一、高效、快速清洗盖玻片法（论文文献综述）
乔柱[1]（2021）在《异源表达细菌素BMP32r杀菌和抑制生物膜作用机制研究》文中指出食源性致病菌及其生物膜是诱发食源性疾病的主要原因,严重威胁食品工业的发展和人类健康。致病菌存在的抗生素耐药性增加了人类感染的风险,给医疗行业带来了巨大的负担。细菌素是一类细菌核糖体合成的具有抗菌作用的多肽,被认为是天然的食品防腐剂和潜在的抗生素替代品。此外,由于对化学防腐剂安全性的担忧,消费者更倾向于选择天然防腐剂用以防控食源性致病菌污染。因此,迫切需要开发高效、安全的细菌素作为食品防腐剂和抗菌剂应用于食品和医药领域。基于实验室前期挖掘到的细菌素BMP32基因,本研究通过异源表达获得具有广谱抑菌活性的重组细菌素BMP32r,对其进行纯化和鉴定,研究其理化性质、抑菌活性、杀菌机制、抑制生物膜机制及对混合生物膜的抑制作用,并将其应用于食品和医药领域,以期为其应用奠定理论基础。具体研究内容和结果如下:（1）细菌素BMP32异源表达系统的构建及选择:基于面包乳杆菌MN047基因组扩增出细菌素BMP32基因,构建了p ET-30a（+）-BMP32重组质粒,将其转入大肠杆菌BL21;根据毕赤酵母密码子偏好性,合成细菌素BMP32编码基因序列,构建了p PIC9K-BMP32重组质粒,并将其转入毕赤酵母GS115。分别诱导表达后结果显示,两套表达系统均能实现目标细菌素的异源表达,原核表达系统制备细菌素样品对大肠杆菌指示菌的抑菌效价为320 AU/m L,而其在真核表达系统中的抑菌效价为20 AU/m L。结合原核表达系统表达周期短、目标样品活性高等优势,选择大肠杆菌表达系统作为细菌素BMP32的制备方式。（2）细菌素BMP32r的纯化、鉴定和理化性质:通过大肠杆菌表达系统制备携带有HIS标签的重组细菌素BMP32r,并对其进行纯化和鉴定;采用二倍稀释法测定其的最小抑菌浓度,并对BMP32r的稳定性和溶血活性进行测定。结果表明,建立的Ni-NTA亲和层析柱和高效液相色谱结合的两步纯化方案能有效的纯化细菌素BMP32r,LC-MS/MS鉴定到细菌素BMP32r的表达,纯化后的细菌素BMP32r对大肠杆菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC 25923的最小抑菌浓度分别为9.2 mg/L和18.4 mg/L,具有较好的抑菌活性。该细菌素具有良好的热稳定性、p H稳定性、贮藏稳定性和化学试剂稳定性。此外,细菌素BMP32r在0-147.2 mg/L浓度条件下具有低的溶血活性。（3）细菌素BMP32r的抑菌活性及抑菌机制:采用琼脂扩散法测定细菌素BMP32r的抑菌谱;通过生长曲线和杀菌曲线测定其抑菌和杀菌作用;利用扫描电镜和透射电镜观测细菌素BMP32r处理对指示菌（大肠杆菌和金黄色葡萄球菌）微观结构的影响,通过碘化丙啶吸收和乳酸脱氢酶释放试验测定细菌素BMP32r对指示菌细胞膜的损伤。结果表明,细菌素BMP32r具有广谱抑菌活性,能抑制多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,其中包括一些多重耐药菌;能有效抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长,具有杀菌作用;细菌素BMP32r造成大肠杆菌细胞表面碎片,结构断裂,内部质壁分离,胞内物质分布不均匀,甚至造成细胞裂解;能引发金黄色葡萄球菌表面凹陷,内部质壁分离,胞内物质分布不均匀的现象。此外,细菌素BMP32r处理增加指示菌碘化丙啶摄取和胞外乳酸脱氢酶的含量。这些结果说明,细菌素BMP32r通过破坏细胞膜完整性,诱导胞内物质流失,甚至裂解细胞的方式诱导细菌死亡。（4）细菌素BMP32r抑制单增李斯特菌生物膜的作用机制:采用二倍稀释法测定细菌素BMP32r对单增李斯特菌的最小抑菌浓度;通过生长曲线和杀菌曲线测定其亚抑菌浓度、对浮游菌的抑制和杀死作用;利用结晶紫染色、CCK-8、平板计数法、半固体平板、钌红染色、实时定量PCR和扫描电镜探究亚抑菌浓度细菌素BMP32r对单增李斯特菌生物膜的抑制作用;通过结晶紫染色、CCK-8和平板计数法评价细菌素BMP32r对成熟单增李斯特菌生物膜的破坏作用;采用平板计数法测定细菌素BMP32r对单增李斯特菌顽固菌的杀死作用。结果表明,细菌素BMP32r对单增李斯特菌的最小抑菌浓度为4.6 mg/L。在4×MIC浓度条件下处理3 h能完全杀死单增李斯特浮游菌。亚抑菌浓度（1/16×MIC和1/32×MIC）的BMP32r几乎不影响单增李斯特菌的生长,但可以降低单增李斯特菌生物膜的形成量,减少生物膜内菌的数目,抑制细菌的泳动,减少胞外多糖的分泌,下调群体感应和毒力基因的表达。浓度为2×MIC和4×MIC的细菌素BMP32r能减少成熟生物膜的形成量,杀死生物膜内菌,破坏生物膜结构。4×MIC的细菌素BMP32r能在4 h内完全杀死单增李斯特顽固菌。这些结果说明,细菌素BMP32r能通过杀死浮游菌、减少生物膜形成、破坏成熟生物膜和杀死顽固菌等多个方面抑制单增李斯特菌生物膜。（5）细菌素BMP32r对混合生物膜的抑制作用:通过结晶紫染色和CCK-8测定混合生物膜的形成规律;采用结晶紫染色、平板计数法和银染法探索细菌素BMP32r对混合生物膜的抑制作用;采用平板计数法测定细菌素BMP32r对成熟混合生物膜的破坏作用。结果表明,大肠杆菌的添加降低混合生物膜的形成量及生物膜内菌的代谢活力,而金黄色葡萄球菌的添加有助于混合生物膜的形成并增加生物膜内菌的代谢活力。细菌素BMP32r处理能显着降低混合生物膜的生成量和粘附菌数目,光学显微图像显示,细菌素BMP32r能降低混合生物膜内菌的聚集和胞外物质生成。此外,细菌素BMP32r能有效破坏成熟的混合生物膜,但单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌形成的混合生物膜对BMP32r的耐受性较高。这些结果说明,细菌素BMP32r能有效的抑制混合生物膜的形成、破坏成熟的混合生物膜,但对于单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌形成的混合生物膜抑制效率降低。（6）细菌素BMP32r在食品及医药方面的应用:采用平板计数法分别测定细菌素BMP32r对牛奶中单增李斯特菌的杀死作用及对食品级材料基质上生物膜形成的抑制作用探索其在食品领域的应用潜力;利用HFF细胞增殖试验测定细菌素BMP32的细胞毒性,采用小鼠皮肤伤口耐药菌感染模型开发其在医药领域的应用。结果表明,在贮藏期内,细菌素BMP32r能有效抑制牛奶中单增李斯特菌的生长,4×MIC的BMP32r在第一天就能完全杀死牛奶中单增李斯特菌且没有出现再次生长的现象。单增李斯特菌生物膜的形成受到温度和粘附材料的影响,在25℃条件下的形成量大于4℃条件下的形成量,在粘附材料上的生物膜形成量为硅胶表面>不锈钢表面>玻璃表面。细菌素BMP32r处理能有效降低生物膜的形成量。此外,细菌素BMP32r可以通过杀死小鼠伤口感染的多重耐药菌促进小鼠皮肤伤口愈合。细菌素BMP32r对HFF细胞具有较低的细胞毒性,即使高浓度（200 mg/L）的细菌素对小鼠主要器官也无明显的损伤,细菌素BMP32r具有一定的生物安全性。这些结果说明,细菌素BMP32r有潜力开发为食品防腐剂和抗菌剂应用于食品和医疗领域。
邹昊学[2]（2021）在《NaOH/尿素体系下高活性纤维素酶的构建及其回收性能的研究》文中研究表明纤维素酶作为重要的生物质降解酶,已经被广泛的应用到工业生产中。但是,现在存在的问题是如何在高效水解纤维素的同时可以直接获得高浓度的还原糖。本文利用单甲氧基聚乙二醇类（m PEG-MAL、m PEG-SPA和m PEG-HZ）和右旋糖酐DEX作为修饰剂对天然纤维素酶进行化学修饰,得到10种修饰酶,并且运用到NaOH/尿素与微晶纤维素构成的均相体系中。通过考察酶解过程中的反应条件,选择出NaOH/尿素体系中活性最佳的修饰酶Cell-MAL 5k和Cell-DEX 5k,并确定最适宜的酶解环境。对比发现,在NaOH/尿素体系中,修饰酶的酶活性能达到天然酶的1.8倍左右。并利用紫外光谱、红外光谱等表征手段测定,纤维素酶在修饰前后的结构变化。研究了NaOH/尿素体系中修饰酶Cell-MAL利用双水相浊点萃取法回收利用的可能性。NaOH/尿素溶液与修饰酶Cell-MAL中的聚乙二醇类修饰剂形成了双水相浊点萃取体系。结果表明,在NaOH/尿素溶液当中,55℃下Cell-MAL 5k、10k和20k的最低析出浓度分别为6、3.3和1.6 mg/m L,并且对比回收前后样本,发现纤维素酶的二级结构含量发生变化,内部芳香族氨基酸也发生了一定程度的位移。利用超滤法回收NaOH/尿素体系中的纤维素酶,并且对超滤过程中的动力学进行数学模型分析。结果表明,超滤法可以将纤维素酶以及未反应的纤维素进行全部回收,重新加入反应液之后不影响后续的酶解反应的继续;采用截留分子量较小的超滤膜,可以将纤维素酶和纤维素进行全部截留,每个酶解周期酶活性基本不受影响,对其进行动力学分析得到适合超滤过程的动力学方程。将修饰酶和固定化相结合探究生物催化剂的性能。结果如下,利用食人鱼刻蚀液和硅烷偶联剂（APTES、PTES、VTES）对盖玻片进行硅烷化,得到一系列硅烷化载体。用修饰得到的载体对酶进行固定化并运用到NaOH/尿素体系中。结果表明,固定在载体盖玻片-APTES上的修饰酶活性最强,重复使用5次之后修饰酶活性并未发现有下降迹象。另外,利用红外光谱、接触角、Zeta电位和AFM,对载体进行表征。结果表明,载体表面的接触角对固定化酶活性影响最为显着,其次是载体表面的粗糙度,而Zeta电位和载体的表面羟基含量与酶活性之间没有明显的线性关系。
