一、我国马铃薯茎尖培养脱毒和脱毒试管苗微繁研究进展（论文文献综述）
陈龙[1]（2021）在《外施褪黑素促进苹果脱毒的技术与机理研究》文中进行了进一步梳理病毒病害是制约苹果产业高效、持续发展的重要因素。与真菌病害和细菌病害不同,植物一旦感染病毒病害,难以用其他方法治愈。栽培无毒苗是目前生产上防治病毒病害的有效方法。建立简易、高效的脱毒技术是培育和栽培无毒苗的必要条件。对苹果危害最大的潜隐病毒有三种,它们是苹果褪绿叶斑病毒（apple cholorotic leafsopt virus,ACLSV）,苹果茎痘病毒（apple stem pitting virus,ASPV）和苹果茎沟病毒（apple stem grooving virus,ASGV）。ASPV不能侵染顶端分生组织,容易脱除,而ASGV能侵染顶端分生组织,难以脱除。褪黑素可以调控植物的生长发育,增强植物对非生物胁迫（如干旱、低温、盐碱等）和生物胁迫（如真菌和细菌）的抗性,但在增强植物对病毒抗性和脱毒方面极少有报道。本研究旨在:（1）以模式植物为材料,研究外施褪黑素对烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus,TMV）的抗性。通过病毒相对含量、防御基因表达量和抗病相关因子含量测定,初步探究外施褪黑素促进植物抗病毒的机理,并将获得的结果在苹果植株上验证;（2）测试外施褪黑素脱除苹果ASGV和ASPV的效果,通过测定抗病相关因子和病毒相对含量及病毒在茎尖的定位,揭示褪黑素促进病毒脱除的机理;（3）测试褪黑素介导植物增强对病毒抗性的关键因子（SA和NO）脱除ASGV和ASPV的效果,建立脱毒新方法。获得的主要研究结果如下:（1）以心叶烟（Nicotiana glutinosa）、普通烟草（N.tabacum）和番茄（Solanum lycopersicum）模式植物为试材,研究了外施褪黑素对烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus,TMV）抗性的效应。心叶烟（N.glutinosa）根部外施褪黑素,增强了植株对TMV局部侵染的抗性,以100μM褪黑素施用两次效果最佳,枯斑抑制率达37.4%。RT-q PCR检测结果表明,番茄根部外施褪黑素后,PR1和PR5基因表达上调,TMV相对含量下降,以100μM褪黑素施用两次时效果最显着。Dot-ELISA对TMV的测定结果也验证了外施褪黑素降低TMV的含量。根部外施褪黑素促进了番茄带毒植株中水杨酸（SA）和一氧化氮（NO）的积累,但对H2O2含量没有明显影响。外施NO供体硝普钠（SNP）和亚硝基谷胱甘肽（GSNO）可以上调PR1和PR5的表达,降低带毒植株中的病毒浓度。外施一氧化氮抑制剂c PTIO,明显降低褪黑素诱导的对TMV的抗性。以转水杨酸羟化酶基因（nah G）的普通烟草（N.tabacum cv.Xanthi-nn）为材料,接种TMV后发现,nah G烟草更易感病,接种3天后病毒浓度为野生型烟草的3倍,外施100μM褪黑素对nah G烟草的TMV相对浓度没有明显影响。以上研究表明,褪黑素介导的TMV抗性很可能依赖于NO和SA途径。（2）以单感ASGV的‘Gala’苹果试管苗为材料,培养在添加0-20μM褪黑素的增殖培养基中培养。结果表明,10-20μM褪黑素明显促进茎的增殖,10-15μM褪黑素明显促进茎的伸长。外施褪黑素明显提高试管苗内源吲哚乙酸（IAA）含量,以15μM褪黑素处理的效果最为明显。在含有15μM褪黑素的增殖培养基培养4周后,取0.5 mm带有2片叶原基的茎尖进行培养,茎尖培养的成活率与对照没有明显差异,再生率由对照组的47%提高至85%,脱毒率由对照组的0%提高到95%。外施15μM褪黑素明显促进试管苗内源SA和NO积累。RT-q PCR对病毒的定量检测表明,褪黑素处理显着降低带毒植株的病毒含量,病毒相对浓度下降约60%。免疫组织化学法对病毒定位研究发现,褪黑素处理抑制ASGV在茎尖的转运,扩大茎尖的无毒区。（3）以复合感染ASGV和ASPV的‘Gala’苹果试管苗为材料,取叶片外殖体培养在含有0-30μM褪黑素的再生培养基中,诱导不定芽。从不定芽取茎尖（0.3-0.5 mm、带2-3个叶原基）培养获得完整试管苗。结果表明,再生培养基中添加15-30μM褪黑素明显提高叶片不定芽再生力。对照组的不定芽发生率和不定芽数分别为81.6%和3.9。15μM和30μM褪黑素处理的不定芽发生率和不定芽数分别为100%和5.8与5.2,显着高于对照组。再生培养基中添加褪黑素（15-30μM）能提高茎尖的再生率及脱毒率,以15μM褪黑素处理对ASGV和ASPV脱毒率最高,分别达到53%和100%。免疫组织化学法对病毒定位研究发现,外施褪黑素扩大茎尖的无毒区,促进茎尖培养脱除病毒。（4）以复合感染ASGV和ASPV的‘Gala’苹果试管苗为材料,培养在添加了SA和NO供体硝普钠（SNP）的培养基培养4周后,取茎尖（0.3-0.5mm、带2-3个叶原基）培养获得完整试管苗。结果表明,低浓度的SA（10μM）与SNP（10μM和50μM）对试管苗的伸长和增殖无显着影响,高浓度SA（100μM）与SNP（70μM）明显抑制试管苗的生长,但明显提高ASGV和ASPV的脱毒率。本研究首次揭示了外施褪黑素能明显提高植物对TMV的抗性。外施褪黑素、SA及NO供体硝普钠（SNP）能有效脱除ASGV和ASPV,并初步揭示了外施褪黑素提高脱毒率的机理。本研究为植物脱毒开辟了新的途径,具有重要的理论和应用研究价值。
刘晓雪[2]（2019）在《大蒜种质超低温保存体系建立及其脱毒效应分析》文中研究指明大蒜作为营养繁殖蔬菜,其传统的种质保存方式存在诸多弊端。超低温保存技术是一项具有广阔应用前景的植物种质离体保存技术,已在一些国家主要大蒜基因型和品种保存中应用。然而由于该项技术具有极显着的基因型特异性,相关研究在我国起步较晚,现有资料少且不成体系,从而极大地制约了该技术在我国大蒜种质保存中的应用。此外,目前国内外研究所采用的大蒜茎尖均取材于田间环境,使外植体易受到病原污染而导致超低温保存失败,同时由于田间大蒜的品种特性、种植季节和栽培方式影响,极大地限制了茎尖外植体的足量稳定供应,因此茎尖取材成为大蒜超低温保存研究与应用所共同面临的一个主要问题。超低温技术除能长时间且稳定地保存植物种质外,还兼具脱除植物组织内病原体的作用,即超低温疗法。目前该疗法已在很多园艺植物上应用,然而将超低温疗法应用于大蒜病毒脱除方面的研究资料较少。此外,超低温保存作为一项植物种质离体保存技术,对经其处理冷冻后再生植株的遗传稳定性及田间生长适应性等方面进行评价是十分必要的,而此类研究在大蒜作物上鲜有报道。本研究通过离体诱导大蒜不定芽为其超低温保存提供茎尖取材的新途径,同时建立了适合中国大蒜品种的超低温保存体系;对比了超低温疗法与传统方法的脱毒效果;采用分子标记、流式细胞技术及植株田间生长评价,多角度地对超低温保存再生大蒜的遗传稳定性进行了验证。本研究获得如下主要结果:1.以大蒜茎盘为外植体,通过优化植物生长激素浓度,建立了适用于10个中国大蒜品种的不定芽再生体系。获得不定芽平均增殖系数达18.6,可为大蒜超低温保存研究提供数量充足,生理状态及发育程度一致的无菌材料。采用简单序列重复（Simple sequence repeat,SSR）检测再生植株,未发现变异条带。2.利用离体诱导产生的不定芽茎尖作为材料,通过筛选关键参数建立了如下大蒜超低温保存体系:从大蒜离体不定芽（培养5-7周,假茎粗2-3 mm）中剥取茎尖（长度约2 mm,包含2-4个叶原基和基部短缩茎组织）于室温24℃,在MS+6.5 g/L琼脂+0.3 mol/L蔗糖的固体培养基上预培养2 d后,在MS+2 mol/L甘油+0.6 mol/L蔗糖加载液中室温培养20 min,采用玻璃化液PVS3在0℃条件下,对茎尖保护性脱水1.5 h,随后将内含茎尖的PVS3液滴滴在铝箔条上,将铝箔条装入冷冻管并迅速浸入液氮冷冻1 h,直接将载有冷冻茎尖的铝箔条于室温下浸入卸载液MS液体培养基+1.2 mol/L蔗糖进行快速解冻,10 min后换新鲜卸载液继续卸载,将解冻后的茎尖接种于恢复培养基MS+6.5 g/L琼脂+30 g/L蔗糖进行再生。以10个中国大蒜品种验证了该体系的广谱性,获得平均存活率和再生率分别为56.1%和48.3%,同时发现该体系并不适用于供试早熟大蒜品种的超低温保存。研究以未熟花序离体诱导的不定芽为试材,证明了两种茎尖来源对大蒜超低温保存效果无影响,为大蒜超低温保存提供了新的离体茎尖来源。