖大鼠参考记忆、工作记忆以新物体识别非空间记忆的损伤,且首先出现工作记忆损伤,高血脂水平持续时间和程度加重了高血脂大鼠参考记忆、工作记忆以新物体识别非空间记忆的损伤,且首先出现参考记忆损伤。高糖高脂复合加重了单因素高血糖大鼠的工作记忆损伤以及单因素高脂大鼠非空记忆损伤的程度和出现时间。高血糖模型出现工作记忆损伤与炎性因子高度相关,高血脂致大鼠的学习记忆功能减退亦与海马组织炎症、BDNF-AKT-CREB通路有关。本研究为防治糖尿病脑病伴发学习记忆功能减退中药新药研发提供有效的候选药物,为研究糖尿病脑病致学习记忆减退作用机制提供科学依据。
王璐[7]（2019）在《基于Fkbps对老年大鼠GR核转位的影响探析学习记忆关键基因表达变化机制及补肾益气方药的作用》文中认为目的:以自然衰老大鼠为研究对象,观察补肾方药（左归丸）、益气方药（益气聪明汤药）及两方合用（合剂）对老年大鼠空间学习能力,血清皮质酮含量,mi RNAFkbps-GR调控回路相关蛋白、表观遗传修饰酶与乙酰化修饰组蛋白的表达及学习记忆相关基因表达的影响,初步探索mi RNA-Fkbps-GR在自然衰老大鼠大脑海马分区的表达情况,为探索增龄性糖皮质激素的变化与学习记忆衰退的关系及中医补肾益气健脑、延缓学习记忆退化提供实验依据。方法:以自然衰老（23月龄）SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年左归组、老年益气组、老年合剂组和老年皮质酮（GC）拮抗组,另设青年对照组（同品系5月龄）。采用Morris水迷宫法观察各组大鼠记忆能力,ELISA法检测大鼠血清GC含量。免疫荧光双标结合激光共聚焦显微镜法观察各组大鼠大脑海马区表观遗传修饰相关酶蛋白Hdac2与Me CP2的共定位情况,免疫荧光法检测大鼠海马区与皮层区Fkbp5蛋白表达,免疫组化法检测Fkbp4蛋白表达,荧光定量PCR法及Western blotting检测大鼠糖皮质激素受体调控回路蛋白（GR,Fkbp5,Fkbp4,Dynein IC2）、表观遗传修饰酶（Dnmt1,Dnmt3a,Hdac2,Hat1）和学习记忆相关信号转导分子（Nptx2,Synapsin-1、Homer1）表达,Western blotting法检测乙酰化修饰组蛋白H4K5Ac,H4K12Ac表达情况,荧光定量PCR法检测mi R-124a与mi R-511的表达变化及各药物对老年大鼠上述各项指标异常变化的改善作用。结果:1.与青年对照组相比,老年大鼠学习记忆能力显着减退（P<0.05）,血清GC含量明显升高（P<0.05）,GR蛋白在大脑皮层与海马组织切片中荧光强度显着增强,表观遗传修饰酶Hdac2与Me CP2在海马神经元细胞核内共定位表达增多。海马总GR蛋白表达量与细胞核GR蛋白含量显着降低（P<0.01）,而细胞浆GR蛋白表达显着升高（P<0.01）,GR m RNA表达显着降低（P<0.001）,mi R-Fkbp5-GR调控回路中:动力蛋白Dynein IC2表达显着降低（P<0.001）、分子伴侣蛋白Fkbp5与Fkbp4蛋白表达显着升高（P<0.05）、Fkbp5基因m RNA表达显着升高（P<0.001）、mi R-511表达显着降低（P<0.001）、mi R-124a表达显着升高（P<0.001）,表观遗传修饰酶Hat1的基因表达（蛋白及m RNA）显着降低（P<0.05）、乙酰化修饰组蛋白H4K12Ac表达显着降低（P<0.05）、H4K5Ac无显着性变化、Dnmt1、Dnmt3a、Hdac2基因表达显着增高（P<0.05）,学习记忆相关基因Nptx2、Synapsin-1基因表达显着降低（P<0.001）,Homer1基因表达无显着性变化。2.与老年对照组相比,补肾益气方药左归丸、益气聪明汤及拮抗剂RU38486均能不同程度的改善老年大鼠衰退的空间学习记忆能力、降低老年大鼠血清GC含量,减弱GR蛋白在大脑海马区与皮层组织切片中荧光强度,减少Hdac2与Me CP2在细胞核内的共定位表达。3.RU38486能够显着上调老年大鼠海马总GR蛋白、细胞核GR蛋白、细胞浆GR蛋白（P<0.05）、GR m RNA（P<0.001）的表达,Hat1基因（P<0.01）、H4K12Ac蛋白的表达（P<0.001）,Nptx2蛋白（P<0.05）、Synapsin-1基因的表达（P<0.01）。同时RU38486可以显着下调Fkbp5、Dnmt1、Hdac2基因表达（P<0.05）,Dnmt3a m RNA（P<0.01）,mi R-124a表达（P<0.001）。而对Nptx2基因表达仅有上升趋势。对于Fkbp4蛋白、Dynein IC2蛋白等则无明显调整作用。4.左归丸还能显着上调老年大鼠海马总GR蛋白、细胞核GR蛋白（P<0.001）、GR m RNA（P<0.001）、mi R-511表达（P<0.001）,Hat1基因表达（P<0.01）,Nptx2、Synapsin-1基因表达（P<0.001）。同时左归丸可以显着下调Fkbp4蛋白与mi R-124a表达（P<0.001）,Dnmt1、Dnmt3a、Hdac2基因表达（P<0.01）。而对于细胞浆GR蛋白、Fkbp5蛋白等均无明显调整作用。5.益气聪明汤还能够显着上调老年大鼠海马细胞核GR蛋白（P<0.001）、mi R-511的表达（P<0.001）,Hat1 m RNA的表达（P<0.01）,H4K12Ac蛋白表达（P<0.001）,Nptx2、Synapsin-1基因表达（P<0.001）。同时益气聪明汤可以显着下调Fkbp5 m RNA（P<0.001）的表达,Dnmt1、Hdac2基因表达（P<0.01）。而对于Hat1蛋白的表达则有上调趋势,对于细胞浆GR蛋白、Dynein IC2等蛋白表达,均无调整作用。6.两方合剂（左归丸与益气聪明汤合剂）能够显着上调老年大鼠海马总GR蛋白、细胞核GR蛋白及细胞浆GR蛋白（P<0.05）、GR m RNA的表达（P<0.001）;Hat1基因表达（P<0.01）、H4K12Ac蛋白表达（P<0.001）,Nptx2、Synapsin-1基因表达（P<0.001）。同时两方合剂还可以显着下调Fkbp5基因表达（P<0.05）,Fkbp4蛋白表达（P<0.05）、mi R-124a表达（P<0.001）,Dnmt1、Dnmt3a、Hdac2基因表达（P<0.001）。而对于mi R-511表达、Dynein IC2蛋白的表达,两方合剂均无明显调整作用。结论:补肾益气方药左归丸、益气聪明汤主要是通过不同程度降低老年大鼠血清GC含量,调整mi R-Fkbps-GR回路相关基因m RNA表达,增高GR的核转位,降低海马组织表观遗传修饰酶（Dnmt1,Dnmt3a,Hdac2）的表达,增高组蛋白乙酰转移酶（Hat1）与乙酰化组蛋白H4K12Ac的表达,上调学习记忆相关基因（Nptx2、Snapsin-1）的表达,以抵抗高皮质酮对海马区域的毒性影响,进而发挥延缓学习记忆退化的作用。