张雅楠[3]（2021）在《26S蛋白酶体膜定位的机制及功能研究》文中认为泛素-蛋白酶体系统负责真核细胞中绝大多数蛋白的降解,参与调控几乎所有细胞功能。其中,26S蛋白酶体自身的调控机制及其亚细胞定位是经常被忽略的重要科学问题。通常人们认为蛋白酶体主要定位于细胞质与细胞核中,但近年来有证据表明细胞中的多种膜结构上也存在蛋白酶体。蛋白酶体膜定位的分子机制、生理意义和调控方式尚不明了。本论文就这一问题进行深入研究,通过免疫荧光、胶体金免疫电镜、细胞组分分离、点击化学、基因编辑、定量质谱等手段,证明蛋白酶体亚基Rpt2的N端肉豆蔻酰化修饰是蛋白酶体膜定位的普遍机制。该修饰从酵母到人高度保守且在多种组织细胞类型中广泛存在。在细胞中阻断该修饰可显着降低膜定位蛋白酶体含量。更重要的是,Rpt2肉豆蔻酰化缺失的纯合突变在小鼠中胚胎致死,反映了膜定位蛋白酶体具有重要的生物学功能。针对小鼠胚胎成纤维细胞的SILAC定量质谱研究显示,膜定位蛋白酶体的缺失导致数百个蛋白的含量发生改变,其中2/3的蛋白与细胞中各种膜结构相关,参与调控细胞黏附等多种功能。出人意料的是,Rpt2肉豆蔻酰化同时调控该蛋白Y439位点的磷酸化,后者严格依赖Rpt2的膜定位。进一步研究显示该现象的原因在于Rpt2-Y439磷酸化受到膜定位酪氨酸激酶Src及膜定位酪氨酸磷酸酶PTPN2的共同调节。Y439磷酸化破坏蛋白酶体组装,因此在Src过度激活的癌细胞中,膜定位蛋白酶体活性受到抑制。裸鼠成瘤实验显示,Rpt2-Y439磷酸化对于癌细胞响应Src激酶抑制剂的抗肿瘤作用十分重要;表达Rpt2-Y439F突变体的癌细胞对Src抑制剂的敏感度降低。综上,本论文利用丰富的技术手段阐明了哺乳动物中蛋白酶体膜定位的机制、功能和调控,加深了对于蛋白质区域化降解的认识,为研究蛋白酶体和蛋白降解研究开辟了新的方向,也为增强酪氨酸激酶抑制剂在抗癌治疗中的功效提供了新的思路。
施鹏[4]（2021）在《LncRNA Fendrr调控心肌成纤维细胞活化增殖的机制研究》文中研究表明背景心房颤动（Atrial fibrillation,AF）指的是规律、有顺序的心房部正常生理性电活动完全丧失,取而代之为频率高达300-600次/分的无序、不协调微小颤动波,从而使心房部分或者完全失去了有效收缩,心房无法正常泵出回流血液,是一种极为常见的、发病率极高的快速心律失常。心房颤动与心力衰竭发生以及发展的关系甚为密切,是导致心源性休克、脑卒中以及肺栓塞等致死性疾病的重要因素。时至今日,心房颤动的发生和持续原因尚未全面探究明了。长链非编码RNA（Long non-coding RNA,LncRNAs）作为一类碱基累积长度超过200 nt、但是不参与蛋白编码进程的RNA,最初认为其不具有任何生物学意义,伴随着不断深入了解,发现其具有影响染色质重新构型、生物蛋白翻译、翻译后再修饰等关键进程,进而直接或者间接发挥着影响基因表达的作用。日益进展的探究证实,LncRNAs与包括心肌纤维化在内的很多种类疾病的进展以及维持具有一定程度的相关性,一定程度上证明LncRNAs能够起到对某些疾病潜在诊断的作用。目的研究的主要目的在于明确FOXF1邻近非编码发育调控RNA（Long non-coding RNA FOXF1 adjacent non-coding developmental regulatory RNA,LncRNA Fendrr）、DNA甲基转移酶3B（DNA Methyltransferase 3B,DNMT3B）以及RAS相关区域家族1A基因（Ras association domain family 1A gene,RASSF1A）在心肌纤维化标本以及模型中具体表达情况,初步明确LncRNA Fendrr在心肌成纤维细胞活化以及增殖的过程中所发挥的作用,进一步阐释LncRNA Fendrr可能通过DNMT3B增强了RASSF1A甲基化,从而在心肌纤维化持续进展中产生持续性的影响。方法构造SD（Sprague-Dawley）大鼠心房颤动心肌纤维化动物模型,采用SD大鼠左侧中下腹部皮下注射盐酸异丙肾上腺素（Isoprenaline Hydrochloride,ISO）法。现将100只无特定病原体（Specific pathogen Free,SPF）SD大鼠依次编号,采用随机抽取号码的方式将SD大鼠分成正常对照组和实验组,每个分组各为50只。对实验组SD大鼠进行左侧中下腹部皮下注射ISO处理,正常对照组的SD大鼠进行左侧中下腹部皮下注射同等剂量的生理盐水,造模14天后处死动物模型,并取出心脏标本。采用混合酶消化的方法,提取新生SD大鼠原代心肌成纤维细胞,使用浓度为10%胎牛血清的培养基在37℃,5%CO2条件下培养。将所获得的心脏标本用磷酸盐缓冲溶液（Phosphate buffered saline solution,PBS）清洗后,放入通用型组织固定液后进行标本切片处理,行苏木精-伊红染色法（Hematoxylin-eosin staining,HE染色）、天狼星红染色和Masson染色。将制备好的标本切片进行免疫组织化学法,观察DNMT3B、RASSF1A和α-平滑肌肌动蛋白（Alpha-smooth muscle actin,α-SMA）的表达情况。构建DNMT3B小干扰RNA（si RNA）以及LncRNA Fendrr过表达质粒,通过瞬时转染的实验方法作用于原代心肌成纤维细胞。将相应处理过的原代心肌成纤维细胞使用通用细胞固定液处理后,通过免疫荧光技术检测DNMT3B、RASSF1A的表达情况。通过5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-bromodeoxyuridine,Brd U）实验、Cell Counting Kit-8（CCK-8）实验和噻唑蓝（MTT）实验检测心肌成纤维细胞增殖活性。通过定量反转录聚合酶连锁反应（quantificational rt-PCR,q RT-PCR）检测LncRNA Fendrr、DNMT3、RASSF1A以及I型胶原（Collagen I,Col1A1）的m RNA的表达情况。提取组织以及原代心肌成纤维细胞蛋白,采用Western blotting方法观察DNMT3B、RASSF1A、α-SMA、Col1A1以及哺乳动物不育系20样激酶1（Mammalian sterile 20-like kinase 1,Mst1）的表达情况。结果心房颤动患者心脏组织中,LncRNA Fendrr的表达量明显低于窦性心律患者心脏组织,但是相对于窦性心律患者,心房颤动患者心脏组织中DNMT3B、α-SMA以及Col1A1的表达量明显增加,HE染色、天狼星红染色和Masson染色也表示心房颤动患者心肌组织混乱,组织中胶原蛋白明显变多。两组对照,经过ISO处理的实验组SD大鼠,DNMT3B、α-SMA以及Col1A1的表达量显着高于正常对照组的SD大鼠,HE染色、天狼星红染色和Masson染色也显示实验组SD大鼠心肌组织混乱,间质中表现出极为显着的胶原纤维增生。对比按照普通培养的原代心肌成纤维细胞,经转化生长因子-β1（Transforming growth factor-β1,TGF-β1）处理过后的原代心肌成纤维细胞增殖活性明显增加,LncRNA Fendrr表达量下降,DNMT3B、α-SMA以及Col1A1表达量上升。转染LncRNA Fendrr过表达质粒后的原代心肌成纤维细胞增殖活性明显降低,相对于转染空载质粒组以及正常组,DNMT3B、α-SMA以及Col1A1表达量下降。转染DNMT3B-si RNA后的原代心肌成纤维细胞,相对于阴性对照组以及正常组,α-SMA以及Col1A1表达量下降。5-氮杂-2-脱氧胞苷（5-Azad C）处理过的原代心肌成纤维细胞增殖活性明显降低,α-SMA以及Col1A1表达量下降,转染DNMT3B-si RNA后的原代心肌成纤维细胞,相对于阴性对照组以及正常组,RASSF1A表达量显着增加,5-Azad C处理过的原代心肌成纤维细胞,RASSF1A表达量显着增加。心房颤动患者心脏组织中,RASSF1A的表达量明显低于窦性心律患者心脏组织,Mst1的表达量明显高于窦性心律患者心脏组织,经过ISO处理的实验组SD大鼠,RASSF1A的表达量明显低于正常对照组SD大鼠心脏组织,Mst1的表达量明显高于正常对照组SD大鼠心脏组织,经过TGF-β1作用以后的原代心肌成纤维细胞,RASSF1A的表达量明显低于正常对照组的原代心肌成纤维细胞,Mst1的表达量明显高于正常对照组的原代心肌成纤维细胞,转染RASSF1A-si RNA处理后的原代心肌成纤维细胞,Mst1的表达量相比正常组和阴性对照组明显增加,细胞增殖活性明显增强,α-SMA以及Col1A1表达量增加。结论综上所述,本研究为LncRNA Fendrr通过干扰DNMT3B从而影响了RASSF1A甲基化进而对心肌成纤维细胞增殖活化以及心肌纤维化产生调控作用的机制提供了新思路。LncRNA Fendrr可以作为调控心肌纤维化的一个重要靶点。由此可以推测,重新恢复RASSF1A的表观遗传控制可能是治疗心肌纤维化的潜在治疗方法,其靶向调控剂可作为阻断心肌纤维化发展的有效临床药物。