组织学切片观察表明经超低温冷冻后的大蒜茎尖,其茎端分生组织及包裹在外的第1-4个幼嫩叶原基中的大部分细胞可以存活,而靠近茎端基部及外围叶片的细胞则在冷冻过程中死亡。SSR和流式细胞分析结果表明超低温再生大蒜植株既未出现变异条带,也没有发生染色体倍性变异。3.采用酶联免疫吸附测定法（DAS-ELISA）和反转录-聚合酶链式反应法（RT-PCR）检测,发现田间生长的大蒜（G064）普遍受到洋葱黄矮病毒（OYDV）、韭葱黄条斑病毒（LYSV）、大蒜潜隐病毒（GLV）和大蒜系列病毒（GarVs）的复合侵染。对比超低温疗法和大蒜传统脱毒方法对上述病毒的脱除效率,超低温疗法对OYDV的脱除率最高达76.4%,且试管苗再生率（65.0%）显着高于传统脱毒方法。4.通过设置防虫设施的盆栽试验,从大蒜植株形态指标、光合特性、生育期、花芽鳞芽分化及鳞茎特性方面对比了超低温再生大蒜、离体再生大蒜及田间大蒜的生长情况。发现超低温再生大蒜在植株生长、叶片光合能力及鳞茎特性上均具有显着优势,同时结合盆栽大蒜的病毒检测结果认为这些优势与超低温疗法的脱毒效应密切相关。对比田间和离体来源大蒜的各项指标,证明了大蒜离体再生植株在形态、光合生理层面的相对稳定性。总体而言,经超低温保存后的大蒜再生植株能够良好地适应其原生环境。本研究为我国大蒜超低温种质库的建立提供了相关资料和技术支持,同时也为该项技术在大蒜作物上的发展与应用提供了依据。
张媛媛[3]（2019）在《榆林地区马铃薯主栽品种的茎尖脱毒研究》文中指出目前,全世界范围内已知的马铃薯病毒大约有40多种,其中能够直接影响我国马铃薯产业的主要包括6种病毒（PVX,PVY,PVA,PVM,PVS,PLRV）和1种类病毒（PSTVd）。马铃薯病毒病发病严重时可导致减产高达60%,这严重影响了榆林地区马铃薯产业的发展。本研究的主要目的和意义是,采用茎尖脱毒技术来脱除马铃薯体内对生产造成危害的病毒及类病毒,恢复马铃薯的优良种性,改善品质,提高产量,大力推广马铃薯脱毒种薯,最终做到为生产服务,将对提高榆林马铃薯生产技术水平和产业开发水平、增强市场竞争力、增加农民收入、促进地方经济发展具有十分重要的意义。本论文主要对榆林地区马铃薯主栽品种（克新1号、夏波蒂、费乌瑞它、冀张薯8号、青薯9号、陕北红洋芋）的脱毒技术进行了研究,主要研究内容和结果如下:（1）不同浓度的生长调节剂对不同品种的马铃薯茎尖分化成苗的影响夏波蒂的茎尖培养成苗难度最大、周期较长、成苗率相对较低。在同一配方的培养基中,比其他品种生长缓慢,而且容易黄化死亡。在NAA、GA3浓度固定为0.1 mg.L-1的情况下调整6-BA的使用浓度,在一定范围内能够提高茎尖的成活率和成苗率,陕北红洋芋的最适6-BA浓度为0.05 mg.L-1,夏波蒂的最适6-BA浓度为0.15 mg.L-1,克新1号和青薯9号的最适6-BA浓度为0.1 mg.L-1,当浓度达到0.2 mg.L-1的时候,对茎尖发育会产生抑制作用。费乌瑞它和冀张薯8号用D-泛酸钙代替培养基中的NAA,茎尖生长势明显,成苗率明显提高。（2）筛选出了6个本地区主栽品种的较适宜培养基配方克新1号、青薯9号——MS+0.1mg.L-1 NAA+0.1mg.L-1 GA3+0.1mg.L-1 6-BA+白糖3%+卡拉胶0.65%夏波蒂——MS+0.1mg.L-1 NAA+0.1mg.L-1 GA3+0.15mg.L-1 6-BA+白糖3%+卡拉胶0.65%费乌瑞它、冀张薯8号——MS+0.1mg.L-1 6-BA+0.1mg.L-1 GA3+0.2mg.L-1 D-泛酸钙+白糖3%+卡拉胶0.65%陕北红洋芋——MS+0.1mg.L-1 NAA+0.1mg.L-1 GA3+0.05mg.L-1 6-BA+白糖3%+卡拉胶0.65%（3）不同茎尖大小对马铃薯脱毒效果的影响马铃薯茎尖成活率和成苗率与茎尖大小呈正比,茎尖越大,茎尖越容易成活;反之,脱毒率与茎尖大小呈反比,茎尖越大,脱毒率越低。综合考虑,带2个叶原基的茎尖大小比较理想。（4）马铃薯芽长度和剥离时间对脱毒效果的影响马铃薯剥离芽的长度和剥离时间可以影响茎尖成苗率和脱毒成功率。在春季马铃薯刚刚结束休眠期的时候,一般是3月下旬,在室温条件下（大约14℃16℃）,先暗光催芽7-10d,再经散射光照射5-7d后,马铃薯芽状态为短壮芽;在4月初开始剥离的茎尖成活率高。在合适的芽长度和剥离时间进行剥离,抓住茎尖生命力最旺盛、顶端病毒最稀薄的时间节点,不仅能使茎尖的成活率和成苗率达到最大,而且更易获得脱毒合格的试管苗。（5）不同栽培方式和基肥配比对马铃薯脱毒微型薯生产的影响在马铃薯脱毒微型薯生产中,使用苗床移栽方式优于传统地栽方式,不易积水,能有效的隔离病虫害的发生和蔓延;基肥配比b（15袋蛭石+1kg撒可富+0.2kg二胺）下移栽苗生长健壮,种薯数量和质量都比较高,更适合脱毒微型薯生产。
王敏瑞[4]（2019）在《苹果带毒茎尖超低温保存与茎尖超低温技术对病毒脱除和保存效应的研究》文中研究指明超低温保存被认为是目前最理想的植物种质资源长期保存的方法。在诸多研究中发现,不同实验室用同样的方法保存同一基因型时再生率有很大差异。探明导致这种情况发生的原因无疑将有利于不同实验室超低温基因库的建立。病毒病害是制约苹果生产可持续发展的主要因素之一,无毒苗的培育是生产上防止病毒病害的核心技术。苹果茎痘病毒（apple stem grooving virus,ASGV）是一种难以脱除的病毒,建立该病毒的高效脱毒新技术有利于苹果产业的发展。带毒材料是病毒基础研究和应用研究的前提条件。病毒是专性病原体,必须依赖寄主才能复制与增殖。因此,病毒的长期保存十分困难。建立病毒高效、安全、长期的保存技术可为病毒的基础研究和应用研究提供病原材料。本研究旨在:（1）比较苹果带毒（ASGV）茎尖与无毒茎尖超低温保存后再生的差异,并探讨病毒导致茎尖超低温保存后再生力低的原因;（2）建立热处理结合茎尖超低温疗法高效脱除ASGV的技术,并揭示其脱毒机理;（3）建立茎尖超低温保存ASGV的技术,并证明该技术保存病毒的有效性。本研究获得的主要研究成果如下:1.以苹果‘Gala’单感ASGV和无毒试管苗为试材,用小滴玻璃化（droplet-vitrification）保存茎尖。结果表明,带毒茎尖与无毒茎尖的成活率和再生率均没有明显差异。但无毒茎尖的再生速度快于带毒茎尖,且均再生正常的茎。带毒茎尖表现出三种再生类型:正常茎、莲座茎和莲座茎带不正常叶片,三种再生类型的比例分别为45%,32%和23%。ASGV带毒苗和无毒苗在继代培养基上培养4周后,带毒苗形成的茎数/株为7.2,明显高于无毒苗（5.1）。无毒苗形成的≥1.0 cm和<1.0 cm但≥0.5 cm的茎数为2.9和2.2,且没有<0.5 cm的茎。带毒苗形成的≥1.0 cm、<1.0 cm但≥0.5cm和<0.5 cm的茎数分别为1.8、2.8和2.6,分别占总茎数的25%、38.9%和36.1%。无毒苗的生长素（IAA）和玉米素（ZR）含量分别为15.9和14.3μg/g,明显高于带毒苗（12.4μg/g和11.2μg/g）。带毒苗的可溶性糖、可溶性总蛋白和脯氨酸水平分别为11.1 mg/g、8.7 mg/g和17.2μg/g,分别比无毒苗高16%、30%和28%。无毒苗的电解质渗出率为8.1%,明显低于带毒苗（9.8%）。组织切片对超低温保存后成活细胞在茎尖的分布结果表明:无毒茎尖的成活细胞分布在顶端分生组织1-8层和第1-4叶原基,成活细胞的比例分别为62%和34%。而带毒茎尖的成活细胞分布在顶端分生组织1-5层和第1-4叶原基,成活比例分别为46%和30%。细胞超微结构研究表明:无毒茎尖和带毒茎尖的超微结构大致相似,唯有线粒体形态有所不同:无毒茎尖细胞的线粒体为卵形（正常）,而带毒茎尖细胞的线粒体明显加长。带毒试管苗生长素和玉米素的降低可能导致试管苗茎数量的增加和长度降低。病毒引起的细胞膜伤害（电解质渗出率上升）和线粒体超微结构的变化可能降低细胞对超低温的抗性,进而导致再生正常茎的能力降低。2.以单感ASGV的苹果‘Gala’试管苗为试材,成功建立了热处理结合小滴玻璃化法茎尖超低温疗法脱除ASGV的技术。将带毒试管苗置于36 o C/32 o C（白天/夜间）光照条件下热处理4周,从热处理后的试管苗上取1.5 mm（带3-4叶原基）的茎尖,经小滴玻璃化超低温处理或茎尖培养,获得再生试管苗。待试管苗移入温室生长10个月后,用RT-PCR检查植株的带毒情况。结果表明,热处理不会影响带毒试管苗的成活,但明显影响试管苗的营养生长:热处理后植株茎的长度为2.5 cm,显着低于对照（3.5 cm）;但增殖率（4.7）明显高于对照（2.5）。超低温疗法后的茎尖再生率随热处理周数的延长而明显下降,但脱毒率明显上升。热处理4周的脱毒率为100%。