高玲[8]（2019）在《基于PI3K/Akt信号通路探讨益髓解毒法对血管性痴呆大鼠作用机制的研究》文中研究说明目的:本研究基于“脑髓”理论,从中风病“髓虚毒损”的病机关键入手,通过行为学、病理学、分子生物学等研究手段,对VD大鼠的认知功能、海马病理及超微结构变化、海马组织PI3K/Akt细胞信号转导通路相关蛋白、基因表达等方面进行检测和分析,探讨益髓解毒法对VD大鼠认知功能及海马神经元损伤和凋亡的作用及机制,为VD的中医病机认识和治疗提供新的作用靶点和实验证据。方法:1.将健康SPF级雄性SD大鼠,行双侧颈总动脉永久性结扎法（2-VO）,复制VD动物模型,将造模成功的大鼠随机分为5组,分别是血管性痴呆模型组（模型组）、盐酸多奈哌齐对照组（阳性对照组）、益髓解毒高、中、低剂量组（中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组）,每组各15只,另选取15只只分离未结扎颈总动脉的大鼠作为假手术组。造模后第2d开始灌胃治疗,各组每日灌胃药物及剂量分别是,假手术组和模型组:0.9%生理盐水;阳性对照组:盐酸多奈哌齐溶液,0.052mg/kg;中药高、中、低剂量组:益髓解毒中药复方农本方颗粒溶液,22.22g/kg、11.11g/kg、5.56g/kg,等体积（1mL/100g）灌胃,持续30d治疗结束。2.Morris水迷宫对大鼠进行行为学功能监测,灌胃治疗结束后第1天开始水迷宫测试,通过定位航行实验和空间探索实验,分析益髓解毒法对VD大鼠学习和记忆功能的影响。3.通过对大鼠海马组织HE染色和海马组织透射电镜超微结构观察,分析益髓解毒法对VD大鼠海马病理组织及海马神经元超微结构的干预效果。4.应用Nissl染色和TUNEL（绿色荧光）细胞凋亡检测法,分析益髓解毒法对VD大鼠海马组织内尼氏体及神经元阳性细胞数量和海马组织细胞凋亡的干预作用。5.应用IHC法、Western-blot法、Rt-PCR法检测PI3K/Akt信号通路相关因子PI3K、Akt、p-Akt、Caspase-9、Caspase-3、NF-κB、Bad的蛋白及mRNA表达的变化,分析益髓解毒法对VD大鼠海马组织PI3K/Akt信号通路的调控作用。结果:1.行为学监测结果:在定位航行实验结果中,与假手术组比较,VD模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,中药中剂量组和阳性对照大鼠的逃避潜伏期明显缩短（P<0.05,P<0.01）,差异具有统计学意义。在空间探索实验中,与假手术比较,VD模型组大鼠首次到达平台的时间明显延长,平台象限停留时间及穿越平台次数明显减少;中药中剂量组大鼠首次到达平台的时间明显缩短,平台象限停留时间及穿越平台次数明显增加,与模型组比较,差异显着（P<0.05,P<0.01）。2.海马病理组织检测结果:HE染色结果:VD大鼠模型组海马组织CA1区的神经元结构欠完整,形态不规则,排列疏松而紊乱,细胞间质水肿明显,细胞核固缩深染,神经元与周围组织间隙增宽,神经元丢失明显。与模型组比较,中药中剂量组大鼠海马CA1区的神经元结构相对完整,形态较规则,层次较清晰,细胞间质水肿不及模型组明显,细胞核固缩减少,神经元与周围组织间隙缩小,神经元可见少量丢失。TEM结果:模型组海马CA1区神经元细胞核形态异常,异染色质增多,细胞器排列紊乱,线粒体结构不完整,有嵴和膜融合现象,空化严重,嵴出现断裂和缺失。与模型组比较,中药中剂量组:神经元结构较完整,胞膜溶解程度较轻,线粒体空化和扩张明显减轻。3.干预海马细胞损伤及凋亡结果:Nissl染色结果:与假手术组比较,VD模型组大鼠海马神经元尼氏小体丢失明显,染色变浅,神经元阳性细胞数目明显减少（P<0.01）;与模型组比较,阳性对照组与中药中剂量组神经元胞体内尼氏小体染色明显,神经元阳性细胞数增多（P<0.05,P<0.01）,差异具有统计学意义。VD模型组大鼠海马TUNEL法检测凋亡细胞数明显多于假手术组,表明VD过程存在细胞凋亡;中药中剂量组可明显减少凋亡细胞数,与模型组比较,差异显着（P<0.01）。4.调控PI3K/Akt信号通路的相关因子结果:IHC检测结果:与假手术组比较,VD模型组大鼠海马Akt、p-Akt蛋白表达明显减少,Caspase-9、Caspase-3蛋白表达明显增加（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,阳性对照组与中药中剂量组Akt、p-Akt蛋白表达明显增加,Caspase-9、Caspase-3蛋白表达明显减少,差异显着（P<0.05,P<0.01）。WB检测结果显示:与假手术组比较,VD模型组大鼠海马PI3K、Akt、p-Akt、NF-κB蛋白表达明显减少,Caspase-9、Caspase-3、Bad蛋白表达明显增加（P<0.05,P<0.01）,两组比较差异显着,具有统计学意义。而中药中剂量组可明显上调PI3K、Akt、p-Akt、NF-κB蛋白表达,下调Caspase-9、Caspase-3、Bad蛋白表达。Rt-PCR结果显示:模型组与假手术组相比,PI3KmRNA、AktmRNA、NF-κBmRNA水平明显降低,Caspase-9mRNA、Caspase-3mRNA、BadmRNA水平明显升高（P<0.05,P<0.01）。中药中剂量组可明显上调PI3KmRNA、AktmRNA、NF-κBmRNA表达,下调Caspase-9mRNA、Caspase-3mRNA、BadmRNA表达。结论:1.益髓解毒法可明显改善VD大鼠的学习和记忆等认知功能。2.益髓解毒法可明显改善VD大鼠海马组织病理结构,保护海马神经元超微结构的完整性,修复神经元损伤。3.益髓解毒法可明显增加VD大鼠海马神经细胞内尼氏小体的数量,修复神经受损功能,抗神经元细胞凋亡。4.益髓解毒法可明显上调大鼠海马组织内PI3K、Akt、p-Akt、NF-κB蛋白和基因表达,下调Caspase-9、Caspase-3、Bad蛋白和基因表达,这可能是益髓解毒法通过调控PI3K/Akt信号通路相关因子表达,以解毒之法解“神经毒”性,抗细胞凋亡,以益髓之法修复神经元损伤,实现脑保护,从而改善VD学习和认知功能,发挥保护VD的作用机制之一。