盛楠[5]（2021）在《全自动血细胞仪定量检测红细胞凝集方法及自身免疫病检出抗红细胞抗体初探》文中研究表明背景:红细胞凝集反应可以使红细胞与红细胞之间的间距发生变化,这种变化可以被流式细胞仪准确的定性和定量,根据这一原理,我们试图采用血细胞分析仪对红细胞凝集程度进行定性和定量分析。流式细胞仪可以对细胞进行自动化的识别,并进行分选。当红细胞发生凝集时,细胞体积变大,在流式细胞仪上则表现为细胞事件数的下降;全自动血细胞分析仪,该设备操作规范、标准并且简便,结果直观稳定,当红细胞发生凝集时,数个小的红细胞团会聚集成为一个大的红细胞团,该现象在全自动血细胞分析仪上将通过红细胞的计数值下降得到直观的体现。在本实验中,可以通过流式细胞仪对红细胞凝集的情况进行定性、定量;红细胞凝集的程度可以通过全自动血细胞分析仪得到更进一步的定量检测。在健康情况下和患有免疫力疾病时红细胞凝集程度的差异可以通过抗红细胞抗体得以体现。本实验通过收集抗核抗体（ANA）阳性患者标本,建立运用全自动血细胞分析仪对ANA阳性标本进行定量检测红细胞凝集情况的方法学,定量检测患者标本的抗红细胞抗体凝集情况,为临床打开新的研究思路。方法:1.分别将A型、B型两种血型的红细胞与B型、A型两种血型的血清进行凝集实验,作用条件是固定红细胞浓度,对血清进行倍比稀释,在37℃下温浴30分钟得以建立起恒温条件。2.分别用A型、B型两种血型的红细胞与B型、A型两种血型的血清在37℃下温浴30分钟,记录肉眼观察在玻璃片上的凝集程度,然后通过全自动血细胞分析仪进行逐个测定,保证每一管样本上样前已经混匀。3.建立凝集指数AGI,AGI=检测组RBC计数/对照组RBC计数。（结果保留两位小数）。通过与原倍血清下的凝集反应进行对比得到AGI值,采用AGI值进一步解释ANA阳性的患者血液标本中的抗红细胞抗体的凝集情况,进一步证明抗红细胞抗体在自身免疫性疾病的临床应用价值。4.收集ANA阳性的临床标本,分离血清-20℃冻存备用。制备0型抗凝全血作为指示细胞,与ANA阳性的血清标本在不同稀释度下,37℃温浴30分钟,逐个混匀后通过全自动血细胞分析仪上样测定,通过患病标本与健康标本在相似年龄、相同血型、相同反应条件的情况下对比实验,建立一个全新的检测凝集现象的方法学。结果:1.对红细胞凝集在流式细胞仪上的表现进行了观察,可以用于对红细胞凝集反应的测定,证明了在固定体积参数的情况下,流式细胞仪对于红细胞的凝集有一定的指示作用并初步建立了通过流式细胞仪检测红细胞凝集反应的新方法。2.通过在固定流式细胞仪体积参数时,ABS 3数值与红细胞稀释倍数呈线性关系,说明随着红细胞稀释倍数的增大,ABS 3数值随之增大,凝集程度随之减弱,对于红细胞的凝集可以做到定量检测,与传统的玻片法有高度的相关性。3.通过分别用健康人的体检标本、ANA阳性患者的血清与红细胞进行凝集反应,于全自动血细胞分析仪上可以得到定量的红细胞数值有规律的下降,证明ANA阳性的自身免疫疾病或疑似自身免疫疾病患者中存在低水平抗O型红细胞抗体。结论:1.通过流式细胞仪可以对红细胞凝集反应进行定性和定量检测。2.建立了利用全自动血细胞分析仪定量检测红细胞凝集程度的方法。3.利用全自动血细胞分析仪在自身免疫性疾病中发现抗红细胞抗体。
包腾飞[6]（2020）在《2019年池州市部分地区宠物犬皮肤病病因调查及治疗效果分析》文中提出皮肤病是宠物犬的一种常见多发病,其病因较为复杂,常与犬的生活环境、品种、年龄和饮食习惯有关。随着池州地区宠物犬饲养数量的不断增加,动物医院皮肤病患犬的就诊数也越来越多,犬皮肤病的治疗因而越来越受到宠物医师的重视。迄今为止,尚未见到池州地区宠物犬皮肤病病因及相关调查的文献报道。为更好地治疗宠物犬皮肤病,本研究从池州部分地区五家宠物医院收集了2019年共计4742例宠物犬的病例,其中皮肤病976例。针对976例皮肤病进行了病因及相关调查,选择典型病例采集病料,通过显微镜观察寻找病原体,并用阿莫西林克拉维酸钾、头孢氨苄、头孢维星钠和伊曲康唑、特比萘芬、酮康唑和多拉菌素、伊维菌素、蚍虫林莫昔克丁滴剂对犬细菌性、真菌性和寄生虫性皮肤病进行了临床治疗效果分析,通过对患犬的临床症状观察和实验室检查评价药物的疗效,从中筛选出治疗效果好的药物。结果如下:（1）池州部分地区宠物犬皮肤病感染率为20.58%（976/4742）。976例皮肤病病例中,细菌性、寄生虫性和真菌性皮肤病分别占31.97%（312/976）、28.38%（277/976）和23.87%（233/976）;混合性感染皮肤病和其他类型皮肤病分别占9.84%（96/976）、5.94%（58/976）,混合性感染主要有寄生虫性感染继发细菌感染,真菌性感染继发细菌感染和细菌、真菌、寄生虫混合感染三种类型。（2）性别方面,雄性犬皮肤病发病率高于雌性犬,雄性犬感染率为54.92%（536/976）,雌性犬感染率为45.08%（440/976）。（3）年龄方面,大多数皮肤病患犬年龄都小于5岁,其感染率高达81.87%（799/976）;1岁以内的幼犬皮肤病感染率较高,达22.03%（215/976）。（4）季节方面,皮肤病发病主要集中在夏、秋季节,其中7月份为发病最高峰,发病率为14.45%（141/976）。（5）通过药物临床治疗效果分析,发现注射用头孢维星钠、伊曲康唑和多拉菌素分别对细菌性、真菌性和寄生虫性皮肤病有较好的疗效。综上所述,池州部分地区宠物犬皮肤病主要为细菌性、寄生虫性和真菌性皮肤病三种;雄性犬发病率略高于雌性犬;犬发病年龄主要在5岁以内;夏秋两季是犬皮肤病的高发期;头孢维星钠、伊曲康唑和多拉菌素分别对细菌性、真菌性和寄生虫性皮肤病有较好的疗效。
陶安泰[7]（2020）在《超分辨显微技术中光激活荧光蛋白性质的测定及大肠杆菌趋化信号与运动行为的关联研究》文中研究表明为了探寻微观世界的奥秘,显微技术自16世纪发明以来,已经得到了巨大的发展。除了不断提升的分辨率之外,它们的种类和应用领域也越来越广泛。光学显微镜因其非直接接触、损伤小的特性,往往是生物样品观测的优先选择。近年来,各类荧光探针的发展为生物结构成像提供了丰富的选择与方法。其中,光可控的荧光蛋白与染料分子也使远场光学显微技术得以突破光学衍射极限,最为典型的就是光激活定位显微成像技术（photoactivated localization microscopy,PALM）与随机光学重构显微技术（stochastic optical reconstruction microscopy,STORM）。本文的研究工作基于常见的原核生物——大肠杆菌而进行,同时结合了荧光显微技术与其他实验手段。大肠杆菌具有繁殖快、培养简单、毒性较小等优势,是研究最为广泛的细菌之一。本文的第一章为绪论部分,较为详细地介绍了研究领域的背景与已取得的成果,并总结了研究工作的目标与意义。我们的研究对象主要包括大肠杆菌与光激活荧光蛋白（photoactivatable fluorescent proteins,PA-FPs）,在研究 PA-FPs 的过程中,我们使用了 PALM技术。因此,绪论中分别介绍了荧光蛋白和超分辨显微技术的起源与发展,以及大肠杆菌的生理、运动等特性。本文的第二章描述了研究工作中的基本实验方法。首先,我们对于常用的实验试剂进行了分类介绍,包括配制过程、用途与储存方法等等。随后,我们描述了大肠杆菌的常规培养与重组质粒的构建与转化过程,它们都属于实验前重要的准备工作。最后一部分描述了对于承载细菌样品的玻片的清洗过程。在本文第三章中,我们利用常见的一类光激活荧光蛋白——Dendra2标记了大肠杆菌的马达蛋白FliG和FliM。通过PALM实验,我们逐帧采集了 Dendra2融合蛋白在大肠杆菌体内的发光信号,并进行了一系列分析,得到了单分子Dendra2的发光时间轨迹。利用PA-FPs的光物理模型以及发光轨迹得到的特征时间分布,可以拟合得出模型中的各个特征参数。大肠杆菌体内与体外纯化的Dendra2光物理特性参数存在着明显差异,证实了不同的实验过程对于PA-FPs的影响。因此,精确测量特定PALM实验中PA-FPs的光物理性质十分必要,尤其是对于超分辨图像的重构与生物结构的定量分析。我们设计的一系列步骤与方法,也可以推广至其他PALM实验。本文第四章介绍了对于大肠杆菌趋化网络与运动行为的研究工作。由于较难长时间地观测细菌运动行为,之前对于大肠杆菌趋化网络的研究大多基于单个鞭毛马达而进行,缺乏从细胞质内的趋化信号到细菌整体运动行为的关联性探索。我们将双光镊、明场、及荧光显微镜装置结合在一起,实现了对于大肠杆菌运动行为的长时间观察。此外,我们还使用单体绿色荧光蛋白mEGFP标记了趋化响应调节蛋白CheY,并利用免疫印迹与冻干实验,标定出了菌体的荧光信号与细胞质中磷酸化的CheY（CheY-P）浓度的对应关系。我们分析并统计了多个单细菌的实验数据,直接描绘了从细胞质的CheY-P浓度到大肠杆菌整体运动行为特征参数的映射,并结合前人的研究成果进行了模型拟合。这一工作有助于从全局性的角度理解趋化网络,拟合得到的各类参数也可以利用于未来的计算建模。本文最后一章对全文的研究工作进行了总结,并对未来的工作进行了展望。