热处理后茎尖培养的再生率（78%）高于超低温疗法（44%）,但前者的脱毒率（26%）明显低于后者（100%）。热处理结合茎尖超低温疗法分别得到了100%（‘Fuji’）、40%（‘浓果25’）、30%（‘瑞雪’）和83%（‘M9’）的脱毒率。免疫组织化学法对ASGV在‘Gala’和‘瑞雪’茎尖的定位表明:ASGV可感染两个苹果品种的顶端分生组织和幼嫩叶原基。随着热处理周数的增加,茎尖顶端分生组织的无毒区明显扩大。热处理4周后,‘Gala’茎尖的分生组织和第1-5片叶原基不能定位到病毒,而‘瑞雪’茎尖的第4叶原基中能明显定位到病毒。超低温疗法处理后,‘Gala’和‘瑞雪’的茎尖顶端分生组织和第1-3片叶原基中有大量细胞成活,但‘Gala’在第4叶原基中仅有少量细胞成活,而‘瑞雪’的第四片叶原基中有较多细胞成活。病毒在不同基因型茎尖中分布的不同和超低温处理后的茎尖细胞成活模式的差异解释了不同基因型中存在脱毒率差异的原因。3,以单感ASGV的苹果‘Gala’试管苗为试材,用小滴玻璃化法（droplet-vitrification）和包埋干燥法（encapsulation-dehydration）分别处理茎尖,获得62-67%的再生率。再生试管苗经RT-PCR检测,两种茎尖超低温方法所获得的再生苗ASGV带毒率均为100%。与带毒试管苗（对照）比较,超低温保存后带毒苗继代培养8周后的增殖率和病毒浓度明显低于对照,但继代培养16周后的增殖与病毒浓度与对照相似。使用试管苗微型嫁接技术将超低温保存后的带毒苗嫁接在苹果‘Gala’无毒试管苗上,嫁接21天后的传毒率为100%。将超低温保存后的病毒使用摩擦接种技术侵染烟草叶片,接种21天后,明显观察到烟草叶片上的病毒症状。应用RT-PCR法在显示症状的叶片中检测到了病毒。对超低温保存的ASGV病毒的三个基因片段（包括编码外壳蛋白和运动蛋白）的测序结果表明,超低温保存后的ASGV与对照ASGV基因序列的相似性为99.87%。本研究获得的结果为使用无毒材料超低温保存植物种质资源提供了理论依据。热处理结合茎尖超低温疗法为脱除难脱除的植物病毒提供了新的技术。茎尖超低温病毒保存技术为植物病毒的安全、长期、高效保存开辟了新的途径。
赵恢[5]（2018）在《马铃薯种子实生苗培育体系建立及茎尖脱毒培养条件优化》文中认为
陈玉霞,邱建辉,张朝臣,刘作斌[6]（2016）在《甘薯茎尖脱毒培养技术研究》文中认为[目的]探讨利用甘薯茎尖分生组织获得脱毒苗以及脱毒苗鉴定的方法。[方法]以甘薯茎尖分生组织为培养对象,通过蔗糖及外源激素单因素试验研究甘薯茎尖脱毒培养技术。[结果]甘薯茎尖分生组织生长培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+NAA 0.10 mg/L+蔗糖40 g/L+琼脂6.5 g/L,试管苗生根培养基为1/2MS+NAA 0.20 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L。在茎尖生长培养基上对25个甘薯品种的茎尖分生组织进行培养,结果表明,8个品种的出苗率为50.0%79.3%,16个品种的出苗率达80.0%以上,其中,5个品种的出苗率为100.0%。在生根培养基上,试管苗生根率达100%,根多而粗壮,茎叶生长旺盛。试管苗不用炼苗,可直接从培养瓶中移栽至细河沙中,成活率达100%。以巴西牵牛作为指示植物,采用靠接法对试管苗进行脱毒鉴定,脱毒率为79.1%。[结论]该研究为甘薯茎尖脱毒苗生产提供适宜的培养基配方和简便易行的脱毒苗鉴定技术。
李会,张庚,孟义江,葛淑俊[7]（2016）在《掌叶半夏微茎尖培养脱毒和快繁体系的建立》文中进行了进一步梳理研究了茎尖大小、激素浓度、培养基成分对药用植物掌叶半夏脱毒效果的影响以及影响无病毒苗快速繁殖的因素等,结果表明:茎尖大小是影响茎尖成活和脱毒效果的主要因素,0.20.5mm的茎尖培养在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L培养基上,成活率为53.3%,病毒脱除率为76.7%,培养基中附加247mg/L NH4+可有效提高茎尖成活率至86.7%,同种培养基上继续培养,可一次性成功诱导形成试管苗,移栽成活率高达100%。MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L+GA30.5mg/L组合最有利于试管茎的形成和发育,从而建立了以掌叶半夏微茎尖为外植体的脱毒和快速繁殖体系。
杨喜珍[8]（2016）在《不同马铃薯品种试管薯苗对植物生长调节剂的响应及应用技术研究》文中指出马铃薯试管育苗是马铃薯良种繁育体系的核心技术,试管苗的快速扩繁是马铃薯种薯生产的基础环节。马铃薯试管苗在快繁的过程中,随着继代次数的增加,常年使用的试管苗会出现植株纤细、叶色嫩黄、植株生长势弱等系列退化现象。亟待通过调控技术在有限时间内培育出茎杆粗壮、根系发达的健壮试管薯苗,才能有效促进马铃薯良种繁育体系的良性发展,为生产提供足够的脱毒优良种薯。本研究以春薯5号和D613两个马铃薯试管苗为试验材料,研究了马铃薯试管薯苗强壮的调控技术及对薯苗移栽的作用和影响,通过系列试验,筛选能够达到使试管马铃薯苗实现壮苗培养的植物生长调节剂和使用剂量,探求了植物生长调节剂对马铃薯试管苗移栽的影响,企图为实现马铃薯试管育苗提供综合技术。研究结果如下:1、春薯5号试管苗通过使用植物生长调节剂PP333、CCC、B9、6-BA后培养,具有促使试管苗健壮生长的明显作用,经过分析比较后得出,10mg/L的CCC处理、5mg/L及10mg/L的B9处理均可以用于春薯5号的壮苗培养调控。2、经使用植物生长调节剂培养的春薯5号试管苗在移栽时,其移栽成活率均比不使用调节剂的空白对照处理有明显提高,经过以成活率、结薯数、合格薯率、大薯率等为指标分析比较得出,10mg/L的CCC处理、5mg/L及10mg/L的B9均可有利于春薯5号试管苗培养与移栽。3、D613试管苗在使用植物生长调节剂PP333、CCC、B9、6-BA的培养下,使得试管薯苗生长受到不同程度的调控,进一步经过实验处理分析对比得出,0.2mg/L的PP333处理以及10mg/L的B9处理可用于D613试管薯苗的壮苗培养,其效果较为理想。4、经使用植物生长调节剂培养的D613试管苗进行移栽时,其移栽成活率受到不同程度的影响,0.2mg/L的PP333处理以及0.5mg/L的6-BA处理,均降低了D613试管苗的移栽成活率,以移栽成活率、结薯数、结薯合格率、大薯率等为指标进行综合对比分析得出,仅10mg/L的B9处理可促使D613试管苗培养与移栽。总之,必须随薯类遗传属性的不同,选用不同类型的生长调节剂、选用不同使用剂量,才可以获得理想的培育调控效应,实现试管薯苗的壮苗,并提高移栽成活率、结薯数及改善薯类产品质量等目的。
李百荃[9]（2016）在《苹果属（Malus）试管苗植株再生、茎尖超低温保存和脱毒技术研究》文中认为苹果是全球第二大果树。中国是世界最大的苹果生产国。苹果属种质资源是苹果传统育种和基因工程育种的基础。超低温保存被认为是长期保存植物种质资源最理想的方法。病毒病是制约苹果可持续发展的重要因素,栽培无毒苗木是目前生产上防止病毒病害的有效方法,培育无毒苗是栽培无毒苗的前提条件,建立高效的脱毒技术是培育无毒苗的关键技术。本研究旨在:1.建立广谱、高效的苹果叶片不定芽再生技术体系;2.利用叶片再生不定芽的茎尖建立苹果超低温保存技术体系;3.利用叶片再生不定芽的茎尖培养和茎尖超低温疗法脱除苹果病毒,并揭示不同脱毒技术的脱毒机理;4.研究不同带毒状况对苹果试管苗营养生长、生理代谢及茎尖超低温保存的影响。获得的主要结果如下:1.以‘Gala’和‘Fuji’两个品种及‘M9’和‘M26’两个砧木为试材,取4周苗龄的试管苗顶端1-3片完全展开叶,培养在含有不同浓度的Thidiazuron（TDZ）和0.5mg L-1 Indole-3-Butytric acid（IBA）组合的再生培养基上,22±2 oC暗培养3周后,转到光照下培养,8周后的再生结果表明,‘Gala’和‘Fuji’的最佳再生培养基为2 mg L-1TDZ+0.5 mg L-1 IBA和2-3 mg L-1 TDZ+0.5 mg L-1 IBA,再生率为100%,‘Gala’的不定芽数/外植体为6.4,‘Fuji’为2.9-3.1。‘M9’和‘M26’的最佳再生培养基为3 mg L-1 TDZ+0.5-1.5 mg L-1 IBA,再生率为100%,‘M9’的不定芽数/外植体为3.8-4.7,‘M26’为4.2-4.6。