刘丹[9]（2019）在《朝医八物君子汤对血管性痴呆大鼠影响认知功能的实验研究》文中研究表明目的:探究朝医八物君子汤对血管性痴呆（Vasculer Dementia,VD）大鼠学习记忆能力及海马CA1区细胞形态学的影响。方法:本研究选用50只,雄性SD大鼠,随机分为假手术组（Sham operation control group）和手术组（Operation group）,手术组采用改良2-血管阻断法(（2-Vessel occlusion,2-VO）制造痴呆大鼠模型,假手术组只分离不结扎。随后将造模成功的大鼠随机分为五组:假手术组、模型组、尼麦角林组（Nicergolinegroup）、朝医八物君子汤高剂量组（High dose group）、朝医八物君子汤低剂量组（Low dose group）。手术后第二天开始灌胃,假手术组及模型组予蒸馏水10ml/kg/d、尼麦角林组予尼麦角林溶液0.5ml/kg/d、高剂量组予朝医八物君子汤18g/kg/d、低剂量组予朝医八物君子汤4.5 g/kg/d,连续灌胃28天。灌胃结束前5天进行Morris水迷宫实验,观察VD大鼠治疗前后行为学能力的改变;大鼠处死后,应用HE染色观察海马CA1区神经元的结构形态;并观察VD模型大鼠血清中SOD、MDA、GSH-PX水平的变化。结果:1、Morris水迷宫实验研究表明,与模型组相比,朝医八物君子汤（高,低剂量组）大鼠上台潜伏期显着缩短,穿越平台次数显着增加。2、HE染色可见:假手术组海马CA1区细胞结构形态无明显异常,排列整齐,边界清晰;模型组海马CA1区细胞排列紊乱,细胞形态变异,染色不均;尼麦角林组、朝医八物君子汤高剂量组、朝医八物君子汤低剂量组较模型组对照,可见椭圆形细胞形态增多,排列较规整。3、血清中SOD、MDA、GSH-PX:与假手术组比较,模型组血清中SOD、GSH-PX活性显着降低,MDA含量显着升高（P<0.001）;与模型组比较,朝医八物君子汤高剂量组及朝医八物君子汤低剂量组血清中SOD、GSH-PX均有所升高,MDA含量有所下降。结论:1、朝医八物君子汤能够显着改善VD模型大鼠的学习记忆能力和空间探索能力。2、朝医八物君子汤对VD模型大鼠海马CA1区细胞损伤具有保护作用。3、朝医八物君子汤可以调节VD模型大鼠血清中SOD、GSH-PX活性,降低MDA含量。
刘佳妮[10]（2019）在《参麻益智方对血管性痴呆大鼠脑白质的影响和机制研究》文中进行了进一步梳理血管性痴呆（Vasculardementia,VaD）是最常见的非变性病痴呆,目前是仅次于阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）第二大痴呆疾病[1]。目前VaD诊断不足、缺乏有效治疗方案,人均预期寿命延长以及高血压、冠心病、糖尿病、代谢综合征和脑卒中等危险因素使VaD患者人数持续上升。但VaD是可以防治的痴呆类型,具有可逆、早期干预预后较好的特点,因此迫切需要开发有效的诊断方法和药物进行诊断指导和治疗。研究表明,脑缺氧缺血引起的白质损伤是VaD的重要病理变化,脑白质的弥漫性改变伴髓鞘和轴突的丢失几乎是所有VaD亚型的共同特征,白质损伤与VaD认知能力下降密切相关,但目前其神经生物学机制尚不明确。参麻益智方是全国名老中医周文泉教授的经验方,以人参、天麻、鬼箭羽、川芎四味中药配伍,临床常用于治疗气虚血瘀阳亢型VaD,并取得了良好疗效,基于此,本实验通过研究参麻益智方对血管性痴呆模型大鼠白质损伤的影响及作用机制,以明确该方对VaD脑缺血缺氧后的白质病变是否有改善作用,本文同时也对VaD的白质损伤与血脑屏障（Blood brain barrier,BBB）破坏、氧化应激的相互关系进行了探讨,以期为探索有效的认知功能保护策略提供帮助。目的:观察参麻益智方对血管性痴呆大鼠白质的影响,并对参麻益智方的作用机制及其与血脑屏障通透性、氧化应激的相关性进行探讨。方法:1.采用聚苯乙烯微球栓塞法建立大鼠多发脑梗死痴呆模型,将56只雄性Wistar大鼠,随机分为空白组（Control）、假手术组（Sham）、模型组（Model）、多奈哌齐组（Donepezil）、参麻益智方低剂量组（SMYZ-L）、中剂量组（SMYZ-M）、高剂量组（SMYZ-H）。造模结束3天后,多奈哌齐组予0.5mg/kg药物灌胃,参麻益智方低、中和高剂量组分别予3.3g/kg、6.6g/kg及16.5g/kg药物灌胃,假手术组、模型组予等量蒸馏水灌胃。2.连续4周给药后,采用Morris水迷宫观测血管性痴呆大鼠的逃避潜伏期、穿台次数、原平台活动时间及路程的结果,评估大鼠空间学习记忆能力;采用苏木精-伊红染色（Hematoxylin-eosin staining,HE）、尼氏染色（Nissl）评估大鼠海马CA1区神经元形态学和尼氏小体的病理变化。3.卢卡斯快蓝染色（Luxol fast blue,LFB）观察胼胝体区髓鞘形态、免疫印迹法（Western blot,WB）检测脑白质髓鞘碱性蛋白（Myelin basic protein,MBP）以评估髓鞘脱失情况。WB检测海马组织内紧密连接蛋白Occludin、ZO-1,缝隙连接CX43的蛋白表达,评估BBB功能。比色法检测海马组织过氧化氢酶（Catalase Micrococcus lysodeikticus,CAT）、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）的活性,微量还原型谷胱甘肽（Glutathione,GSH）、细胞丙二醛（Malondialdehyde,MDA）的含量,评估氧化应激水平。结果:1.