朱群艳[8]（2020）在《基于硅纳米结构提高SALDI-MS的解吸/电离效率》文中研究表明表面辅助激光解吸/电离质谱（surface-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry,SALDI-MS）是一种软电离技术,被广泛应用于小分子分析。该技术使用无机材料代替有机基质,降低了背景峰的干扰,提高了检测灵敏度。用于SALDI-MS基底的无机材料主要有:碳、硅、金属及金属氧化物,它们都具有较高的真空稳定性和良好的紫外吸光性能。其中,硅基微/纳材料具有独特的光学、电学以及表面化学性质,其合成工艺和材料加工技术先进、灵活,可以被制备出各种形态可控的结构,且其表面易于衍生化和功能化。基于这些优势,硅基SALDI-MS基底可提供丰富的表面形貌和可调的表面化学性质,在一定程度上提高了质谱分析的检测灵敏度、重复性、特异性,从而使质谱检测性能得到了改善。此外,基于硅的解吸/电离技术具有操作简单、分析快速、高检测重复性等优势而被广泛应用于各类分析物的检测。随着现代社会的飞速发展,痕量分析在各个领域发挥着越来越重要的作用。因此,提高SALDI-MS的解吸/电离效率是使该技术能广泛应用于各领域的关键。为了提高硅基SALDI-MS的解吸/电离效率,改善其检测性能,本论文结合多种微/纳构筑技术和表面功能化方法进行了如下研究工作:一、利用超疏水辅助富集的方法提高了 SALDI-MS的检测灵敏度。该方法利用具有独特光学性质的银纳米粒子和超疏水的氟化二氧化硅纳米粒子制备了银纳米粒子/超疏水涂层（silver nanoparticles/superhydrophobic coating,AgNPs/SHC）基底。该基底具有以下优势:（1）可提供良好的检测重复性,分析1 pmol/μL的罗丹明6G时,其信号强度的相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）≤ 9.4%;并且在1～50 fmol/μL的浓度范围内,浓度与其信号强度具有良好的线性相关性（R2>0.99）。（2）适用于检测各类微量分析物,包括氨基酸、脂肪酸、染料分子、多肽和聚合物。（3）此外,还可应用于分析湖水中的微量孔雀石绿和人血清中的缓激肽1-7。二、首次提出了一种通过改变纳米结构的倾斜角度调控结构中激光能量沉积的方法,用于提高SALDI-MS的解吸/电离效率。利用反应离子刻蚀技术制备了倾斜的硅纳米柱阵列（slant silicon nanopillar arrays,SSNA）结构,然后在硅表面无电沉积银纳米粒子制备了银纳米粒子/倾斜硅纳米柱阵列（silver nanoparticles/slant silicon nanopillar arrays,AgNPs/SSNA）。理论模拟结果表明,在硅结构表面修饰银纳米粒子和调控硅结构的倾斜角度,可以提高沉积在结构中的激光能量。对罗丹明6G进行SALDI-MS分析表明:（1）表面修饰银纳米粒子后,分析物的质谱信号强度提高了近5倍;（2）在0°～15°范围内,随着AgNPs/SSNA基底倾斜角度的增加,分析物的质谱信号强度逐渐升高。综上所述,利用在硅表面修饰银纳米粒子和调控纳米柱的倾斜角度的方法,可以提高硅纳米柱阵列中激光能量沉积,进而提高了硅基SALDI-MS的解吸/电离效率,该研究工作为提高SALDI-MS的检测性能提供了新的研究思路。三、结合自组装和反应离子刻蚀技术制备了形貌可控的有序硅纳米柱阵列,系统地研究了其表面形貌对SALDI-MS中离子解吸效率和内部能量转移的影响。研究结果表明:（1）增加基底的光吸收,能够促进内部能量转移和硅基底的表面重筑,从而提高离子解吸效率;（2）增加硅纳米柱阵列的表面空隙率会使基底的表面温度升高,从而促进离子解吸。该研究工作表明,硅基SALDI-MS基底具有足够的光吸收和高的表面空隙率对提高离子解吸效率至关重要。
周兴国[9]（2020）在《HIF-1抑制剂修饰的核壳结构纳米颗粒克服肿瘤辐射抗性》文中指出放射治疗能够不受穿透深度的限制而有效杀伤大多数实体肿瘤,因此被广泛应用于癌症治疗。然而,实体肿瘤的乏氧微环境以及高表达水平的乏氧诱导因子（HIF-1）导致了严重的辐射抵抗作用,大大制约了放疗效果。因此,有效缓解肿瘤内的乏氧水平,并降低HIF-1相关基因的表达能够显着提高肿瘤放疗敏感性,从而改善放疗疗效。为此,我们制备了一种核壳结构的新型纳米增敏剂——铜硒铂纳米颗粒（Cu2-xSe@PtSe,CSP）辅以功能化修饰的HIF-1α抑制剂——吖啶黄（ACF）,使之与放疗相结合展现出了优异的肿瘤抑制效果。本文基于氯铂酸与Cu2-xSe（CS）纳米颗粒之间的界面氧化还原作用,合成了 CSP纳米增敏剂,进而利用静电相互作用在其表面修饰ACF小分子。通过细胞周期实验结果分析,我们发现合成的CSP纳米增敏剂能够阻滞肿瘤细胞的细胞周期（即G2/M期）,从而增强肿瘤细胞的辐射敏感性。此外,CSP纳米增敏剂能够分解肿瘤细胞内生的过氧化氢分子,生成氧气来缓解乏氧状态,进而增加活性氧的产生,这两方面均导致了严重的DNA双链损伤和肿瘤细胞凋亡,最终明显抑制了肿瘤细胞的生长与增殖。与此同时,我们还研究发现CSP纳米颗粒表面的ACF小分子能够有效抑制肿瘤细胞表达的HIF-1α的功能。以上这些作用导致了肿瘤细胞血管内皮生长因子低表达,肿瘤内血管密度降低,肿瘤细胞增殖减少,凋亡增多,最终极大地协同增强了放疗疗效。本研究为开发新型纳米增敏剂以提高放疗疗效提供了思路和指导。
陈蕾[10]（2020）在《双驱动微马达的制备及其动力学研究》文中研究说明微马达是一种可以将周围环境中的能量转换为自身动能,从而实现自驱动运动的微米级胶体粒子。近年来,微马达的基础研究取得了巨大的进展,而且微马达在生物传感、药物输送、污水处理等领域展示出广泛的应用前景。但是,微马达的制备仍然存在诸多困难,例如工序复杂,设备昂贵和产量较低等。此外,现有的制备方法往往只能合成单一驱动方式的微马达,对于集多种驱动于一体的微马达制备方法依然缺乏。这些都极大地阻碍了微马达研究和应用的进一步发展,因此迫切需要发展新的合成技术实现简单有效的制备微马达。在本论文中,我们提出了一种简单高效的方法制备单分散的有机无机复合的双面神（Janus）微马达。首先,我们将去离子水和聚合物粒子（聚苯乙烯,PS）的良溶剂按照一定体积比进行混合,随后将聚合物粒子浸泡于该混合液中进行粒子的预处理。根据“相似相溶”的原理,聚合物粒子将会被溶剂软化。将软化后的聚合物粒子与过量活性无机纳米粒子（如AgCl、TiO2、ZnO、Fe2O3等）混合并进行旋转培养,使得聚合物粒子与活性无机粒子发生接触,在表面“润湿效应”的作用下,软化的聚合物粒子在无机粒子表面润湿导致无机粒子嵌入聚合物粒子,最后加入去离子水硬化聚合物粒子得到雪人状的Janus粒子。由于无机粒子的催化活性,赋予Janus粒子自驱动能力形成微马达。更重要的是,利用这种方法,通过将普通的聚合物粒子替换为磁性聚合物粒子（Fe3O4核-PS壳）,就可以结合磁响应和化学响应制备得到双驱动微马达。这种制备方法与其他方法相比有很多优势,包括制备过程简单,设备成本低,具有更多的材料选择性并且可以大批量制备。此外,我们还发展了另一种简单普适的方法来制备兼具磁响应和化学刺激响应的双驱动微马达。首先利用聚合物的良溶剂处理磁性PS粒子（PS核-Fe3O4壳）。利用相分离原理,以及表面能最小化原理,聚合物从磁壳中挤出形成鼓包,得到一端是PS,另一端是PS@Fe3O4的雪人状粒子。之后通过加入硅烷偶联剂进行反应,在Fe3O4纳米粒子表面修饰上-NH2官能团,再加入氯铂酸根据软硬酸碱规则和配合物稳定原理,铂离子与氨基形成配合物,最后通过还原铂离子从而得到Fe3O4/Pt复合的双驱动微马达。这种方法可以简单批量地生产双驱动微马达,且设备简单成本低。另外,在此基础上,利用第一份工作中提出的表面润湿粒子的方法,继续处理这种双驱动微马达,可以得到多种外源驱动的微马达。
二、高效、快速清洗盖玻片法（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、高效、快速清洗盖玻片法（论文提纲范文）
（1）异源表达细菌素BMP32r杀菌和抑制生物膜作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 细菌素概述 |
| 1.2.1 细菌素的定义 |
| 1.2.2 细菌素的来源 |
| 1.2.3 细菌素的分类 |
| 1.3 细菌素的纯化 |
| 1.3.1 样品粗提 |
| 1.3.2 色谱纯化 |
| 1.4 细菌素的异源表达 |
| 1.4.1 大肠杆菌表达系统 |
| 1.4.2 乳酸菌表达系统 |
| 1.4.3 酵母表达系统 |
| 1.5 细菌素的作用机制 |
| 1.5.1 作用于细胞表面 |
| 1.5.2 作用于细胞内部 |
| 1.6 生物膜概述 |
| 1.6.1 生物膜的定义 |
| 1.6.2 生物膜的形成过程 |
| 1.6.3 生物膜的耐药性 |
| 1.6.4 生物膜与群体感应 |
| 1.7 抑制生物膜的策略 |
| 1.8 细菌素对生物膜的抑制 |
| 1.9 细菌素的应用 |
| 1.9.1 食品领域中的应用 |
| 1.9.2 医药领域中的应用 |
| 1.10 研究目的和意义 |
| 1.11 研究内容 |
| 1.12 技术路线 |
| 第二章 细菌素BMP32原核和真核表达系统的构建 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 菌株和质粒 |
| 2.1.2 主要试剂和培养基 |
| 2.1.3 主要仪器及设备 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 细菌素BMP32大肠杆菌表达系统的构建 |
| 2.2.2 细菌素BMP32毕赤酵母表达系统的构建 |
| 2.3 试验结果 |
| 2.3.1 细菌素BMP32在大肠杆菌体系中的表达 |
| 2.3.2 细菌素BMP32在毕赤酵母体系中的表达 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 细菌素BMP32r的纯化及理化性质研究 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 菌株和质粒 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要仪器及设备 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 细菌素标签设计及菌株构建 |
| 3.2.2 细菌素BMP32r的纯化及鉴定 |
| 3.2.3 细菌素BMP32r的生信分析 |