将叶片再生技术用于测试苹果属另外3个种的5个基因型,所有测试基因型均可获得100%的再生率和0.6-8.7的不定芽数/外植体（平均数为4.5）。Inter-simple sequence repeat（ISSR）检测‘Gala’不定芽再生植株未发现异常条带。2.以‘Gala’为试材,从11周龄的叶片不定芽取3 mm（带6片叶原基）的茎尖,用3%的硅藻酸钠在0.1M的氯化钙溶液中包埋茎尖成小球（直径约5 mm）,将小球在含有0.5M蔗糖的培养基上预培养5天后,超净台中空气干燥6h,置入冷冻管（10个小球/冷冻管）,直接投入液氮保存,水浴（38oC）解冻后2 min后,培养在含有0.25 mg L-1BA+0.01 mg L-1 IBA的再生培养基上再生植株。超低温保存后茎尖的再生率为79.3%。将该技术用于测试苹果属4个种的8个基因型。结果表明,除‘Greensleeves’外,其他7个基因型的再生率分别为:‘Fuji’62.5%,‘Himekami’27.5%,‘Wangshanhong’43.8%,‘M9’74.0%,‘M26’52.5%,‘Pingdinghaitang’50.0%,‘Balenghaitang’66.3%。利用ISSR检测‘Gala’超低温保存再生植株未发现异常条带。3.以‘Gala’为试材,在叶片不定芽再生的不同时期取不同大小的茎尖进行培养。结果表明,不定芽发育时期及茎尖大小对成活率没有明显影响,但会影响再生率和ASPV的脱毒率。不定芽再生2-3周时,0.3 mm的茎尖（含2片叶原基）的再生率为10-15%,ASPV脱除率为100%;不定芽再生3-4周时,0.3 mm的茎尖（含3片叶原基）的再生率为53-55%,ASPV脱除率为95-100%;不定芽再生4周时,0.4 mm的茎尖（含4片叶原基）的再生率为82%,但ASPV脱除率仅为20%。不定芽再生的各时期,任何茎尖大小都不能脱除ASGV。组织学观察和免疫组织化学病毒定位结果解释了叶片不定芽再生不同时期及不同大小的茎尖培养能脱除ASPV,不能脱毒ASGV的原因。4.以‘M9’和‘M26’试管苗顶芽为试材,研究了茎尖培养和超低温疗法脱除ASPV和ASGV的效果。茎尖培养时,茎尖大小与再生率成正比,与ASPV脱毒率成反比,任何茎尖大小都不能脱除ASGV。茎尖超低温疗法时,0.5 mm的茎尖（含2片叶原基）不能再生,1.5 mm的茎尖（带5-6个叶原基）的再生率明显高于1.0 mm（带3-4个叶原基）的茎尖,两种大小茎尖对ASPV的脱毒率相似（80-85%）。无论茎尖大小,都不能脱除ASGV。组织学观察和免疫组织化学病毒定位结果揭示了超低温疗法能有效脱除ASPV,而不能脱毒ASGV的机理。Flow cytometry（FCM）对超低温疗法的脱毒苗的鉴定没有发现DNA倍性的差异。5.以‘Gala’为试材,比较了无毒、单感（ASGV）和双感（ASGV+ASPV）试管苗在营养生长、生理代谢及茎尖超低温保存的差异。结果表明,带毒试管苗萌芽时间长、茎增殖数增多、株高降低、生长量减少（鲜重增长量和干重）、叶绿素含量降低、电解质渗出率、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量及脯氨酸含量增加。茎尖超低温保存后的成活率和再生率与取茎尖的茎长度相关。其中,取自≥1 cm及<1 cm,≥0.5 cm茎的无毒与带毒茎尖的成活率没有明显差异,但取自单感ASGV和双感（ASGV+ASPV）<0.5 cm茎的茎尖的成活率和再生率明显降低。无毒茎（≥1 cm和<1 cm,≥0.5 cm）的茎尖再生率没有明显差异;单感（ASGV）材料茎尖的再生率显着低于相同长度无茎尖的再生率;相同长度双感（ASGV+ASPV）茎尖再生率最低。本研究获得的结果为建立苹果超低温种质资源超低温库搭建了技术平台;叶片不定芽茎尖培养和茎尖超低温疗法脱毒为苹果脱毒开辟了新的途径,超低温疗法的脱毒效应表明超低温技术可以同时实现种质资源保存和脱除病原菌;首次强调材料的带毒状况是影响茎尖超低温保存的重要因素,为使用无毒材料进行超低温保存提供了实验证据。
周颖媛[10]（2014）在《怀菊花脱毒快繁技术及脱毒苗大田适应性研究》文中研究表明本研究以怀菊花优良品种小黄菊[Huaiqing chrysanthemum （Chrysanthemummorifolium） cv. Xiaohuangju]为试材，首次建立了怀菊花的脱毒快繁技术体系，并且对获得的脱毒试管苗的生理生化特性、遗传稳定性和大田适应性进行了系统研究。取得了如下研究结果：1.建立了怀菊花的脱毒快繁技术体系（1）适宜的脱毒培养方式是先热处理（白天38℃，12h；夜晚30℃，12h）6周，再切取带有一个叶原基的茎尖（0.3～0.5mm），置于MS+KT0.03mg/L培养基上培养，待长成苗后再切离茎尖，培养成苗。成苗率达54%，脱毒率达80%。（2）脱毒苗快速繁殖适宜的培养基是MS+NAA0.05mg/L+6-BA0.01mg/L，壮苗生根的培养基是1/2MS+PP3330.2mg/L，其壮苗生根效果最好，移栽时苗根系发达，叶色浓绿，茎杆粗壮，移栽成活率达95%。2.探明了脱毒对怀菊花试管苗生理生化和遗传稳定性的影响（1）脱毒提高了怀菊花的光合能力以及N代谢水平。与对照苗相比，在生长发育过程中，脱毒试管苗叶片中叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量显着增加，NR活力、Pro含量和可溶性蛋白含量均显着提高。（2）脱毒降低了怀菊花的膜脂过氧化程度，提高了抗膜脂过氧化能力。与对照苗相比，培养期间，脱毒试管苗叶片中MDA含量、O2·-生成速率和H2O2含量均低于对照苗，酶促清除系统的5中保护酶（SOD、POD、CAT、APX、GR）活力增加，非酶促的2种保护物质（ASA、GSH）含量增加，均达到显着性差异（P=0.05）。（3）同工酶水平和分子水平的证据显示脱毒处理没有改变怀菊花的遗传稳定性。经POD、SOD同工酶比较，脱毒苗与对照苗的条带数并没有发生变化，而亮度高于对照苗，说明脱毒后POD、SOD的稳定性没有改变，活性却增加了；在DNA水平上，用筛选出的引物ISSR05对脱毒苗和对照苗进行ISSR检测，二者扩增出的9条条带均没有差异。3.脱毒增强了怀菊花的大田适应性，提高了产量、改善了品质，筛选出了脱毒优良株系。（1）脱毒增强了怀菊花的大田长势。不同脱毒株系的株高、冠幅均高于对照，以脱毒株系YD5J6最为突出，与其对照株系YD5相比，在P=0.05水平上，株高在8、9、10月达显着性差异，冠幅在每个月都有显着性差异。（2）脱毒没有改变怀菊花的花期，但提高了其产量。与对照株系相比，脱毒株系单株鲜重、单株干重、单株花头数、单株分蘖数、舌状花花瓣的长度和宽度均有所增加，其中脱毒株系YD5J6的单株花头数、单株干重、单株鲜重、亩产与其对照株系YD5相比均达到显着性差异（P=0.05），亩产（鲜重）可达1170.12kg，增幅为16.4%。（3）脱毒提高了与绿原酸和木樨草苷合成相关的关键酶的活力，改善了品质。各脱毒株系花瓣的PAL、C4H、4CL活力在四个花期（现蕾期、透色期、初花期、盛花期）均高于对照株系，透色期达到最高，其中脱毒株系YD5J6与其对照株系YD5在各个花期均达显着性差异（P=0.05）；各脱毒株系花瓣中绿原酸、木犀草苷含量均高于对照，且脱毒株系YD5J6与其对照株系YD5有显着性差异（P=0.05），绿原酸含量高达0.79%，木犀草苷含量高达0.22%，增幅分别为39.7%、62.6%。综合以上，本研究不仅建立了有效的怀菊花脱毒快繁技术体系，而且筛选出了表现优良的脱毒株系，为怀菊花脱毒苗的推广与应用提供了理论依据。
二、我国马铃薯茎尖培养脱毒和脱毒试管苗微繁研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、我国马铃薯茎尖培养脱毒和脱毒试管苗微繁研究进展（论文提纲范文）
（1）外施褪黑素促进苹果脱毒的技术与机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 苹果生产概况与病毒病害对苹果生产的影响 |
| 1.2 苹果脱毒技术的研究现状 |
| 1.2.1 茎尖培养 |
| 1.2.2 热疗法 |
| 1.2.3 化学疗法 |
| 1.2.4 茎尖嫁接 |
| 1.2.5 茎尖超低温疗法 |
| 1.3 褪黑素在植物中的研究进展 |
| 1.3.1 褪黑素的概况 |
| 1.3.2 褪黑素调控植物生长发育的功能 |
| 1.3.3 褪黑素增强植物对非生物胁迫的抗性 |
| 1.3.4 褪黑素增强植物对生物胁迫抗性的研究 |