行为学检测定位航行实验:同一天组间比较:与Sham组相比,Model组的潜伏期第二天开始明显高于Sham组,组间相比差异具有统计学意义（P<0.05）;提示多发梗死性VaD模型的Model组大鼠学习能力明显下降;与Model组比较,Donepezil组潜伏期第二天开始明显缩短（P<0.05）,SMYZ-M、SMYZ-H组在第三天开始明显缩短（P<0.05）。组内比较:与组内第一天比较,所有组大鼠的潜伏期均有缩短,其中Control组、Model组在第二天开始潜伏期均明显缩短（P<0.05）,Donepezil组和SMYZ-L、SMYZ-M、SMYZ-H组在训练第三天的潜伏期也明显缩短（P<0.05）。空间探索实验:与Control组相比,Sham组差异无统计学意义;与Sham组比较,Model组穿台次数减少,第一象限时间与路程降低,差异有统计学意义（P<0.05）。与Model组比较,SMYZ-L、SMYZ-H组的大鼠穿台次数显着增加,差异具有统计学意义（P<0.05）;Donepezil组和SMYZ-M组第一象限活动路程增加,差异有统计学意义（P<0.05）。2.脑组织病理形态光学显微镜下观察大鼠海马CA1区的病理形态变化。可见Control及Sham组细胞层次分明,排列整齐有序,细胞形态规则,尼氏体丰富,呈深蓝色的颗粒或斑块状:Model组与Control组相比,大鼠海马CA1区细胞间隙增大,排列散乱无序,细胞形态不规则,尼氏体崩解或丢失,颜色变浅且分布散乱;与Model组大鼠对比,Donepezil、SMYZ-L、SMYZ-M和SMYZ-H组海马CA1区细胞层数增加,排列较为紧密,病理形态均有不同程度改善,胞浆内可见较多尼氏体,丢失不明显。3.胼胝体髓鞘形态和蛋白表达LFB染色可观察到,Control组大鼠胼胝体区髓鞘呈深蓝色,髓鞘染色呈条索状、髓鞘纤维排列致密;与Control组比较,Sham组髓鞘纤维排列稍散乱,髓鞘着色未变浅;Model组大鼠与Control组比较,胼胝体髓鞘着色变浅、结构疏松、胼胝体（Corpus callosum,CC）区域视野下数量较少。Donepezil及SMYZ干预后胼胝体区域髓鞘颜色变深,结构较紧密。WB结果显示,与Control组相比,Sham组的MBP表达量无统计学差异（P>0.05）,Model组海马组织中MBP的表达量明显减少,差异具有统计学意义（P<0.05）;与Model组相比,Donepezil组和SMYZ-H组的MBP明显增多,差异具有统计学意义（P<0.05）,SMYZ-L、SMYZ-M组具有改善作用,但差异无统计学意义。4.BBB相关蛋白表达WB结果显示与Sham组相比,Model组大鼠脑海马组织中Occludin、ZO-1的表达明显减少,Model组与Sham组相比差异有统计学意义（P<0.05）。Donepezil和 SMYZ 干预可增加 Occludin、ZO-1 的表达,其中 Donepezil、SMYZ-H组与Model组相比差异具有统计学意义（P<0.05）。与Sham组相比,Model组大鼠CX43表达明显增多（P<0.05）,SMYZ-M、SMYZ-H组干预可明显减少CX43的表达,与Model组相比差异具有统计学意义（P<0.05）;Donepezil组和SMYZ-L组也可一定程度减少CX43的表达,但差异不具有统计学意义（P>0.05）。5.氧化应激水平比色法结果显示,与Control组相比,Sham组CAT、GSH、SOD的活性及MDA含量无统计学差异（P>0.05）。与Sham组相比,Model组CAT、GSH、SOD活性明显下降,且MDA含量明显升高,组间相比差异具有统计学意义（P<0.05）。与Model组相比,Donepezil、SMYZ-H组CAT活性明显升高（P<0.05）,SMYZ-L、M组CAT活性相比于Model组具有升高趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）;SMYZ-M和SMYZ-H组的GSH活性明显升高（P<0.05）;SMYZ-M、SMYZ-H 组 SOD 的活性明显增高（P<0.05）,Donepezil与 SMYZ-L组SOD活性相比于Model组具有升高趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）;Donepezil、SMYZ-M、SMYZ-H组MDA含量明显降低,与Model组相比差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:一、参麻益智方可明显提高血管性痴呆大鼠空间学习记忆能力,一定程度改善组织细胞病理形态学特征,具有神经保护作用;二、参麻益智方可增加MBP表达,改善胼胝体髓鞘形态,具有脑白质保护作用;三、可降低屏障通透性,改善BBB功能障碍;四、可增强神经细胞清除自由基和活性氧的能力,减轻氧化应激损伤。五、其改善白质的作用机制可能与以下两个方面有关:（1）改善紧密连接和缝隙连接蛋白功能,保护屏障完整性而减轻BBB功能障碍,阻止炎性因子和血浆内有害物质渗漏入脑而改善神经细胞内环境、减少细胞凋亡,从而减轻白质损伤。（2）增强神经细胞清除自由基和活性氧的能力,缓解神经血管单元功能失调,减轻活性氧自由基（Reactive oxygen species,ROS）介导的神经元损伤、细胞能量代谢障碍,减轻脑深部白质微血管损害,从而减缓白质梗死的形成。参麻益智方改善白质损伤的作用机制作为减轻或预防VaD的新型神经保护方法的重点,具有潜在的可行性和应用价值。
二、纳洛酮对血管性痴呆大鼠空间学习记忆减退的防治作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、纳洛酮对血管性痴呆大鼠空间学习记忆减退的防治作用（论文提纲范文）