| 3.2.4 细菌素BMP32r的最小抑菌浓度(MIC) |
| 3.2.5 细菌素BMP32r的稳定性 |
| 3.2.6 细菌素BMP32r的溶血活性 |
| 3.3 试验结果 |
| 3.3.1 菌株构建 |
| 3.3.2 纯化及鉴定 |
| 3.3.3 细菌素BMP32r的生信分析 |
| 3.3.4 细菌素BMP32r的最小抑菌浓度 |
| 3.3.5 细菌素BMP32r的稳定性 |
| 3.3.6 细菌素BMP32r的溶血活性 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 细菌素BMP32r的抑菌活性及机制研究 |
| 4.1 材料 |
| 4.1.1 菌株 |
| 4.1.2 主要试剂 |
| 4.1.3 主要仪器及设备 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.2.1 细菌素BMP32r的抑菌谱 |
| 4.2.2 生长曲线的测定 |
| 4.2.3 杀菌曲线的测定 |
| 4.2.4 扫描电镜 |
| 4.2.5 透射电镜 |
| 4.2.6 碘化丙啶(PI)吸收 |
| 4.2.7 乳酸脱氢酶(LDH)释放 |
| 4.3 试验结果 |
| 4.3.1 抑菌谱 |
| 4.3.2 生长曲线 |
| 4.3.3 杀菌曲线 |
| 4.3.4 指示菌表面微观结构 |
| 4.3.5 指示菌内部微观结构 |
| 4.3.6 碘化丙啶(PI)吸收 |
| 4.3.7 乳酸脱氢酶(LDH)释放 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 细菌素BMP32r对单增李斯特菌生物膜抑制作用研究 |
| 5.1 材料 |
| 5.1.1 菌株 |
| 5.1.2 主要试剂和溶剂 |
| 5.1.3 主要仪器及设备 |
| 5.2 试验方法 |
| 5.2.1 最小抑菌浓度的测定 |
| 5.2.2 生长曲线测定 |
| 5.2.3 杀菌曲线测定 |
| 5.2.4 结晶紫法测定生物膜形成量 |
| 5.2.5 气液表面生物膜的测定 |
| 5.2.6 生物膜内菌代谢活力的测定 |
| 5.2.7 生物膜内活菌数目的测定 |
| 5.2.8 泳动分析 |
| 5.2.9 生物膜胞外多糖的测定 |
| 5.2.10 扫描电镜 |
| 5.2.11 实时定量PCR |
| 5.2.12 顽固菌的测定 |
| 5.3 试验结果 |
| 5.3.1 亚抑菌浓度的选择 |
| 5.3.2 细菌素BMP32r对浮游菌的影响 |
| 5.3.3 细菌素BMP32r对生物膜的形成的影响 |
| 5.3.4 细菌素BMP32r对成熟的生物膜的影响 |
| 5.3.5 细菌素BMP32r对顽固菌的影响 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 本章小结 |
| 第六章 细菌素BMP32r对混合生物膜抑制作用研究 |
| 6.1 材料 |
| 6.1.1 菌株 |
| 6.1.2 主要试剂 |
| 6.1.3 主要仪器及设备 |
| 6.2 试验方法 |
| 6.2.1 混合生物膜的形成 |
| 6.2.2 混合生物膜内菌的代谢活力 |
| 6.2.3 细菌素BMP32r对混合生物膜的影响 |
| 6.2.4 细菌素BMP32r对混合生物膜内活菌数目的影响 |
| 6.2.5 混合生物膜银染观测 |
| 6.2.6 细菌素BMP32r对成熟混合生物膜的影响 |
| 6.3 试验结果 |
| 6.3.1 混合生物膜的形成规律 |
| 6.3.2 混合生物膜内菌的代谢活力 |
| 6.3.3 细菌素BMP32r对混合生物膜的影响 |
| 6.3.4 细菌素BMP32r对混合生物膜内菌数目的影响 |
| 6.3.5 混合生物膜的银染观测 |
| 6.3.6 细菌素BMP32r对成熟混合生物膜的影响 |
| 6.4 讨论 |
| 6.5 本章小结 |
| 第七章 细菌素BMP32r在食品及医药方面的应用 |
| 7.1 材料 |
| 7.1.1 菌株、细胞和小鼠 |
| 7.1.2 主要试剂、溶剂和耗材 |
| 7.1.3 主要仪器及设备 |
| 7.2 试验方法 |
| 7.2.1 细菌素BMP32r对牛奶中单增李斯特菌的影响 |
| 7.2.2 细菌素BMP32r对牛奶中单增李斯特菌生物膜的影响 |
| 7.2.3 细菌素BMP32r对小鼠皮肤伤口耐药菌感染的影响 |
| 7.3 试验结果 |
| 7.3.1 细菌素BMP32r杀死牛奶中单增李斯特菌 |
| 7.3.2 细菌素BMP32r抑制牛奶中单增李斯特菌生物膜的形成 |
| 7.3.3 细菌素BMP32r用于治疗小鼠皮肤伤口耐药菌感染 |
| 7.4 讨论 |
| 7.5 本章小结 |
| 第八章 结论、创新点和展望 |
| 8.1 结论 |
| 8.2 创新点 |
| 8.3 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（2）NaOH/尿素体系下高活性纤维素酶的构建及其回收性能的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 纤维素酶概述 |
| 1.1.1 纤维素酶组成 |
| 1.1.2 纤维素酶的作用机理 |
| 1.1.3 影响纤维素酶活的因素 |
| 1.2 酶的回收及再利用 |
| 1.2.1 高聚物/盐溶液体系中双水相浊点萃取分离 |
| 1.2.2 超滤膜法分离技术 |
| 1.2.3 酶的固定化 |
| 1.3 课题的意义与研究内容 |
| 1.3.1 课题的意义 |
| 1.3.2 课题研究内容 |
| 2 NaOH/尿素体系下活性最佳修饰纤维素酶及反应条件研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 实验试剂与仪器 |
| 2.2.2 葡萄糖标准曲线的绘制 |
| 2.2.3 修饰纤维素酶的制备 |
| 2.2.4 修饰纤维素酶表征 |
| 2.2.5 微晶纤维素的酶解 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 温度对酶解效果的影响 |
| 2.3.2 修饰酶种类和反应条件筛选 |
| 2.3.3 修饰纤维素酶结构对活性的影响 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 NaOH/尿素体系下双水相浊点萃取法回收修饰纤维素酶 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 实验试剂与仪器 |
| 3.2.2 修饰纤维素酶的回收 |
| 3.2.3 纤维素酶的回收率及酶活的测定 |
| 3.2.4 回收的纤维素酶酶活的测定 |
| 3.2.5 回收修饰纤维素酶表征 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 聚乙二醇及右旋糖酐的浊点萃取条件确定 |
| 3.3.2 回收修饰酶的活性 |
| 3.3.3 回收修饰纤维素酶表征 |
| 3.4 本章小结 |
| 4 NaOH/尿素体系下超滤法回收酶以及数学模型的研究 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 实验试剂与仪器 |
| 4.2.2 实验方案设计 |
| 4.2.3 膜通量的测定方法 |
| 4.2.4 回收修饰纤维素酶表征 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 剩余还原糖含量对酶活影响 |
| 4.3.2 修饰酶的重复使用性 |
| 4.3.3 操作压力对超滤效果的影响 |
| 4.3.4 进料浓度对超滤效果的影响 |
| 4.3.5 温度对超滤效果的影响 |
| 4.3.6 超滤模型确定 |
| 4.3.7 模型求解 |
| 4.3.8 超滤模型验证 |
| 4.4 本章小结 |
| 5 NaOH/尿素体系下固定化酶的研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.1 实验试剂与仪器 |
| 5.2.2 固定化载体处理 |
| 5.2.3 最优固定化载体及酶解条件选择 |
| 5.2.4 基于相关分析研究固定化酶微环境与酶活性的关系 |
| 5.2.5 固定化载体表征 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 不同固定化时间对纤维素酶活性的影响 |
| 5.3.2 不同固定化温度对纤维素酶固定化效果的影响 |
| 5.3.3 不同固定化纤维素酶量对酶解效率的影响 |
| 5.3.4 不同酶解底物浓度对固定化纤维素酶酶解效果的影响 |
| 5.3.5 不同载体对固定化纤维素酶酶解效果的影响 |
| 5.3.6 重复使用次数对固定化纤维素酶酶活的影响 |
| 5.3.7 载体材料的表征 |
| 5.4 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 |
（3）26S蛋白酶体膜定位的机制及功能研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 1 引言 |
| 1.1 泛素-蛋白酶体系统概述 |
| 1.1.1 泛素化修饰 |
| 1.1.2 蛋白酶体的结构和组成 |
| 1.1.3 蛋白酶体的组装 |