| 1.3.5 褪黑素增强植物对生物胁迫抗性的机理 |
| 1.4 本研究的目的和意义 |
| 1.4.1 研究目的 |
| 1.4.2 研究意义 |
| 1.5 本研究的思路和技术路线 |
| 第二章 褪黑素增进植物抗病毒的机理研究 |
| 2.1 试验材料、仪器和试剂 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 主要试验仪器和设备 |
| 2.1.3 主要试验试剂 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 TMV病毒粒子的提纯 |
| 2.2.2 外施褪黑素对烟草TMV局部侵染抗性的影响 |
| 2.2.3 外施褪黑素对番茄TMV系统侵染抗性的影响 |
| 2.2.4 外施褪黑素对番茄叶片SA含量的影响 |
| 2.2.5 外施褪黑素对番茄叶片H_2O_2含量的影响 |
| 2.2.6 外施褪黑素对番茄叶片NO含量的影响 |
| 2.2.7 外施NO供体对番茄TMV抗性的影响 |
| 2.2.8 内源SA对番茄TMV抗性的影响 |
| 2.2.9 试验设计与数据分析 |
| 2.3 试验结果 |
| 2.3.1 外施褪黑素对烟草TMV局部侵染抗性的影响 |
| 2.3.2 外施褪黑素对番茄TMV系统侵染抗性的影响 |
| 2.3.3 外施褪黑素对番茄叶片中SA含量的影响 |
| 2.3.4 外施褪黑素对番茄叶片中H_2O_2含量的影响 |
| 2.3.5 外施褪黑素对番茄叶片NO含量的影响 |
| 2.3.6 NO对番茄TMV抗性影响 |
| 2.3.7 内源SA对番茄TMV抗性影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 外施褪黑素结合茎尖培养脱除ASGV的研究 |
| 3.1 试验材料、仪器与试剂 |
| 3.1.1 植物材料 |
| 3.1.2 主要仪器设备 |
| 3.1.3 主要试剂 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 带毒试管苗的建立与保持 |
| 3.2.2 外施褪黑素对带毒试管苗增殖的影响 |
| 3.2.3 外施褪黑素对带毒试管苗内源IAA含量的影响 |
| 3.2.4 外施褪黑素对茎尖培养脱毒的影响 |
| 3.2.5 再生苗的温室移栽 |
| 3.2.6 病毒的反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测 |
| 3.2.7 病毒的指示植物法与DAS-ELISA检测 |
| 3.2.8 外施褪黑素对带毒试管苗内源SA与NO含量的影响 |
| 3.2.9 外施褪黑素对带毒试管苗病毒含量的影响 |
| 3.2.10 外施褪黑素对病毒在茎尖分布的影响 |
| 3.2.11 试验设计与数据分析 |
| 3.3 试验结果 |
| 3.3.1 外施褪黑素对带毒试管苗增殖的影响 |
| 3.3.2 外施褪黑素对带毒试管苗内源IAA含量的影响 |
| 3.3.3 外施褪黑素对茎尖培养脱毒的影响 |
| 3.3.4 病毒RT-PCR检测结果 |
| 3.3.5 病毒的指示植物法与DAS-ELISA检测结果 |
| 3.3.6 外施褪黑素对带毒试管苗病毒含量的影响 |
| 3.3.7 外施褪黑素对带毒试管苗内源SA和NO含量的影响 |
| 3.3.8 外施褪黑素对病毒在茎尖分布的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 外施褪黑素结合叶片不定芽茎尖培养脱除苹果病毒的研究 |
| 4.1 试验材料、试剂与主要仪器设备 |
| 4.1.1 植物材料 |
| 4.1.2 主要仪器设备 |
| 4.1.3 主要药品和试剂 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.2.1 带毒试管苗的建立与保持 |
| 4.2.2 外施褪黑素对带毒试管苗叶片不定芽再生的影响 |
| 4.2.3 外施褪黑素结合不定芽茎尖培养的脱毒效果 |
| 4.2.4 病毒的RT-PCR检测 |
| 4.2.5 外施褪黑素影响叶片再生不定芽的组织学观察和病毒定位 |
| 4.2.6 试验设计与数据分析 |
| 4.3 试验结果 |
| 4.3.1 外施褪黑素对带毒试管苗叶片不定芽再生的影响 |
| 4.3.2 外施褪黑素结合叶片再生不定芽茎尖培养的脱毒效应 |
| 4.3.3 外施褪黑素对叶片再生不定芽影响的组织学观察和病毒定位 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 褪黑素介导植物增强对病毒抗性的关键因子在促进病毒脱除中的应用研究 |
| 5.1 试验材料、试剂与主要仪器设备 |
| 5.1.1 试验材料 |
| 5.1.2 主要试验仪器和设备 |
| 5.1.3 主要试验试剂 |
| 5.2 试验方法 |
| 5.2.1 带毒试管苗的建立和保持 |
| 5.2.2 外施SNP与SA对带毒试管苗增殖的影响 |
| 5.2.3 外施SNP与SA对茎尖培养脱毒的影响 |
| 5.2.4 病毒的RT-PCR检测 |
| 5.2.5 试验设计与数据分析 |
| 5.3 试验结果 |
| 5.3.1 外施SNP与SA对带毒试管苗增殖的影响 |
| 5.3.2 外施SNP与SA对茎尖培养脱毒的影响 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 本研究的结论与创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）大蒜种质超低温保存体系建立及其脱毒效应分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 大蒜种质资源的重要性 |
| 1.2 大蒜种质资源传统保存方法及存在问题 |
| 1.3 植物种质超低温保存 |
| 1.3.1 概念及原理 |
| 1.3.2 常用方法 |
| 1.3.3 保存程序 |
| 1.3.4 优势及应用 |
| 1.4 大蒜种质超低温保存研究现状 |
| 1.4.1 建立大蒜超低温保存体系的研究 |
| 1.4.2 世界大蒜超低温种质库发展概况 |
| 1.4.3 超低温保存大蒜种质研究中存在的问题 |
| 1.5 大蒜病毒脱除技术研究 |
| 1.5.1 病毒病对大蒜生产的影响 |
| 1.5.2 传统大蒜脱毒技术 |
| 1.5.3 超低温疗法与大蒜脱毒 |
| 1.6 本研究的目的和意义 |
| 1.7 研究内容和技术路线 |
| 1.7.1 研究内容 |
| 1.7.2 技术路线 |
| 第二章 大蒜茎盘不定芽离体再生体系的建立 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 药品试剂 |
| 2.1.3 仪器设备 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 建立大蒜试管材料 |
| 2.2.2 茎盘诱导不定芽培养基的激素筛选 |
| 2.2.3 茎盘诱导不定芽培养基的广适性测试 |
| 2.2.4 再生植株的驯化移栽 |
| 2.2.5 再生植株的遗传稳定性检测 |
| 2.2.6 试验设计与数据分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 植物激素浓度对茎盘诱导不定芽的影响 |
| 2.3.2 茎盘诱导不定芽培养基的广适性测试 |
| 2.3.3 再生植株遗传稳定性的SSR鉴定 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 大蒜不定芽茎尖超低温保存体系的建立 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 植物材料 |
| 3.1.2 药品试剂 |
| 3.1.3 仪器设备 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 超低温保存体系预实验及关键参数筛选 |
| 3.2.2 超低温保存体系的多品种广适性试验 |
| 3.2.3 不同来源大蒜茎尖的超低温保存效果比较 |
| 3.2.4 再生植株遗传稳定性鉴定 |
| 3.2.5 超低温冻后茎尖成活细胞分布 |
| 3.2.6 试验设计与数据分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 超低温保存体系中关键参数的筛选 |