（1）补脾醒神益智法对脾虚认知功能障碍大鼠TREM2/NF-κb信号通路作用机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 从脾论治认知功能障碍中医相关理论探讨 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一: 补脾醒神益智方对脾虚认知功能障碍模型大鼠学习记忆能力的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验二: 补脾醒神益智方对Aβ诱导的脾虚认知功能障碍大鼠形态学及血清IL-1β、IL-6以及TNF-α表达的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验三: 补脾醒神益智方对脾虚认知功能障碍大鼠脑组织的TREM2/NF-κB信号通路的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 中医药防治认知功能障碍研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（2）基于线粒体相关蛋白通路探讨参麻益智方对血管性认知障碍大鼠的作用机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 文献综述 |
| 综述一 线粒体能量代谢关键蛋白在认知障碍中的作用机制 |
| 1 能量代谢相关通路在认知障碍中的作用 |
| 2 线粒体能量代谢相关的关键蛋白在认知障碍中的作用 |
| 参考文献 |
| 综述二 基于中医“虚、瘀、毒”病机探讨能量代谢异常和血管性认知障碍的相互关系 |
| 1 中医“虚、瘀、毒”与血管性认知障碍的关系 |
| 2 中医“虚、瘀、毒”与能量代谢障碍的关系 |
| 3 脑的能量代谢与血管性认知障碍的关系 |
| 4 改善线粒体能量代谢治疗血管性认知障碍的中药复方研究 |
| 参考文献 |
| 实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 参麻益智方的提取方法和主要化学成分分析 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 实验二 参麻益智方对慢性脑缺血致血管性认知障碍大鼠学习记忆能力的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 实验三 参麻益智方对慢性脑缺血致认知障碍模型大鼠脑组织线粒体障碍相关蛋白的机制研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 讨论 |
| 1 参麻益智方的组方特点和前期研究成果 |
| 2 慢性脑低灌注致血管性认知功能障碍大鼠模型 |
| 3 参麻益智方改善血管性认知障碍大鼠学习记忆功能 |
| 4 参麻益智方对血管性认知障碍大鼠线粒体数量和结构的影响 |
| 5 参麻益智方对线粒体关键蛋白能量代谢的影响 |
| 6 线粒体能量代谢的中医认识 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 附件 |
（3）基于炎症反应、氧化应激、miRNA-124/BACE1/Aβ通路探讨涤痰汤治疗血管性痴呆模型大鼠的作用机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词汇表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1.古代中医对血管性痴呆的认识 |
| 1.1.秦汉时期 |
| 1.2.晋—宋时期 |
| 1.3.明清时期 |
| 2.现代中医对血管性痴呆的认识 |
| 2.1.从虚论治 |
| 2.2.从实论治 |
| 2.3.虚实夹杂 |
| 3.涤痰汤治疗血管性痴呆的理论依据 |
| 3.1.痰浊阻窍是血管性痴呆认知障碍的病机中心环节 |
| 3.2.涤痰汤的组方分析及药味的现代药理研究 |
| 4.参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1.实验一涤痰汤对血管性痴呆模型大鼠行为及海马组织病理的影响 |
| 1.1.实验材料 |
| 1.2.实验方法 |
| 1.3.统计学处理 |
| 1.4.结果 |
| 1.5.讨论 |
| 1.6.参考文献 |
| 2.实验二涤痰汤对血管性痴呆模型大鼠氧化应激反应的影响 |
| 2.1.实验材料 |
| 2.2.实验方法 |
| 2.3.统计学处理 |
| 2.4.结果 |
| 2.5.讨论 |
| 2.6.参考文献 |
| 3.实验三涤痰汤对血管性痴呆模型大鼠炎症反应的影响 |
| 3.1.实验材料 |
| 3.2.实验方法 |
| 3.3.统计学处理 |
| 3.4.结果 |
| 3.5.讨论 |
| 3.6.参考文献 |
| 4.实验四基于mi RNA-124/BACE1/Aβ信号通路探讨涤痰汤对VD模型大鼠的治疗机制 |
| 4.1.实验材料 |
| 4.2.实验方法 |
| 4.3.统计学处理 |
| 4.4.结果 |
| 4.5.讨论 |
| 4.6.参考文献 |
| 结语 |
| 1.结论 |
| 2.创新 |
| 3.不足 |
| 附录 |
| 附录一 综述 |
| 参考文献 |
| 附录二 在校期间发表论文 |
| 致谢 |
（4）益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠PI3K/Akt信号通路的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1 VD现代医学研究概况 |
| 1.1 VD的历史背景 |
| 1.2 VD的临床表现 |
| 1.3 VD的流行病学 |
| 1.4 VD的危险因素 |
| 1.4.1 高血压 |
| 1.4.2 血糖异常 |
| 1.4.3 血脂异常 |
| 1.4.4 高同型半胱氨酸血症 |
| 1.4.5 心脏疾病 |
| 1.4.6 慢性肾脏病 |
| 1.4.7 吸烟和饮酒 |
| 1.4.8 焦虑 |
| 1.4.9 抑郁 |
| 1.4.10 睡眠呼吸暂停综合征 |
| 1.4.11 年龄 |
| 1.4.12 遗传因素 |
| 1.4.13 其他因素 |
| 1.5 VD的现代医学发病机制 |
| 1.5.1 胆碱能假说 |
| 1.5.2 突触损伤学说 |
| 1.5.3 兴奋性氨基酸毒性 |
| 1.5.4 氧化应激 |
| 1.5.5 炎性反应 |
| 1.5.6 遗传机制 |
| 1.6 VD的西医防治 |
| 1.6.1 预防性治疗 |