| 1.1.4 蛋白酶体的功能 |
| 1.2 蛋白酶体的调控 |
| 1.2.1 蛋白酶体基因表达的调控 |
| 1.2.2 蛋白酶体的修饰 |
| 1.2.3 蛋白酶体的定位 |
| 1.3 蛋白酶体的肉豆蔻酰化修饰和膜定位 |
| 1.3.1 肉豆蔻酰化修饰过程 |
| 1.3.2 蛋白酶体亚基Rpt2 的肉豆蔻酰化 |
| 2 实验材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 细胞 |
| 2.1.2 小鼠 |
| 2.1.3 质粒 |
| 2.1.4 sgRNA、shRNA、qPCR与 PCR引物序列 |
| 2.1.5 抗体 |
| 2.1.6 主要试剂耗材 |
| 2.1.7 主要仪器 |
| 2.1.8 常用试剂配方 |
| 2.2 实验步骤和方法 |
| 2.2.1 细胞生物学实验方法 |
| 2.2.1.1 细胞培养 |
| 2.2.1.2 细胞的冻存及复苏 |
| 2.2.1.3 细胞转染 |
| 2.2.1.4 病毒侵染 |
| 2.2.1.5 免疫荧光 |
| 2.2.1.6 胶体金免疫电镜 |
| 2.2.1.7 蔗糖密度梯度离心 |
| 2.2.1.8 细胞组分分离 |
| 2.2.1.9 细胞存活率分析 |
| 2.2.2 动物实验 |
| 2.2.2.1 小鼠组织样品制备 |
| 2.2.2.2 大鼠大脑皮层样品的制备 |
| 2.2.3 分子生物学实验方法 |
| 2.2.3.1 质粒构建 |
| 2.2.3.2 CRISPR/Cas9 技术介导的基因编辑 |
| 2.2.3.3RNA提取 |
| 2.2.3.4RNA逆转录 |
| 2.2.3.5 实时荧光定量PCR |
| 2.2.3.6 基因组DNA提取 |
| 2.2.4 生物化学实验方法 |
| 2.2.4.1 免疫印迹 |
| 2.2.4.2 免疫沉淀(immunoprecipitation,IP) |
| 2.2.4.3 蛋白酶体的纯化(亲和纯化) |
| 2.2.4.4 蛋白酶体活性检测 |
| 2.2.4.5 蛋白纯化 |
| 2.2.4.6 点击化学(click chemistry) |
| 2.2.4.7 定量质谱 |
| 2.2.5 数据分析 |
| 3 蛋白酶体亚基Rpt2 的肉豆蔻酰化修饰 |
| 3.1 蛋白酶体定位于多种细胞膜结构 |
| 3.2 Rpt2 肉豆蔻酰化的检测 |
| 3.3 Rpt2 的肉豆蔻酰化水平存在动态变化 |
| 3.4 组装完整的蛋白酶体中含有肉豆蔻酰化Rpt2 |
| 4 Rpt2 的肉豆蔻酰化修饰介导蛋白酶体膜定位 |
| 4.1 Rpt2 的膜定位依赖其肉豆蔻酰化修饰 |
| 4.2 用CRISPR/Cas9 方法制备Rpt2-G2A敲入细胞 |
| 4.3 G2A突变抑制蛋白酶体的膜定位 |
| 5 膜定位蛋白酶体的生物学功能 |
| 5.1 Rpt2~(G2A/G2A)纯合敲入在小鼠中胚胎致死 |
| 5.2 G2A突变不影响蛋白酶体整体活性和细胞增殖 |
| 5.3 MEFs中的定量蛋白质组学 |
| 5.4 人源细胞中的蛋白质组学研究 |
| 6 膜定位蛋白酶体的酪氨酸磷酸化调控 |
| 7 讨论 |
| 7.1 肉豆蔻酰化是介导蛋白酶体膜定位的一种普遍机制 |
| 7.2 肉豆蔻酰化Rpt2 的比例与蛋白酶体膜定位的关系 |
| 7.3 蛋白酶体膜定位的调控 |
| 7.4 膜定位蛋白酶体的细胞功能 |
| 7.5 膜定位蛋白酶体的在胚胎发育中的意义 |
| 7.6 蛋白酶体酪氨酸磷酸化 |
| 参考文献 |
| 附表 |
| 作者简介 |
| 答辩决议书 |
（4）LncRNA Fendrr调控心肌成纤维细胞活化增殖的机制研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表(Abbreviation) |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法及分组 |
| 2.3 统计学处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 心房颤动患者心脏组织中LncRNA Fendrr、DNMT3B、Col1A1 和α-SMA表达量的变化以及病理学变化 |
| 3.2 SD大鼠心肌纤维化心脏组织中LncRNA Fendrr、DNMT3B、Col1A1 和α-SMA表达量的变化以及病理学变化 |
| 3.3 TGF-β1 作用后原代心肌成纤维细胞增殖能力以及LncRNA Fendrr、DNMT3B、Col1A1 和α-SMA表达量的变化 |
| 3.4 瞬时转染LncRNA Fendrr过表达质粒后原代心肌成纤维细胞增殖能力以及LncRNA Fendrr、DNMT3B、Col1A1 和α-SMA表达量的变化 |
| 3.5 抑制DNA甲基化转移酶后,原代心肌成纤维细胞增殖能力以及Col1A1、α-SMA和 RASSF1A表达量的变化 |
| 3.6 心肌纤维化模型中RASSF1A和Mst1的表达情况以及瞬时转染RASSF1A-si RNA以后原代心肌成纤维细胞中Col1A1、α-SMA和增殖活性的改变 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 LncRNAs 在心肌纤维化中的作用 |
| 参考文献 |
（5）全自动血细胞仪定量检测红细胞凝集方法及自身免疫病检出抗红细胞抗体初探（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一章 红细胞凝集在流式细胞仪上的表现 |
| 材料和方法 |
| 1.材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 标本来源 |
| 2.方法 |
| 2.1 固定流式细胞仪的加样数量参数测定红细胞凝集实验 |
| 2.1.1 指示细胞的制备 |
| 2.1.2 稀释红细胞 |
| 2.1.3 设置血清稀释组 |
| 2.1.4 过滤样本 |
| 2.1.5 样本温浴 |
| 2.1.6 用流式细胞仪上样 |
| 2.1.7 结果判定 |
| 2.2 固定流式细胞仪的加样体积参数检测红细胞凝集实验 |
| 2.2.1 指示细胞的制备 |
| 2.2.2 稀释红细胞 |
| 2.2.3 设置血清稀释组 |
| 2.2.4 过滤样本 |
| 2.2.5 样本温浴 |
| 2.2.6 用流式细胞仪上样 |
| 2.2.7 结果判定 |
| 结果 |
| 1.固定加样数量参数下的原倍组与空白组红细胞凝集在流式细胞仪上的结果 |
| 2.固定加样数量参数下的原倍组与512倍稀释组红细胞凝集在流式细胞仪上的结果 |
| 3.固定加样体积参数下的原倍组与空白组红细胞凝集在流式细胞仪上的结果 |
| 4.固定加样体积参数下的原倍组与512倍稀释组红细胞凝集在流式细胞仪上的结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 红细胞凝集在流式细胞仪上的定量分析 |
| 材料和方法 |
| 1.材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 标本来源 |
| 2.方法 |
| 2.1 固定流式细胞仪的加样体积参数测定红细胞凝集实验 |
| 2.1.1 指示细胞的制备 |
| 2.1.2 稀释红细胞 |
| 2.1.3 设置稀释组 |
| 2.1.4 过滤样本 |
| 2.1.5 样本温浴 |
| 2.1.6 用流式细胞仪上样 |
| 2.1.7 结果分析 |
| 2.2 优化实验 |
| 2.2.1 固定红细胞体积 |
| 2.2.2 固定血清浓度 |
| 2.2.3 流式细胞仪上机检测 |
| 2.2.4 结果判定 |
| 结果 |
| 1.固定加样体积参数下的原倍组、512倍稀释组与空白组红细胞凝集在流式细胞仪上的结果 |
| 2.优化实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 基于全自动血细胞分析仪对红细胞凝集进行定量检测 |
| 材料和方法 |
| 1.材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 标本来源 |
| 2.方法 |
| 2.1 全自动血细胞分析仪检测红细胞凝集的原理 |
| 2.2 临床红细胞倍比稀释实验 |
| 2.3 全自动血细胞分析仪对红细胞凝集检测方法的建立 |
| 2.4 数据分析 |
| 2.5 玻片法检测红细胞凝集 |
| 2.5.1 5%A型红细胞悬液的制备 |
| 2.5.2 血清稀释及孵育 |
| 2.5.3 结果判定 |
| 2.6 统计学分析 |
| 结果 |
| 1.临床红细胞倍比稀释实验的线性关系 |
| 2.红细胞凝集强度在全自动血细胞分析仪检测与玻片法高度相关 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 基于全自动血细胞分析仪检测抗红细胞抗体的临床意义 |
| 材料和方法 |
| 1.材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 临床标本来源 |
| 2.方法 |
| 2.1 指示细胞的制备 |
| 2.2 实验方法检测值的线性观察 |
| 2.3 实验稳定性观察 |
| 2.4 ANA阳性标本(患病组)与健康标本(对照组)的检测 |
| 2.5 间接免疫荧光法检测抗核抗体 |
| 2.6 统计学方法 |
| 结果 |
