核基质 MINTC 末端片段相互作用分子的筛选和鉴定 (2226-2959)

一、核基质MINTC端片段(2226-2959)相互作用分子的筛选与鉴定（论文文献综述）

李军锋^[1]（2006）在《泛素—蛋白酶体途径参与小鼠SPEN家族MINT蛋白转录调控作用的研究》文中进行了进一步梳理泛素-蛋白酶体途径被认为是在哺乳动物细胞中选择性的降解短寿命蛋白的主要系统。受调节蛋白主要与细胞周期进程、应激反应、抗原呈递、信号传导、转录调控、DNA损伤修复、凋亡、细胞器官的生物发生有关。泛素化是一系列酶级联传递泛素的结果。具体过程为，泛素激活酶E1催化泛素与底物蛋白结合，即以ATP依赖的方式通过硫醇酯键将泛素的C-端硫醇基与自身的半胱氨酸结合，然后将活化的泛素传递给泛素结合酶E2；泛素连接酶E3将结合着泛素的泛素结合酶和底物蛋白连接，从而促进泛素的羧基末端的甘氨酸与底物蛋白内部的赖氨酸ε的氨基之间形成异肽键，泛素与蛋白结合；部分底物蛋白尚需要多聚泛素化聚集因子E4参与多聚泛素链的形成。之后，泛素多聚链的蛋白分子被26S蛋白酶复合体识别和降解，泛素-C-末端水解酶或者异肽酶酶解释放泛素分子。 UbcH8是人的泛素结合酶基因UBE2L6编码的蛋白，属于主要包含Ubc结构域的第一类泛素结合酶家族（Class Ⅰ E2s）成员。第一类泛素结合酶家族分子不能将泛素分子直接传递给底物蛋白，提示这类E2需要借助泛素连接酶E3进行底物蛋白的识别。研究表明：UbcH8可以与RING finger或者BR motif-containing domain （in between RING fingers）以及HECT[6]等结构域的蛋白发生相互

董潇^[2]（2005）在《鸟苷酸交换因子Vav1与核基质蛋白MINT相互作用的初步研究》文中指出MINT（Msx2-interacting nuclear target protein）是在研究与MSX2（Muscle segment homeobox 2）相互作用的蛋白时,发现的一个核基质蛋白,MSX2是一个同源盒转录抑制因子,参与颅骨和神经的发育。MINT属于在多个发育过程中都发挥着重要作用的Spen蛋白家族。Spen家族蛋白大小相差较大,从90～600kD不等,但都特征性的在N末端包含数个RRMs（RNA recognition motifs）结构域,在C末端包含一个保守的SPOC（Spen paralog and ortholog C-terminal domain）结构域,其主要负责介导与SMRT/N-CoR等共抑制因子的相互作用。后来又确认了MINT蛋白的人同源物SHARP（SMRT/HDAC1 associated repressor protein）,受到核受体募集参与转录抑制调控复合体。MINT/SHARP介导的转录抑制对于HDAC（Histone deacetylases）的抑制剂TSA敏感,同时SHARP也是HDAC共抑制复合体中的新的组成之一,说明MINT/SHARP介导的转录抑制是HDAC依赖性的。最近,Kuroda以及Oswald等人研究发现MINT蛋白及

杨曦^[3]（2005）在《转录共抑制因子MINT对软骨细胞分化的调控作用机理的研究》文中研究表明软骨是半透明的结缔组织,在胚胎发育及成人的软骨内成骨过程中发挥重要功能。软骨一般分为三种类型:透明软骨、纤维软骨及弹性软骨。Ⅱ型胶原是透明软骨的细胞外基质的主要成分。Ⅱ型胶原主要由增殖的软骨细胞表达,而肥大软骨细胞则不表达。Ⅱ型胶原的异常表达会引起软骨发育异常,出现细胞外基质、软骨形态及生长板异常的症状,说明Ⅱ型胶原的表达对细胞外基质,软骨及生长板的形成和结构的完整性有重要的作用。因此研究Ⅱ型胶原基因的表达调控对于深入了解软骨及骨的发育和相关疾病的发生都具有重要的理论意义 多种转录因子参与调控Ⅱ型胶的表达。在软骨细胞和非软骨细胞中SOX9（Sry-type high-mobility-group box）都可以结合软骨特异性的Ⅱ型胶原基因增强子并激活其转录。SOX9是一种具有HMG domain的转录因子,它在胚胎发育期的软骨原基及软骨中都有表达,当SOX9基因发生突变导致躯干发育及软骨发育异常从而引起侏儒症。因此SOX9可能是软骨发育的关键因子,除SOX9