| 3.3.2 大蒜超低温保存体系的广适性分析 |
| 3.3.3 茎尖来源对大蒜超低温保存的影响 |
| 3.3.4 再生植株的遗传稳定性鉴定 |
| 3.3.5 超低温保存茎尖成活细胞分布 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 大蒜超低温脱毒效应研究 |
| 4.1 试验材料 |
| 4.1.1 植物材料 |
| 4.1.2 药品试剂 |
| 4.1.3 仪器设备 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.2.1 大蒜病毒圃的建立 |
| 4.2.2 大蒜传统脱毒方法 |
| 4.2.3 大蒜超低温疗法脱毒 |
| 4.2.4 病毒检测 |
| 4.2.5 试验设计与数据分析 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 田间大蒜自然带毒情况 |
| 4.3.2 超低温疗法与传统方法脱毒效果比较 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 大蒜超低温保存再生植株的田间生长评价 |
| 5.1 试验材料 |
| 5.1.1 植物材料 |
| 5.1.2 药品试剂 |
| 5.1.3 仪器设备 |
| 5.2 试验方法 |
| 5.2.1 试验地概况 |
| 5.2.2 试验设计 |
| 5.2.3 测定项目与方法 |
| 5.2.4 数据统计方法 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 盆栽大蒜植株形态指标评价 |
| 5.3.2 盆栽大蒜叶片光合指标评价 |
| 5.3.3 盆栽大蒜生育期及花芽鳞芽分化评价 |
| 5.3.4 盆栽大蒜鳞茎特性评价 |
| 5.3.5 盆栽大蒜病毒检测结果 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 结论与创新点 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（3）榆林地区马铃薯主栽品种的茎尖脱毒研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要符号对照表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.1.1 马铃薯概述 |
| 1.1.2 我国马铃薯生产概况 |
| 1.1.3 榆林马铃薯产业概况 |
| 1.1.4 榆林马铃薯产业发展的巨大优势 |
| 1.1.5 存在的问题 |
| 1.2 马铃薯病毒病 |
| 1.2.1 马铃薯病毒病的发现及危害 |
| 1.2.2 马铃薯病毒病的种类、症状和传播方式 |
| 1.2.3 国内外马铃薯脱毒种薯繁育体系概况 |
| 1.2.4 榆林市马铃薯脱毒种薯繁育体系概况 |
| 1.3 马铃薯脱毒技术 |
| 1.3.1 马铃薯脱毒技术种类 |
| 1.3.2 马铃薯脱毒效果的检测技术 |
| 1.4 研究的目的和意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 材料和设备 |
| 2.1.1 马铃薯品种来源 |
| 2.1.2 马铃薯品种 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 主要仪器 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 主要试剂的配制 |
| 2.2.2 培养基的制备 |
| 2.2.3 茎尖剥离脱毒方法 |
| 2.2.4 病毒检测 |
| 2.2.5 脱毒苗防虫网棚移栽试种 |
| 2.3 数据统计分析 |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 不同品种茎尖成活率及成苗率的比较 |
| 3.2 不同培养基中茎尖成活率及成苗率的比较 |
| 3.2.1 克新1 号茎尖接种培养生长状况分析 |
| 3.2.2 夏波蒂茎尖接种培养生长状况分析 |
| 3.2.3 费乌瑞它茎尖接种培养生长状况分析 |
| 3.2.4 冀张薯8 号茎尖接种培养生长状况分析 |
| 3.2.5 青薯9 号茎尖接种培养生长状况分析 |
| 3.2.6 陕北红洋芋茎尖接种培养生长状况分析 |
| 3.2.7 较适宜培养基配方筛选 |
| 3.3 不同茎尖大小对茎尖成活率及成苗率的比较 |
| 3.4 马铃薯芽长度和剥离时间对脱毒效果的比较 |
| 3.5 不同栽培方式和基肥配比对马铃薯脱毒微型薯生产的比较 |
| 第四章 结论与讨论 |
| 4.1 讨论 |
| 4.1.1 不同品种的茎尖成活率及成苗率 |
| 4.1.2 生长调节剂与马铃薯茎尖分化成苗 |
| 4.1.3 不同茎尖大小对马铃薯脱毒效果的影响 |
| 4.1.4 马铃薯芽长度和剥离时间对脱毒效果的影响 |
| 4.1.5 不同栽培方式和基肥配比对马铃薯脱毒微型薯生产的影响 |
| 4.2 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（4）苹果带毒茎尖超低温保存与茎尖超低温技术对病毒脱除和保存效应的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 第一章 引言 |
| 1.1 苹果生产概况 |
| 1.1.1 全球苹果的生产概况 |
| 1.1.2 我国苹果的生产概况 |
| 1.2 苹果种质资源与重要性 |
| 1.2.1 苹果属植物的起源 |
| 1.2.2 苹果属种质资源的重要性 |
| 1.3 苹果种质资源的传统保存方法 |
| 1.4 苹果茎尖超低温保存 |
| 1.4.1 玻璃化法 |
| 1.4.2 .小滴玻璃化法 |
| 1.4.3 包埋干燥法 |
| 1.4.4 包埋玻璃化法 |
| 1.4.5 影响苹果茎尖超低温保存效率的因素 |
| 1.4.6 目前植物茎尖超低温保存中存在的两个问题 |
| 1.5 苹果病毒病害及对生产的影响 |
| 1.5.1 苹果病毒病的种类 |
| 1.5.2 苹果病毒病害的影响 |
| 1.6 苹果脱毒技术 |
| 1.6.1 传统的脱毒技术 |
| 1.6.2 苹果茎尖超低温疗法脱除病毒 |
| 1.7 植物病毒的保存 |
| 1.7.1 植物病毒保存的意义 |
| 1.7.2 植物病毒保存的传统方法 |
| 1.7.3 茎尖超低温保存病毒技术的提出 |
| 1.8 本研究的目的和意义 |
| 1.9 本研究中的技术路线 |
| 第二章 苹果茎沟病毒对苹果茎尖超低温保存影响的研究 |
| 2.1 试验材料、试剂与主要仪器设备 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 主要药品和试剂 |
| 2.1.3 主要仪器设备 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 试管苗的建立和培养 |
| 2.2.2 RT-PCR法病毒检测 |
| 2.2.3 ASGV带毒茎尖的小滴玻璃化超低温保存 |
| 2.2.4 ASGV对茎尖超低温保存后植株再生的影响测定 |
| 2.2.5 超低温保存后苹果成活茎尖的组织学观察 |
| 2.2.6 ASGV对试管苗增殖的影响测定 |
| 2.2.7 ASGV对于苹果试管苗内源激素和几个生理指标的影响测定 |
| 2.2.8 茎尖分生组织细胞超微结构观察 |
| 2.2.9 试验设计与数据分析 |
| 2.3 试验结果 |
| 2.3.1 ASGV在植株内的检测 |
| 2.3.2 ASGV感染对于超低温保存后的苹果茎尖的再生影响 |
| 2.3.3 超低温保存后ASGV带毒与无毒茎尖的成活细胞组织学观察 |
| 2.3.4 ASGV感染对于试管苗增殖的影响 |
| 2.3.5 感染ASGV病毒对试管苗内源激素、生理代谢和叶片电解质渗出率的影响 |
| 2.3.6 无毒与ASGV带毒试管苗的茎尖细胞超微结构观察 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 热处理结合超低温疗法脱除ASGV病毒 |
| 3.1 试验材料、试剂与主要仪器设备 |
| 3.1.1 植物材料 |
| 3.1.2 主要药品和试剂 |