| 1.6.2 抗痴呆治疗 |
| 1.6.3 精神行为症状治疗 |
| 2 中医学与VD |
| 2.1 中医对VD病名的认识 |
| 2.2 VD病因病机 |
| 2.2.1 肾与VD |
| 2.2.2 心与VD |
| 2.2.3 脾与VD |
| 2.2.4 肝与VD |
| 2.2.5 肺与VD |
| 2.2.6 痰饮与VD |
| 2.2.7 瘀血与VD |
| 2.3 现代研究 |
| 第二部分 实验研究 益肺宣肺降浊方对VD大鼠PI3K/Akt信号通路的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验大鼠 |
| 1.2 主要药物 |
| 1.3 主要实验仪器及试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 实验分组及给药 |
| 2.2 VD模型的建立 |
| 2.3 Morris水迷宫 |
| 3 取材 |
| 4 样品制备及检测 |
| 4.1 TUNEL细胞凋亡检测 |
| 4.2 HE染色 |
| 4.3 Western Blot检测 |
| 4.3.1 蛋白样品制备 |
| 4.3.2 上样顺序 |
| 4.3.3 SDS-PAGE电泳 |
| 5 统计学分析 |
| 6 结果 |
| 6.1 定位航行实验 |
| 6.2 空间探索实验 |
| 6.3 HE染色结果 |
| 6.4 TUNEL检测结果 |
| 6.5 Western Blot检测结果 |
| 第三部分 讨论 |
| 1 益肺宣肺降浊方立方依据及组方分析 |
| 2 益肺宣肺降浊方干预VD大鼠实验结果 |
| 2.1 行为学检测结果 |
| 2.2 海马神经元改变 |
| 2.3 PI3K/Akt信号通路蛋白表达 |
| 2.4 对照药物的分析 |
| 3 不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 综述 PI3K/AKT 信号通路与血管性痴呆相关性及中医药干预研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
（5）基于海马突触传递效能和可塑性探讨电针改善血管性痴呆学习记忆功能的作用机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 1 血管性痴呆的中医认识 |
| 2 电针对血管性痴呆学习记忆障碍的改善作用 |
| 3 电针改善VD大鼠学习记忆功能的可能机制 |
| 4 海马调控学习记忆的突触可塑性机制 |
| 5 电针对海马突触可塑性和相关蛋白表达的影响 |
| 6 研究假说 |
| 实验材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验设备耗材及试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 动物分组及VD模型建立 |
| 2.2 电针“百会”、“神庭”干预方法 |
| 2.3 小动物磁共振3D-TOF扫描 |
| 2.4 学习记忆能力测试 |
| 2.5 膜片钳电生理记录技术检测大鼠海马CA3-CA1 区场电位 |
| 2.6 突触可塑性相关调节蛋白定量检测 |
| 3 统计方法 |
| 3.1 行为学数据分析 |
| 3.2 大鼠海马CA3-CA1 区场电位数据分析 |
| 3.3 突触可塑性相关调节蛋白表达定量分析 |
| 4 技术路线图 |
| 实验结果 |
| 1 VD大鼠模型检验结果 |
| 1.1 小动物磁共振3D-TOF血管成像检测结果 |
| 1.2 新物体识别行为学实验检测结果 |
| 2 电针“百会”、“神庭”对VD模型大鼠学习记忆功能的影响 |
| 3 电针“百会”、“神庭”对VD模型大鼠海马CA3-CA1区I/O曲线和PPR的影响 |
| 4 电针“百会”、“神庭”对VD模型大鼠海马CA3-CA1区LTP的检测结果 |
| 5 电针“百会”、“神庭”对VD模型大鼠海马Nr2B、GluR1和CaMKⅡ蛋白表达及其磷酸化水平的影响 |
| 讨论 |
| 1 VD模型大鼠学习记忆功能障碍 |
| 2 电针对 VD 学习记忆功能的影响 |
| 3 电针对VD大鼠海马突触传递效能的影响 |
| 4 电针对 VD 大鼠海马突触可塑性的影响 |
| 5 电针对血管性痴呆大鼠突触可塑性相关蛋白影响 |
| 结论 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（6）生脉散改善高糖高脂复合模型致学习记忆减退作用及机制研究（论文提纲范文）
| 英文缩略语 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 |
| 糖尿病所致认知障碍的研究进展 |
| 参考文献 |
| 生脉散对神经系统药理作用的研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第一章 生脉散对高糖髙脂致大鼠学习记忆减退作用及机制研究 |
| 第一节 生脉散对高糖高脂复合模型大鼠学习记忆减退的影响 |
| 1. 材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 统计方法 |
| 4. 实验结果 |
| 5. 讨论与小结 |
| 第二节 生脉散改善高糖髙脂模型大鼠学习记忆减退的作用机制研究 |
| 1. 材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 统计方法 |
| 4. 实验结果 |
| 5. 讨论与小结 |
| 第三节 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 高血糖、高血脂致大鼠学习记忆减退作用及机制研究 |
| 第一节 高血糖致大鼠学习记忆减退的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. |
| 3. 统计方法 |
| 4.实验结果 |
| 5.讨论与小结 |