李军锋,周鹏,秦红,韩骅^[4]（2003）在《核基质MINTC端片段（2226-2959）相互作用分子的筛选与鉴定》文中研究说明目的 :为了研究MINT的功能及其转录抑制的机制 ,筛选与MINT相互作用的蛋白 .方法 :以MINT第 2 2 2 6 2 95 9氨基酸 （F5 ）为诱饵 ,用酵母双杂交法筛选小鼠胚胎 9d的cDNA文库 .用诱饵质粒和文库先后转化酵母宿主后 ,对 4 .5× 1 0 6个酵母克隆进行了营养筛选和α 半乳糖苷酶筛选 ,获得 5 1个阳性克隆 .从中提取质粒进行酶切鉴定 ,获得 1 0个非重复克隆 ,对此 1 0个克隆进行序列分析 .结果 :筛选到的 3个基因分别为MINT ,α 晶状体蛋白结合蛋白 1 （AlphaA CRYBP1 ）和核受体辅抑制因子 1 （N CoR1 ） .在酵母中分析了N CoR1与MINT的作用区段 ,N CoR1与MINT的 2 2 2 6 2 95 9和 2 96 0 35 76两个片段均有相互作用 .结论 :①MINT在细胞内可能形成二聚或多聚体 ;②除了RBP J和MSX2外 ,MINT还可能调节AlphaA CRYBP1的活性 ;③MINT可能通过N CoR1募集组蛋白去乙酰化酶 （HDAC）进行转录抑制

李军锋^[5]（2003）在《核基质蛋白MINT相互作用分子的筛选》文中研究表明Notch基因及其编码的产物在结构和功能上从线虫到人类几乎所有生物中都是保守的。Notch信号途径在各种脊椎动物和无脊椎动物的各种细胞的分化命运决定中起重要作用。在果蝇的神经、肌肉、卵子发生中，Notch信号途径参与它们的发育过程，在哺乳动物中Notch信号途径调节造血系统、神经、肌肉、胰腺、血管和其他一些组织的发育。Notch信号途径在不同细胞系、不同发育阶段对细胞的分化起促进或抑制作用。 线虫的Notch同源基因为lin-12和GLP-1。哺乳类的同源基因有4个分别为Notchl-4。Notch是一种细胞膜受体，是由胞外区、单次跨膜区和胞内段组成。当Notch受体受到配体（Delta/Jagged/Serrate）的刺激而激活时，它的胞内区在presenilin-like蛋白酶的作用下从近膜处裂解，释放出胞内区。释放的胞内区不经其它信号转导分子的作用可直接进核，与DNA结合蛋白RBP-J相互作用并激活下游基因如果蝇的E（spl）（Enhancer of split）复合体及哺乳类的Hes（Hairy andenhancer of split）家族基因。 RBP-J是果蝇促神经发生基因Su（H）（Suppressor of hairless）在 第四军医大学硕士研究生论文哺乳动物的同源物。它通过其识别序列（COGTGGGAA）结合于受调控基因的启动子区，在转录激活因子的驱动下调节细胞分化和个体发育相关基因的表达。在没有N。tCh胞内段的情况下，RBPJ可与包含 SM盯（silencing mediator for retlnold and thyroid hormonereceptor）和组蛋白去乙酞化酶的转录辅助抑制复合物结合，当Notch信号被激活时；RBPJ可与 N。tCh的胞内段结合而与转录辅助抑制复合物分离，通过募集组蛋白乙酞转移酶 PCAF和 GCNS而激活转录。RB P刁的基因剔除小鼠的和NN血的基困剔除小鼠表型相近，其纯合子基因剔除鼠在胚胎发育期ic．5天即死亡。四种不同的NN。h受体和不同的配体分别表达子哺乳动物不同的细胞，而 RBP＊却是普遍表达的，所以 RBP－J是N。tch信号途径中一个基本介导物。 为了进一步研究 RBP＊的功能，日本京都大学的 THOlljO研究组分用酵母双杂交系统从。J、鼠 9．sdpc胚胎和人的 Hela细胞 cDNA文库中筛选到一个可以与RB P斗相互作用的新蛋白RAM 7，后发lA RAM7与 MmT（MsxZ－inter肌ting nuclear target protein）为同一蛋白。进一步的研究表明 MINT可以与 N成Ch受体的胞内段竞争结合RBP－J，n而抑制RBP刁的转录激活作用。MINT是在研究与同源盒转录抑制因子 MSXZ相互作用的蛋白时，发现的一个新的支架蛋白参与颅骨的发育，命名为MINT，”是一种定位于细胞核的核基质中一种对转录有负调控作用的蛋白质，其转录物分布于成体的各个组织。MINT属于一个新的 SPEN（Split ends）蛋白家族成员。SPEN是果蝇中一个分子量为600kDa的巨大核蛋白，参与果蝇发育过程中神经元蝉的决定和神经元突起延伸的调节。韩驿教授与T HOfljO研究组合作对小鼠的MtwT进行了基因剔除，对 Dopartment OfMedical Genet。。d Deveboent BI’otogy 5 第四军医大学硕士研究生论文剔除的纯合子表型初步分析表明＊＊T为小鼠胚胎发育所必需的，并提示MINT参与。J、鼠的中枢神经的发育。MffeT在与 MSXZ，KAR（RetlflolC ACid RCCeptofS）和 RBp－J结合后对转录起抑制作用，其果蝇同源物SPEN参与YAN在RT朋asMAPK途径中的转录抑＄］。 上述的研究表明MINT在许多信号途径特别是N。t。h信号途径中起到转录抑制作用。为了进一步明确MINT在细胞转录调控网络中的作用和MINT介导的转录抑制作用的机制，完善N。t。h信号途径的调控体系，我们用酵母双杂交的方法对MINT相互作用蛋白进行了筛选。 鉴于MwT基因编码区较长，共有 10799个碱基，故此我们将MINT分为六段，分别命名为FI一F6，本研究以其中的F5（222E959）和F6（296S576）片段为研究对象，将H者分别插入pGB盯7载体中，结果显示：MINTFS可与核受体辅助抑制因子 1阶CORI)，O－晶状体蛋白结合蛋白 1hlphatcRYBP入及Mw加互作用，而F6可与IgM的重链恒定区、泛素结合酶2L6和一个未知功能的新的蛋白基因进行结合。 N－CORI通过募集组蛋白去乙酞化酶(HDA来介导与脂类激素结合的核受体的基本转录抑制，可在核受体未与脂类激素结合的条件下与核受体结合，抑制核受体的对下游靶基困的激活作用。组蛋白去乙酞化酶通过使染色质中的组蛋白的去乙酞化，从而重构染色体的结构，抑制转录活性。 AlphaA－C盯BP，又名鼠人类1型免疫缺陷病毒增强子结合蛋白 1（Hivepl）属锌指蛋白超家族的成员，是一种含两个独立的C。H。锌指结构的转录因子，表达于成年个体的多个组织中。最初发现 Dopartment OfMedical Geneti。。d Devempment Biology 6 第四军医大学硕士研究生论文它可以和a－晶体球蛋白基因的启动子区结合而命名，后又发现其同源物可见于果蝇，线虫，小鼠，大鼠以及人类等。其?