| 3.1.3 主要仪器设备 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 试验材料的继代与保存 |
| 3.2.2 试管苗的热处理 |
| 3.2.3 茎尖培养 |
| 3.2.4 小滴玻璃化超低温疗法 |
| 3.2.5 热处理结合超低温疗法中不同热处理周数和茎尖大小的筛选 |
| 3.2.6 再生苗的病毒检测 |
| 3.2.7 热处理结合超低温疗法在其它苹果基因型上的应用 |
| 3.2.8 不同热处理周数后ASGV在茎尖中的病毒定位 |
| 3.2.9 热处理结合超低温冷冻后的茎尖成活细胞观察 |
| 3.2.10 试验设计与数据分析 |
| 3.3 试验结果 |
| 3.3.1 热处理对于试管苗营养生长和增殖的影响 |
| 3.3.2 不同周数热处理对茎尖培养或超低温疗法后的茎尖再生与脱毒率的影响 |
| 3.3.3 不同茎尖大小对热处理结合超低温疗法的茎尖再生和脱毒率的影响 |
| 3.3.4 病毒RT-PCR检测结果 |
| 3.3.5 热处理结合超低温疗法在其它苹果基因型上脱除ASGV |
| 3.3.6 不同热处理周数后茎尖内的病毒定位情况 |
| 3.3.7 热处理结合超低温疗法后的茎尖组织细胞成活观察 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 茎尖超低温冷冻保存苹果茎沟病毒(ASGV)的研究 |
| 4.1 试验材料、试剂与主要仪器设备 |
| 4.1.1 植物材料 |
| 4.1.2 主要药品和试剂 |
| 4.1.3 主要仪器设备 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.2.1 试验材料的继代与保存 |
| 4.2.2 超低温保存病毒的方法 |
| 4.2.3 超低温保存后再生苗的RT-PCR病毒检测 |
| 4.2.4 超低温保存后再生植株的营养生长测定 |
| 4.2.5 超低温保存后的再生植株中病毒含量的测定 |
| 4.2.6 超低温保存后的病毒遗传稳定性测定 |
| 4.2.7 超低温保存后病毒微型嫁接的侵染力测定 |
| 4.2.8 微型嫁接的组织学观察 |
| 4.2.9 超低温保存后病毒摩擦接种的侵染力测定 |
| 4.2.10 试验设计与数据分析 |
| 4.3 试验结果 |
| 4.3.1 ‘Gala’带毒茎尖的超低温保存再生 |
| 4.3.2 ASGV病毒的超低温保存效率 |
| 4.3.3 超低温保存后再生植株的营养生长测定 |
| 4.3.4 超低温保存后的再生植株中病毒含量的测定 |
| 4.3.5 超低温保存后的病毒遗传稳定性测定 |
| 4.3.6 超低温保存后病毒微型嫁接的侵染力测定 |
| 4.3.7 微型嫁接的组织学观察 |
| 4.3.8 超低温保存后病毒摩擦接种的侵染力测定 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 结论与创新点 |
| 5.1 全文结论 |
| 5.2 创新点 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（6）甘薯茎尖脱毒培养技术研究（论文提纲范文）
| 1材料与方法 |
| 1.1材料 |
| 1.2方法 |
| 2结果与分析 |
| 2.1甘薯茎尖生长培养基配方筛选 |
| 2.2不同甘薯品种的茎尖培养效果 |
| 2.3甘薯试管苗生根培养基配方 |
| 2.4甘薯试管苗移栽 |
| 2.5甘薯试管苗的脱毒鉴定 |
| 3结论与讨论 |
（7）掌叶半夏微茎尖培养脱毒和快繁体系的建立（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 掌叶半夏茎尖的剥离和培养 |
| 1.2.2 掌叶半夏的器官分化和出瓶移栽 |
| 1.2.3 掌叶半夏试管茎诱导 |
| 1.2.4基于RT-PCR法的试管苗病毒检测 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 掌叶半夏茎尖大小对成活率和脱毒效果的影响 |
| 2.2 培养基成分对掌叶半夏愈伤组织诱导的影响 |
| 2.3 6-BA和NAA浓度对掌叶半夏器官分化的影响 |
| 2.4 激素浓度对试管茎形成的影响 |
| 3 讨论与结论 |
| 3.1 影响脱毒效果的因素 |
| 3.2 影响离体块茎形成的因素 |
（8）不同马铃薯品种试管薯苗对植物生长调节剂的响应及应用技术研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 立题背景 |
| 1.2 研究进展 |
| 1.2.1 马铃薯退化现象 |
| 1.2.2 影响试管苗生长的主要因素 |
| 1.2.3 植物生长调节剂与马铃薯试管苗 |
| 1.3 研究的目的和意义 |
| 1.3.1 研究目的 |
| 1.3.2 研究内容 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 供试马铃薯品种 |
| 2.1.2 供试植物生长调节剂 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 基础苗培养 |
| 2.2.2 试验设计 |
| 2.3 技术路线 |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 生长调节剂在春薯5号薯苗培育中的应用效应研究 |
| 3.1.1 不同生长调节处理对春薯5号试管薯苗株高的影响 |
| 3.1.2 不同生长调节剂处理对春薯5号试管薯苗根长的影响 |
| 3.1.3 不同生长调节剂处理对春薯5号试管薯苗茎粗的影响 |
| 3.1.4 不同生长调节剂处理对春薯5号试管薯苗茎鲜重的影响 |
| 3.1.5 不同生长调节剂处理对春薯5号试管薯苗根系鲜重的影响 |
| 3.1.6 不同生长调节剂处理对春薯5号试管薯苗植株重量的影响 |
| 3.1.7 不同生长调节剂处理对春薯5号试管苗叶绿素含量的影响 |
| 3.1.8 不同生长调节剂处理对春薯5号试管薯苗后期移栽的影响 |
| 3.2 生长调节剂在D613试管薯苗培育中的应用效应研究 |
| 3.2.1 不同生长调节剂处理对D613试管薯苗株高的影响 |
| 3.2.2 不同生长处理对D613试管苗根长的影响 |
| 3.2.3 不同生长调节剂处理对D613试管薯苗茎粗的影响 |
| 3.2.4 不同生长调节剂处理对D613试管薯苗茎鲜重的影响 |
| 3.2.5 不同处理对D613试管苗根鲜重的影响 |
| 3.2.6 不同生长调节剂处理对D613试管薯苗植株重量的影响 |
| 3.2.7 不同生长调节剂处理对D613试管苗茎叶叶绿素含量的影响 |
| 3.2.8 不同生物调节剂处理对D613试管薯苗试管苗后期移栽的影响 |
| 第四章 讨论与小结 |
| 4.1 春薯5号壮苗试验 |
| 4.2 春薯5号移栽试验 |
| 4.3 D613试管苗壮苗试验 |
| 4.4 D613试管苗移栽试验 |
| 4.5 研究结论 |
| 4.6 本研究的创新点 |
| 4.7 存在问题与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（9）苹果属（Malus）试管苗植株再生、茎尖超低温保存和脱毒技术研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 苹果种质资源的重要性 |
| 1.2 苹果种质资源的传统保存方法 |
| 1.3 超低温保存 |
| 1.4 苹果茎尖超低温保存 |
| 1.4.1 苹果茎尖超低温保存方法 |
| 1.4.2 存在的主要问题 |
| 1.4.3 超低温保存的遗传稳定性 |
| 1.5 苹果脱毒技术研究 |
| 1.5.1 病毒对苹果生产的影响 |
| 1.5.2 传统脱毒技术 |
| 1.5.3 存在的主要问题 |
| 1.5.4 茎尖超低温疗法脱毒 |
| 1.6 苹果试管苗不定芽再生 |
| 1.6.1 定义和再生方式 |
| 1.6.2 研究概况 |
| 1.6.3 影响不定芽再生的关键因素 |
| 1.6.4 不定芽再生植株的遗传稳定性 |
| 1.6.5 应用前景 |
| 1.7 本研究的目的和意义 |
| 1.8 本研究的技术路线 |
| 第二章 苹果属试管苗不定芽再生技术及茎尖超低温保存技术体系的建立 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 主要药品和试剂 |