| 第二节 高血糖致大鼠学习记忆功能减退作用机制研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 方法 |
| 3. 统计方法 |
| 4. 实验结果 |
| 5. 讨论与小结 |
| 第三节 高血脂致大鼠学习记忆功能减退的影响 |
| 1. 材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 统计方法 |
| 4. 实验结果 |
| 5. 讨论与小结 |
| 第四节 高血脂致大鼠学习记忆减退作用机制研究 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 统计方法 |
| 4. 实验结果 |
| 5. 讨论与小结 |
| 第五节 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 全文总结 |
| 附表1 高血糖、高血脂、高血糖高血脂复核模型血糖、胰岛素、血脂变化 |
| 附表2 生脉散对高糖高脂复合模型致学习记忆作用及机制研究 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（7）基于Fkbps对老年大鼠GR核转位的影响探析学习记忆关键基因表达变化机制及补肾益气方药的作用（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 试剂与药材 |
| 1.3 仪器与耗材 |
| 1.4 溶液配制 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 动物分组、饲养、造模及用药 |
| 2.2 制备中药复方制剂 |
| 2.3 取材 |
| 2.4 制备脑组织冰冻切片 |
| 2.5 Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力检测 |
| 2.6 ELISA法检测各组大鼠血清皮质酮(GC)含量 |
| 2.7 免疫荧光法检测各组大鼠海马GR分子伴侣蛋白Fkbp5蛋白表达 |
| 2.8 免疫组化法检测各组大鼠海马GR分子伴侣蛋白Fkbp4蛋白表达 |
| 2.9 免疫荧光双标结合激光共聚焦显微镜(CLSM)技术检测各组大鼠Hdac2、MeCP2蛋白在大脑海马神经细胞核内的共定位情况 |
| 2.10 Western blotting法检测各组大鼠海马组织GR调控回路蛋白GR Fkbp5、Fkbp4、Dynein IC2,表观遗传修饰酶Dnmt1、Dnmt3a、Hat1、Hdac2蛋白,乙酰化修饰组蛋白H4K12Ac、H4K5Ac,学习记忆相关蛋白Nptx2、Syn-1、Homer1的表达 |
| 2.11 F-Q-RT-PCR法检测各组大鼠海马组织GR调控回路基因GR、Fkbp5 mRNA,表观遗传修饰酶基因Dnmt1、Dnmt3a、Hat1、Hdac2 mRNA,学习记忆相关基因Nptx2、Syn-1、Homer1 mRNA的表达 |
| 2.12 Q-RT-PCR法检测各组大鼠海马组织miR-124a和miR-511的表达 |
| 2.13 数据统计分析方法 |
| 结果 |
| 1.各组大鼠学习记忆能力的变化 |
| 2.各组大鼠血清皮质酮(GC)含量变化 |
| 3.各组大鼠大脑海马分区和皮层Fkbp5蛋白的表达变化 |
| 4.各组大鼠大脑海马分区Fkbp4蛋白的表达变化 |
| 5.各组大鼠大脑海马分区GR、Fkbp5、Fkbp4和Dynein IC2蛋白与GR、Fkbp5 mRNA的表达变化 |
| 5.1 海马组织总GR蛋白、细胞浆GR蛋白与细胞核GR蛋白的变化 |
| 5.2 海马组织Fkbp5、Fkbp4和Dynein IC2蛋白表达的变化 |
| 5.3 海马组织GR和Fkbp5 mRNA的表达变化 |
| 6.各组大鼠大脑海马分区miR-124a和miR-511 的表达变化 |
| 7.各组大鼠Hdac2和MeCP2在大脑海马神经细胞核内的共定位情况 |
| 8.各组大鼠海马组织表观遗传修饰酶蛋白及其mRNA的表达变化 |
| 8.1 海马组织表观遗传修饰酶蛋白的表达变化 |
| 8.2 海马组织表观遗传修饰酶mRNA的表达变化 |
| 9.各组大鼠海马组织乙酰化修饰组蛋白的表达变化 |
| 10.各组大鼠大脑海马组织学习记忆相关基因mRNA及其蛋白表达变化 |
| 10.1 大脑海马组织学习记忆相关蛋白的表达变化 |
| 10.2 大脑海马组织学习记忆相关基因mRNA的表达变化 |
| 讨论 |
| 1. 老年大鼠学习记忆能力的变化及各类药物的干预作用 |
| 2. 各组大鼠大脑海马神经细胞miR-FKBP5-GR调控回路的变化 |
| 2.1 糖皮质激素及其受体(GC-GR)的衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 2.2 Fkbp5/Fkbp4/动力蛋白调控GR入核的衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 2.3 miRNA调控GR的衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 2.4 小结 |
| 3. 表观遗传修饰与学习记忆调节的衰老性变化 |
| 3.1 DNA甲基化修饰与学习记忆的衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 3.2 组蛋白乙酰化修饰与学习记忆衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 3.3 小结 |
| 4. 中医对增龄性学习记忆能力减退的认识与经典方剂的使用 |
| 4.1 增龄性学习记忆减退的病因病机 |
| 4.2 数据发掘临床治疗增龄性学习记忆减退常用方药的使用规律 |
| 4.3 左归丸与益气聪明汤治疗增龄性学习记忆退化的理论依据 |
| 4.4 小结 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录一:技术路线图 |