| 1.AGI与血清抗体浓度呈良好的线性关系 |
| 2.全自动血细胞分析仪稳定性实验 |
| 3.患病组与对照组血清与O型红细胞凝集结果 |
| 4.用间接免疫荧光法检测抗核抗体 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 工作展望 |
| 综述 自身免疫性疾病患者自身抗体研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 ANA阳性患者标本信息 |
| 附录 中英文对照表 |
| 附录 作者简介 |
| 附录 攻读学位期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（6）2019年池州市部分地区宠物犬皮肤病病因调查及治疗效果分析（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词列表 |
| 文献综述 |
| 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 调查对象和动物 |
| 1.1.2 器材 |
| 1.1.3 治疗药物 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 调查方法 |
| 1.2.2 病原检查 |
| 1.2.2.1 犬细菌性皮肤病的病原菌分离培养及鉴别 |
| 1.2.2.2 犬真菌性皮肤病的病原菌分离培养及鉴别 |
| 1.2.2.3 犬寄生虫性皮肤病的病原分离及鉴别 |
| 1.2.3 犬常见皮肤病的药物治疗 |
| 1.3 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 池州部分地区犬皮肤病流行病学调查结果 |
| 2.1.1 犬几种常见皮肤病的感染率 |
| 2.1.2 患犬皮肤病与性别的关系 |
| 2.1.3 患犬皮肤病与犬种的关系 |
| 2.1.3.1 不同品种犬细菌性皮肤病统计结果 |
| 2.1.3.2 不同品种犬真菌性皮肤病统计结果 |
| 2.1.3.3 不同品种犬寄生虫性皮肤病统计结果 |
| 2.1.3.4 不同品种犬混合性感染皮肤病统计结果 |
| 2.1.3.5 不同品种犬其他类皮肤病统计结果 |
| 2.1.4 患犬皮肤病与年龄的关系 |
| 2.1.5 患犬皮肤病与季节的关系 |
| 2.1.6 患犬发病部位统计结果 |
| 2.2 犬细菌性皮肤病的病原菌分离培养及鉴别结果 |
| 2.3 犬真菌性皮肤病的病原菌分离培养及鉴别结果 |
| 2.4 犬寄生虫性皮肤病的病原分离及鉴别结果 |
| 2.5 池州部分地区犬皮肤病药物治疗结果 |
| 2.5.1 不同药物治疗犬细菌性皮肤病的疗效观察 |
| 2.5.2 不同药物治疗犬真菌性皮肤病的疗效观察 |
| 2.5.3 不同药物治疗犬寄生虫性皮肤病的疗效观察 |
| 2.6 犬常见皮肤病的跟踪治疗 |
| 2.6.1 细菌性皮肤病病例 |
| 2.6.2 真菌与细菌混合性感染皮肤病病例 |
| 2.6.3 蠕形螨和细菌性感染皮肤病病例 |
| 3 讨论 |
| 3.1 犬皮肤病的流行病学分析 |
| 3.2 犬皮肤病样本病原菌的分离鉴别 |
| 3.3 犬皮肤病不同药物的治疗分析 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 作者简介 |
（7）超分辨显微技术中光激活荧光蛋白性质的测定及大肠杆菌趋化信号与运动行为的关联研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 荧光蛋白 |
| 1.1.1 荧光蛋白的发展综述 |
| 1.1.2 绿色荧光蛋白 |
| 1.1.3 光激活荧光蛋白 |
| 1.2 超分辨光学显微成像 |
| 1.2.1 光学衍射极限 |
| 1.2.2 近场超分辨光学成像技术 |
| 1.2.3 远场超分辨光学成像技术 |
| 1.3 大肠杆菌 |
| 1.3.1 大肠杆菌的形态与结构 |
| 1.3.2 大肠杆菌的运动行为 |
| 1.3.3 大肠杆菌的鞭毛马达 |
| 1.3.4 大肠杆菌的趋化网络 |
| 1.3.5 大肠杆菌的生长周期 |
| 1.4 研究内容与意义 |
| 第2章 基本实验方法 |
| 2.1 实验试剂的配制 |
| 2.1.1 大肠杆菌培养媒介 |
| 2.1.2 抗生素溶液 |
| 2.1.3 细菌缓冲液 |
| 2.1.4 其他试剂 |
| 2.2 大肠杆菌的常规培养 |
| 2.3 包含目的基因的质粒转化 |
| 2.3.1 聚合酶链式反应 |
| 2.3.2 质粒载体的构建 |
| 2.3.3 感受态细胞的制备 |
| 2.3.4 重组质粒的热激法转化 |
| 2.4 玻片的清洁 |
| 第3章 PALM实验中对于PA-FPs光物理性质的测定 |
| 3.1 实验背景与意义 |
| 3.2 实验菌株与重组质粒 |
| 3.3 实验过程描述 |
| 3.3.1 细菌的培养与固定 |
| 3.3.2 样品制备 |
| 3.3.3 实验装置和数据采集 |
| 3.4 数据分析与实验结果 |
| 3.4.1 PALM数据的初步定位分析 |
| 3.4.2 N-STORM的分辨率估计 |
| 3.4.3 大肠杆菌体内自发荧光的特性分析 |
| 3.4.4 大肠杆菌体内Dendra2的单分子发光轨迹分析 |
| 3.4.5 PA-FPs发光模型的建立 |
| 3.4.6 大肠杆菌体内Dendra2分子的光物理性质分析 |
| 3.5 自发荧光干扰的模拟 |
| 3.6 工作总结 |
| 第4章 大肠杆菌内部趋化信使蛋白CheY-P浓度与整体运动行为的关联研究 |
| 4.1 实验背景与意义 |
| 4.2 实验菌株与重组质粒 |
| 4.3 实验过程描述 |
| 4.3.1 实验装置 |
| 4.3.2 细菌培养与处理 |
| 4.3.3 实验数据采集 |
| 4.4 补充实验及数据分析结果 |
| 4.4.1 免疫印迹实验 |
| 4.4.2 冻干实验 |
| 4.4.3 细菌荧光浓度分析 |
| 4.4.4 载体选择原则 |
| 4.4.5 大肠杆菌运动行为的初步分析 |
| 4.4.6 荧光标记鞭毛实验 |
| 4.4.7 实验结果描述 |
| 4.5 实验结果的理论模型拟合与随机模拟 |
| 4.5.1 鞭毛马达的随机双稳态模型 |
| 4.5.2 实验结果的veto模型拟合 |
| 4.5.3 实验结果的voting模型拟合与随机模拟 |
| 4.6 工作总结 |
| 第5章 总结与展望 |
| 5.1 研究总结与意义 |
| 5.2 未来工作的展望 |
| 5.2.1 PA-FPs在单分子定量实验中的应用 |
| 5.2.2 自然状态下的大肠杆菌运动行为研究 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 |
（8）基于硅纳米结构提高SALDI-MS的解吸/电离效率（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 SALDI-MS发展及应用 |
| 1.2.1 SALDI-MS概况 |
| 1.2.2 金属材料在SALDI-MS中的应用 |
| 1.2.3 金属氧化物材料在SALDI-MS中的应用 |
| 1.2.4 碳材料在SALDI-MS中的应用 |
| 1.2.5 硅材料在SALDI-MS中的应用 |
| 1.2.6 其它无机材料在SALDI-MS中的应用 |
| 1.3 硅基SALDI-MS基底的制备及功能化 |
| 1.3.1 硅基SALDI-MS基底的制备方法 |
| 1.3.2 表面功能化方法 |
| 1.4 硅基SALDI-MS的解吸/电离机理 |
| 1.4.1 基底物理性质的影响 |
| 1.4.2 功能化表面的影响 |
| 1.4.3 其它相互作用的影响 |
| 1.5 本文的研究思路及主要内容 |
| 第二章 制备银纳米粒子/超疏水涂层基底提高SALDI-MS的检测灵敏度 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 试剂与仪器 |
| 2.2.2 AgNPs的合成 |
| 2.2.3 二氧化硅纳米粒子的合成 |
| 2.2.4 AgNPs/SHC基底的制备 |
| 2.2.5 样品制备 |
| 2.2.6 SALDI-MS分析 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 AgNPs/SHC基底的制备与表征 |
| 2.3.2 优化AgNPs密度 |
| 2.3.3 基底的疏水性和AgNPs的作用 |
| 2.3.4 SALDI-MS检测性能评估 |
| 2.3.5 SALDI-MS分析 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 制备银纳米粒子/倾斜硅纳米柱阵列提高SALDI-MS解吸/电离效率 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 试剂与仪器 |
| 3.2.2 FDTD理论模拟 |
| 3.2.3 制备SSNA基底 |
| 3.2.4 制备AgNPs/SSNA基底 |
| 3.2.5 样品制备与SALDI-MS测试 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 AgNPs/SSNA基底的制备与表征 |
| 3.3.2 纳米柱长度对电场和吸光率的影响 |