| 2.1.3 主要仪器和设备 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 苹果试管苗的建立与保持 |
| 2.2.2 叶片不定芽再生体系的优化与广谱性测试 |
| 2.2.3 不定芽茎尖超低温保存技术体系的优化与广谱性测试 |
| 2.2.4 再生植株的遗传稳定性检测 |
| 2.2.5 试验设计与数据分析 |
| 2.3 试验结果 |
| 2.3.1 叶片不定芽再生 |
| 2.3.2 植物生长调节剂浓度对不定芽再生效率的影响 |
| 2.3.3 不定芽再生技术的广谱性效果测试 |
| 2.3.4 不定芽茎尖超低温保存 |
| 2.3.5 叶片不定芽再生周数对茎尖超低温保存再生的影响 |
| 2.3.6 预培养时间对茎尖超低温保存再生的影响 |
| 2.3.7 茎尖大小对超低温保存再生的影响 |
| 2.3.8 茎尖超低温保存技术的广谱性效果测试 |
| 2.3.9 ISSR对再生植株的遗传稳定性鉴定 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 苹果茎尖培养及茎尖超低温疗法脱毒的效应研究 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 植物材料 |
| 3.1.2 主要药品和试剂 |
| 3.1.3 主要仪器和设备 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 带毒试管苗的建立与保持 |
| 3.2.2 试管苗病毒检测 |
| 3.2.3 不定芽茎尖培养脱毒效应分析 |
| 3.2.4 顶芽茎尖培养与超低温疗法的脱毒的研究 |
| 3.2.5 试验设计与数据分析 |
| 3.3 试验结果 |
| 3.3.1 无毒与带毒试管苗的检测 |
| 3.3.2 不定芽茎尖培养脱毒效果 |
| 3.3.3 顶芽茎尖培养与超低温疗法的脱毒效果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 病毒对苹果试管苗生长、生理代谢及茎尖超低温保存的影响 |
| 4.1 试验材料 |
| 4.1.1 植物材料 |
| 4.1.2 主要药品和试剂 |
| 4.1.3 主要仪器和设备 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.2.1 试管苗的保持 |
| 4.2.2 病毒影响苹果试管苗营养生长的效应分析 |
| 4.2.3 病毒影响苹果试管苗几个生理代谢指标的效应分析 |
| 4.2.4 病毒影响茎尖超低温保存的效应分析 |
| 4.2.5 茎尖超低温保存后再生植株的带毒状况检测 |
| 4.2.6 试验设计与数据分析 |
| 4.3 试验结果 |
| 4.3.1 病毒对苹果试管苗萌芽与生长的影响 |
| 4.3.2 病毒对苹果试管苗几个生理代谢指标的影响 |
| 4.3.3 病毒对苹果试管苗茎尖超低温保存的影响 |
| 4.3.4 超低温保存前后病毒检测RT-PCR结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 结论与创新点 |
| 5.1 全文结论 |
| 5.2 全文创新点 |
| 参考文献 |
| 缩略词 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（10）怀菊花脱毒快繁技术及脱毒苗大田适应性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语表 |
| 目录 |
| 1 前言 |
| 1.1 病毒病是导致菊花产量和品质下降的关键因素 |
| 1.1.1 病毒病是作物产量和品质下降的主要生物因素 |
| 1.1.2 病毒对植物生理生化代谢的影响与其产量和品质下降直接相关 |
| 1.1.3 菊花感染的主要病毒 |
| 1.2 采用茎尖结合热处理是菊花病毒病防治的有效手段 |
| 1.2.1 农药防治病毒病现状 |
| 1.2.2 利用基因工程防治植物病毒病研究现状 |
| 1.2.3 低温疗法脱除病毒研究现状 |
| 1.2.4 茎尖及其结合热处理脱除病毒研究现状 |
| 1.3 植物病毒检测技术研究进展 |
| 1.4 菊花品质相关酶的研究 |
| 1.5 本研究的内容、目的及意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 怀菊花茎尖苗的获得 |
| 2.2.2 怀菊花脱毒试管苗的获得 |
| 2.2.3 怀菊花脱毒试管苗的生理生化特性研究 |
| 2.2.4 怀菊花脱毒试管苗的遗传稳定性研究 |
| 2.2.5 怀菊花脱毒苗的快速繁殖、壮苗生根 |
| 2.2.6 怀菊花脱毒苗大田适应性研究 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 怀菊花茎尖苗的获得 |
| 3.1.1 植物生长调节剂对怀菊花茎尖培养的影响 |
| 3.1.2 茎尖大小对怀菊花茎尖培养的影响 |
| 3.2 怀菊花脱毒试管苗的获得 |
| 3.2.1 最佳脱毒处理方式的确定 |
| 3.2.2 怀菊花脱毒试管苗的病毒检测 |
| 3.3 怀菊花脱毒试管苗的生理生化特性研究 |
| 3.3.1 脱毒对怀菊花试管苗叶绿素含量的影响 |
| 3.3.2 脱毒对怀菊花试管苗 N 代谢的影响 |
| 3.3.3 脱毒对怀菊花试管苗抗膜脂过氧化能力的影响 |
| 3.4 怀菊花脱毒试管苗的遗传稳定性研究 |
| 3.4.1 同工酶谱分析 |
| 3.4.2 ISSR 分析 |
| 3.5 怀菊花脱毒试管苗的快繁与壮苗生根 |
| 3.5.1 快繁 |
| 3.5.2 壮苗生根 |
| 3.6 怀菊花脱毒试管苗大田适应性研究 |
| 3.6.1 怀菊花脱毒试管苗大田农艺性状研究 |
| 3.6.2 怀菊花脱毒试管苗大田产量与品质研究 |
| 4 讨论 |
| 4.1 植物生长调节剂和茎尖大小对植物茎尖培养的影响 |
| 4.1.1 茎尖培养 |
| 4.1.2 茎尖大小 |
| 4.2 植物病毒脱除的有效手段 |
| 4.2.1 脱毒处理方式 |
| 4.2.2 脱毒苗病毒检测 |
| 4.3 脱毒对植物生理生化性状的影响 |
| 4.3.1 脱毒对植物试管苗叶绿素含量的影响 |
| 4.3.2 脱毒对植物试管苗 N 代谢水平的影响 |
| 4.3.3 脱毒对植物试管苗抗膜脂过氧化能力的影响 |
| 4.4 脱毒对植物遗传稳定性的影响 |
| 4.4.1 脱毒对植物 POD 和 SOD 同工酶的影响 |
| 4.4.2 脱毒植物试管苗遗传稳定性的分子检测 |
| 4.5 植物生长调节剂对植物脱毒苗快繁、生根的影响 |
| 4.5.1 脱毒苗快繁 |
| 4.5.2 脱毒苗壮苗生根 |
| 4.6 脱毒对大田生产的影响 |
| 5 结论 |
| 图版 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 |
四、我国马铃薯茎尖培养脱毒和脱毒试管苗微繁研究进展（论文参考文献）
- [1]外施褪黑素促进苹果脱毒的技术与机理研究[D]. 陈龙. 西北农林科技大学, 2021
- [2]大蒜种质超低温保存体系建立及其脱毒效应分析[D]. 刘晓雪. 西北农林科技大学, 2019
- [3]榆林地区马铃薯主栽品种的茎尖脱毒研究[D]. 张媛媛. 西北农林科技大学, 2019(02)
- [4]苹果带毒茎尖超低温保存与茎尖超低温技术对病毒脱除和保存效应的研究[D]. 王敏瑞. 西北农林科技大学, 2019
- [5]马铃薯种子实生苗培育体系建立及茎尖脱毒培养条件优化[D]. 赵恢. 河北科技师范学院, 2018
- [6]甘薯茎尖脱毒培养技术研究[J]. 陈玉霞,邱建辉,张朝臣,刘作斌. 安徽农业科学, 2016(13)
- [7]掌叶半夏微茎尖培养脱毒和快繁体系的建立[J]. 李会,张庚,孟义江,葛淑俊. 作物杂志, 2016(03)
- [8]不同马铃薯品种试管薯苗对植物生长调节剂的响应及应用技术研究[D]. 杨喜珍. 西北农林科技大学, 2016(11)
- [9]苹果属（Malus）试管苗植株再生、茎尖超低温保存和脱毒技术研究[D]. 李百荃. 西北农林科技大学, 2016(08)
- [10]怀菊花脱毒快繁技术及脱毒苗大田适应性研究[D]. 周颖媛. 河南师范大学, 2014(01)