二、核基质MINTC端片段(2226-2959)相互作用分子的筛选与鉴定（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、核基质MINTC端片段(2226-2959)相互作用分子的筛选与鉴定（论文提纲范文）

（1）泛素—蛋白酶体途径参与小鼠SPEN家族MINT蛋白转录调控作用的研究（论文提纲范文）

（2）鸟苷酸交换因子Vav1与核基质蛋白MINT相互作用的初步研究（论文提纲范文）

（3）转录共抑制因子MINT对软骨细胞分化的调控作用机理的研究（论文提纲范文）

（4）核基质MINTC端片段（2226-2959）相互作用分子的筛选与鉴定（论文提纲范文）

（5）核基质蛋白MINT相互作用分子的筛选（论文提纲范文）

四、核基质MINTC端片段(2226-2959)相互作用分子的筛选与鉴定（论文参考文献）

• [1]泛素—蛋白酶体途径参与小鼠SPEN家族MINT蛋白转录调控作用的研究[D]. 李军锋. 第四军医大学, 2006(12)
• [2]鸟苷酸交换因子Vav1与核基质蛋白MINT相互作用的初步研究[D]. 董潇. 第四军医大学, 2005(06)
• [3]转录共抑制因子MINT对软骨细胞分化的调控作用机理的研究[D]. 杨曦. 第四军医大学, 2005(06)
• [4]核基质MINTC端片段（2226-2959）相互作用分子的筛选与鉴定[J]. 李军锋,周鹏,秦红,韩骅. 第四军医大学学报, 2003(24)
• [5]核基质蛋白MINT相互作用分子的筛选[D]. 李军锋. 中国人民解放军第四军医大学, 2003(03)

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