| 3.3.3 纳米柱倾斜角度对吸光率和电场的影响 |
| 3.3.4 纳米柱倾斜角度对AgNPs/SSNA基底解吸/电离效率的影响 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 基于硅纳米柱阵列探究表面形貌对离子解吸效率的影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验与理论方法部分 |
| 4.2.1 材料试剂与仪器 |
| 4.2.2 制备硅NANPs基底 |
| 4.2.3 样品的制备 |
| 4.2.4 SALDI-MS分析 |
| 4.2.5 离子解吸效率和内部能量转移的计算 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 NAPAs基底的制备与表征 |
| 4.3.2 SALDI-MS分析 |
| 4.3.3 硅NAPAs基底上的离子解吸和内部能量转移 |
| 4.3.4 表面形貌对激光解吸/电离的影响 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 结论与展望 |
| 5.1 利用银纳米粒子/超疏水涂层基底提髙SALDI-MS的检测灵敏度 |
| 5.2 利用银纳米粒子/倾斜硅纳米柱阵列提髙SALDI-MS解吸/电离效率 |
| 5.3 利用硅纳米柱阵列探宄表面形貌对离子解吸效率的影响 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间的科研成果 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（9）HIF-1抑制剂修饰的核壳结构纳米颗粒克服肿瘤辐射抗性（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1 前言 |
| 2 纳米材料在放疗中的应用 |
| 2.1 利用含高原子序数元素的纳米材料,提升肿瘤放射敏感性 |
| 2.2 利用纳米材料的产氧能力,改善肿瘤乏氧环境 |
| 2.3 通过细胞周期阻滞,提高肿瘤放疗敏感性 |
| 2.4 通过小分子药物抑制信号通路,调节肿瘤生长 |
| 3 本研究的设计思路与依据 |
| 第二章 CSP纳米颗粒的合成与优化 |
| 1 实验试剂与仪器 |
| 1.1 主要试剂 |
| 1.2 实验仪器 |
| 2 合成方法和步骤 |
| 2.1 在室温水相中合成Cu_(2-x)Se纳米颗粒 |
| 2.2 合成Cu_(2-x)Se@PtSe纳米颗粒 |
| 3 基本表征 |
| 3.1 透射电子显微镜镜形貌和大小 |
| 3.2 各主要元素的定量分析 |
| 3.3 UV-vis-NIR吸收图谱 |
| 3.4 X射线晶体衍射图(XRD) |
| 3.5 水合粒径和电势 |
| 3.6 CT成像信号强度 |
| 4 结果分析与讨论 |
| 4.1 形貌与粒径分析 |
| 4.2 元素含量的测定 |
| 4.3 光学性质与晶型结构 |
| 4.4 电势与水合粒径 |
| 4.5 CT成像信号强度 |
| 5 本章小结 |
| 第三章 CSP-ACF纳米颗粒的制备与表征 |
| 1 实验试剂与仪器 |
| 1.1主要试剂 |
| 1.2 实验仪器 |
| 2 合成方法和步骤 |
| 2.1 在室温水相中合成Cu_(2-x)Se纳米颗粒 |
| 2.2 合成Cu_(2-x)Se@PtSe纳米颗粒 |
| 2.3 合成CSP-ACF纳米颗粒 |
| 3 CS和CSP纳米颗粒的基本表征 |
| 3.1 透射电子显微镜图,高分辨透射电子显微镜图,能量色散X射线能谱 |
| 3.2 X射线晶体衍射(XRD) |
| 3.3 X射线光电子能谱(XPS) |
| 3.4 水合粒径和电势 |
| 3.5 傅里叶红外变换光谱(FTIR) |
| 3.6 UV-vis-NIR吸收图谱 |
| 3.7 CT成像信号强度 |
| 3.8 体外的类过氧化氢酶实验 |
| 3.9 体外监测CSP-ACF纳米颗粒释放ACF小分子速率 |
| 4 CSP纳米颗粒的结构与性能分析 |
| 4.1 尺寸与粒径分析 |
| 4.2 CSP纳米颗粒结构与晶型 |
| 4.3 CSP纳米颗粒的元素价态 |
| 4.4 对ACF小分子修饰后CSP纳米颗粒进行表征 |
| 4.5 CSP-ACF纳米颗粒的胶体稳定性测试 |
| 5 纳米颗粒相关性质的探究 |
| 5.1 CSP纳米颗粒的对X射线的强衰减能力 |
| 5.2 CSP纳米颗粒的类过氧化氢酶作用 |
| 5.3 ACF小分子的释放速率 |
| 6 本章小结 |
| 第四章 CSP纳米颗粒的放疗增敏研究 |
| 1 实验试剂和测试仪器 |
| 1.1 实验用细胞株 |
| 1.2 实验用品及试剂盒 |
| 1.3 测试仪器 |
| 2 实验步骤 |
| 2.1 细胞复苏 |
| 2.2 细胞传代 |
| 2.3 细胞毒性试验 |
| 2.4 细胞吞噬实验 |
| 2.5 qPCR定量VEGF的表达水平 |
| 2.6 细胞乏氧水平测试 |
| 2.7 细胞周期检测 |
| 2.8 细胞克隆形成实验 |
| 2.9 DNA损伤实验 |
| 2.10 细胞凋亡实验 |
| 3 结果分析与讨论 |
| 3.1 细胞毒性评估 |
| 3.2 4T1细胞中血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平 |
| 3.3 CSP纳米颗粒缓解肿瘤乏氧状态 |
| 3.4 CSP纳米颗粒对肿瘤细胞的周期阻滞作用 |
| 3.5 克隆形成实验 |
| 3.6 DNA损伤实验 |
| 3.7 细胞凋亡实验 |
| 4 本章小结 |
| 第五章 CSP纳米颗粒在肿瘤治疗中的应用 |
| 1 实验动物与设备 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验设备 |
| 1.3 实验试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 建立4T1皮下瘤模型 |
| 2.2 光声成像 |
| 2.3 肿瘤治疗 |
| 2.4 肿瘤切片 |
| 3 结果分析与讨论 |
| 3.1 CSP纳米颗粒体内缓解肿瘤乏氧环境 |
| 3.2 实体肿瘤放疗 |
| 3.3 肿瘤的微观变化与基因表达水平改变 |
| 4 本章小结 |
| 第六章 总结与展望 |
| 1 总结 |
| 2 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间的成果 |
| 致谢 |
（10）双驱动微马达的制备及其动力学研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 微马达的制备方法 |
| 1.2.1 球形Janus微微马达的制备 |
| 1.2.2 管状微微马达的制备 |
| 1.2.3 棒状微马达的制备 |
| 1.3 微马达的应用 |
| 1.3.1 药物输送 |
| 1.3.2 环境治理应用 |
| 1.3.3 生物传感器 |
| 1.4 本文主要工作 |
| 第二章 有机-无机复合Janus微马达的制备 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验试剂及设备 |
| 2.3 实验部分 |
| 2.3.1 实验前期准备 |
| 2.3.2 实验过程 |
| 2.4 实验结果与讨论 |
| 2.5 结论 |
| 第三章 Pt/Fe_3O_4双驱动微马达的制备 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验设备及试剂 |
| 3.3 实验过程 |
| 3.3.1 实验前期准备 |
| 3.3.2 实验过程 |
| 3.4 实验结果与讨论 |
| 3.5 结论 |
| 第四章 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士期间本人公开发表的论文 |
| 致谢 |
四、高效、快速清洗盖玻片法（论文参考文献）
- [1]异源表达细菌素BMP32r杀菌和抑制生物膜作用机制研究[D]. 乔柱. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [2]NaOH/尿素体系下高活性纤维素酶的构建及其回收性能的研究[D]. 邹昊学. 青岛科技大学, 2021(01)
- [3]26S蛋白酶体膜定位的机制及功能研究[D]. 张雅楠. 浙江大学, 2021(01)
- [4]LncRNA Fendrr调控心肌成纤维细胞活化增殖的机制研究[D]. 施鹏. 安徽医科大学, 2021(01)
- [5]全自动血细胞仪定量检测红细胞凝集方法及自身免疫病检出抗红细胞抗体初探[D]. 盛楠. 大连医科大学, 2021(01)
- [6]2019年池州市部分地区宠物犬皮肤病病因调查及治疗效果分析[D]. 包腾飞. 安徽农业大学, 2020(06)
- [7]超分辨显微技术中光激活荧光蛋白性质的测定及大肠杆菌趋化信号与运动行为的关联研究[D]. 陶安泰. 中国科学技术大学, 2020(01)
- [8]基于硅纳米结构提高SALDI-MS的解吸/电离效率[D]. 朱群艳. 吉林大学, 2020(01)
- [9]HIF-1抑制剂修饰的核壳结构纳米颗粒克服肿瘤辐射抗性[D]. 周兴国. 苏州大学, 2020(02)
- [10]双驱动微马达的制备及其动力学研究[D]. 陈蕾. 苏州大学, 2020(02)