| 附录二:文献综述一 表观遗传修饰变化与学习记忆关系的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录三:文献综述二 分子伴侣蛋白Fkbp5对GC-GR调控学习记忆相关基因表达的影响 |
| 参考文献 |
| 附录四:已发表文章 |
| 附录五:在读期间参加学术会议情况 |
| 附录六:其他 |
（8）基于PI3K/Akt信号通路探讨益髓解毒法对血管性痴呆大鼠作用机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 实验研究 |
| 第一章 益髓解毒法对血管性痴呆大鼠行为学的影响 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 第二章 益髓解毒法对血管性痴呆大鼠海马组织形态学的影响 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 第三章 益髓解毒法对血管性痴呆大鼠海马组织细胞损伤及凋亡的影响 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 第四章 益髓解毒法对血管性痴呆大鼠海马PI3K/Akt信号通路的影响 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 第五章 “髓虚毒损”中风病机思想对VD益髓解毒治疗大法的指导 |
| 1.课题研究的理论背景 |
| 2.髓虚毒损病机关键对血管性痴呆的理论指导 |
| 3.益髓解毒法治疗VD的理论依据及组方分析 |
| 4.益髓解毒法与VD细胞凋亡机制的关联分析 |
| 5.课题研究不足 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简介 |
（9）朝医八物君子汤对血管性痴呆大鼠影响认知功能的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 实验主要仪器 |
| 2.1.3 实验试剂及材料 |
| 2.1.4 溶液配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 模型制备与给药 |
| 2.2.2 Morris水迷宫实验 |
| 2.2.2.1 定位航行实验 |
| 2.2.2.2 空间探索实验 |
| 2.2.3 HE染色 |
| 2.2.3.1 大鼠脑组织采集与外观观察 |
| 2.2.3.2 大鼠组织冰冻切片的制备 |
| 2.2.3.3 海马CA1区染色 |
| 2.2.4 血液指标的测定 |
| 2.2.4.1 血清采集与制备 |
| 2.2.4.2 血液中指标的测定 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 Morris水迷宫实验 |
| 3.1.1 朝医八物君子汤对血管性痴呆大鼠学习记忆能力的影响 |
| 3.1.2 八物君子汤对血管性痴呆大鼠空间探索能力的影响 |
| 3.2 朝医八物君子汤对大鼠海马CA1区形态学的影响 |
| 3.3 朝医八物君子汤对大鼠血液指标的影响 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 认知功能测试结果分析 |
| 4.2 朝医八物君子汤方药探讨 |
| 4.3 存在问题和研究方向 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）参麻益智方对血管性痴呆大鼠脑白质的影响和机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语中英文索引 |
| 综述部分 |
| 一 血管性痴呆的中医认识及治疗进展 |
| 二 血管性痴呆的西医认识及治疗进展 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2. 方法 |
| 2.1 药品制备 |
| 2.2 模型制备 |
| 2.3 分组与给药 |
| 2.4 行为学检测-Morris水迷宫 |
| 2.5 取材、染色 |
| 2.6 Western Blot法 |
| 2.7 比色法 |
| 2.8 统计学方法 |
| 结果 |
| 1 行为学检测 |
| 2 脑组织病理形态学 |
| 3 胼胝体髓鞘形态 |
| 4 MBP蛋白表达 |
| 5 BBB相关蛋白表达 |
| 6 氧化应激水平 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
四、纳洛酮对血管性痴呆大鼠空间学习记忆减退的防治作用（论文参考文献）
- [1]补脾醒神益智法对脾虚认知功能障碍大鼠TREM2/NF-κb信号通路作用机制的研究[D]. 程越. 辽宁中医药大学, 2021(02)
- [2]基于线粒体相关蛋白通路探讨参麻益智方对血管性认知障碍大鼠的作用机制[D]. 孙成成. 中国中医科学院, 2021(02)
- [3]基于炎症反应、氧化应激、miRNA-124/BACE1/Aβ通路探讨涤痰汤治疗血管性痴呆模型大鼠的作用机制[D]. 杨超. 湖北中医药大学, 2020(08)
- [4]益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠PI3K/Akt信号通路的影响[D]. 陈业文. 广西中医药大学, 2020
- [5]基于海马突触传递效能和可塑性探讨电针改善血管性痴呆学习记忆功能的作用机制[D]. 张宇豪. 福建中医药大学, 2020(08)
- [6]生脉散改善高糖高脂复合模型致学习记忆减退作用及机制研究[D]. 曾贵荣. 北京协和医学院, 2020
- [7]基于Fkbps对老年大鼠GR核转位的影响探析学习记忆关键基因表达变化机制及补肾益气方药的作用[D]. 王璐. 上海中医药大学, 2019(02)
- [8]基于PI3K/Akt信号通路探讨益髓解毒法对血管性痴呆大鼠作用机制的研究[D]. 高玲. 长春中医药大学, 2019(01)
- [9]朝医八物君子汤对血管性痴呆大鼠影响认知功能的实验研究[D]. 刘丹. 延边大学, 2019(01)
- [10]参麻益智方对血管性痴呆大鼠脑白质的影响和机制研究[D]. 刘佳妮. 中国中医科学院, 2019(01)